資源描述：
《大鼠脾臟p物質(zhì)免疫反應神經(jīng)纖維的分布及燙傷后含量變化論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、大鼠脾臟P物質(zhì)免疫反應神經(jīng)纖維的分布及燙傷后含量變化論文【關鍵詞】燙傷【Abstract】AIM:ToinvestigatethedistributionandcontentchangeofsubstanceP(SP)immunoreactivenervefibersintheratspleenpostburnandtoexploretherelationbetmunologicalfunctions.METHODS:ThedistributionofSPimmunoreactivenervefibersmuno
2、histochemicalABCmethodbinedenttechnique.Theratsinedbyradioimmunoassay(RIA).RESULTS:Theratspleenmunoreactivenervefibers.ThetissuecontentofSPinthespleendecreasedsignificantly(P0.01)at30,60,120and240minutespostburn.CONCLUSION:Theratspleenisrichlyinnervatedbyposi
3、tiveSPimmunoreactivenervefibersandthecontentofSPinthespleendecreasedsignificantlypostburn.SPmayplaytheroleofenhancingimmunologicalfunction.【Keymunologicalfunction;rat【摘要】目的：研究P物質(zhì)（substanceP，SP）免疫反應陽性神經(jīng)纖維在大鼠脾臟的分布及燙傷后含量變化，探討SP與免疫功能的關系.方法：用ABC免疫組織化學法結(jié)合葡萄糖氧化酶DAB硫
4、酸鎳胺顯色技術，觀察SP免疫反應陽性纖維在大鼠脾臟的分布；在大鼠背部造成占體表面積20%的深Ⅱ度燙傷，燙傷后不同時間，采用放射免疫分析法測定大鼠脾內(nèi)SP含量的變化.結(jié)果：在大鼠脾臟內(nèi)有較豐富的SP免疫反應陽性神經(jīng)纖維，多呈串珠狀走行于淋巴組織中；與對照組比較，大鼠燙傷后脾臟SP含量［(ngg-1)30min,13.7±4.3vs20.1±3.2,P0.05；60min,11.8±4.4vs18.2±7.5,P0.05；120min,7.6±2.2vs17.1±7.5,P0.01;240min,8.1±2.6vs1
5、6.5±6.4,P0.01］明顯下降.結(jié)論：大鼠脾臟內(nèi)含有較豐富的SP免疫反應陽性神經(jīng)纖維.freelin4組，對照大鼠對應為30,60,120和240min4組，分別在燙傷和假燙傷30,60,120和240min斷頭處死.1.2方法1.2.1免疫組化染色實驗大鼠在乙醚吸入麻醉下，經(jīng)升主動脈插管灌流固定.先以生理鹽水快速沖洗，繼之灌入40gL-1多聚甲醛約400mL,取出脾臟，置于同一固定液中后固定6h，隨后浸泡于含200gL-1蔗糖的0.1molL-1PB液中，4℃過夜.制備30μm厚的恒冷箱切片，行漂浮法AB
6、C結(jié)合葡萄糖氧化酶DAB硫酸鎳胺顯色技術免疫組織化學染色.染色程序：切片先經(jīng)3mLL-1甲醇雙氧水封閉30min后入10gL-1TritonX100孵育30min.然后轉(zhuǎn)入兔抗SP抗體（1∶3000，INC公司），4℃孵育24h，再依次進入生物素標記的豬抗兔IgG抗血清（1∶500，Dako公司）室溫孵育4h，卵白素生物素復合物（ABC，1∶200，Dako公司）中室溫孵育2h.然后用葡萄糖氧化酶DAB硫酸鎳胺顯色液顯色20min.以上各步驟之間均用10mmolL-1磷酸緩沖鹽水（PBS,pH7.4）漂洗3次，每
7、次10min.顯色結(jié)束后，標本經(jīng)PBS充分漂洗，30gL-1中性紅復染3min，繼而干燥、脫水、透明、樹膠封片.標本用OlympusBH2型顯微鏡觀察并攝片.以正常兔血清替代第一抗體，作為陰性對照.1.2.2燙傷動物模型的制備燙傷前24h用0.8gL-1的Na2S背部脫毛，清醒狀態(tài)下，將大鼠脫毛區(qū)置于恒溫水浴鍋100℃熱水內(nèi)持續(xù)16s，造成占體表面積20%的深Ⅱ度燙傷.燙傷深度病理證實.按各組不同的時間間隔作斷頭處理.對照組大鼠的處理同上，只是將100℃沸水換成37℃水做假燙傷.傷后立刻腹腔注射無菌等滲鹽水（3m
8、L/100g體質(zhì)量）抗休克，單籠喂養(yǎng).創(chuàng)面不予處理.1.2.3脾臟標本的制備大鼠斷頭后，立即將脾臟取出，置沸生理鹽水中煮5min，以滅活肽酶.稱質(zhì)量后，移入含0.1molL-1乙酸1mL的勻漿管中充分勻漿，在室溫擱置2h再加入0.1molL－1的氫氧化鈉1mL.離心（300rmin-1,10min），取上清液置入－70℃冰箱保存待測.1.2.4SP含量的放射免疫測定按SP
