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《兒童風(fēng)濕病患者肺炎支原體和eb病毒感染的研究論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、兒童風(fēng)濕病患者肺炎支原體和EB病毒感染的研究論文.freelycoplasmapneumoniae，EBvirusinthechildrenaticdiseases【Abstract】ObjectiveToexploretherelationshipbetycoplasmapneumoniae(MP)infection，EBvirus（EBV）andrheumaticdiseases.MethodsSpecificMP-IgM，MP-IgAandEBV－IgM，EBV-IgAantibodyof31casesaticdiseasesand3
2、0controlsaticdiseasesgroup.Either2cases(6.67%)aticdiseasesgroupaybethemonpathogeninthechildrenaticdiseasesandmayattendthepathogenicmachanismofrheumaticdiseases【KeyycoplasmapneumoniaerheumaticdiseaseEBV-antibodychildren兒童風(fēng)濕病是一種全身性的多系統(tǒng)損害的自身免疫性疾病，目前其發(fā)病機(jī)制尚未十分清楚。感染在兒童風(fēng)濕病中的作用一直受
3、到人們重視，但有關(guān)支原體感染尤其是肺炎支原體和EB病毒(EBV)感染與兒童風(fēng)濕病的關(guān)系國(guó)內(nèi)少見(jiàn)報(bào)道。我們采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)風(fēng)濕病（包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡、幼年型特發(fā)性關(guān)節(jié)炎、皮肌炎、系統(tǒng)性血管炎）患兒活動(dòng)期血清肺炎支原體和EBV特異性抗體IgM、IgA，并與正常對(duì)照組作比較，旨在了解肺炎支原體感染與兒童風(fēng)濕病的關(guān)系，以進(jìn)一步探討兒童風(fēng)濕病的發(fā)病機(jī)制。1對(duì)象與方法1.1研究對(duì)象2000年8月～2002年9月收集小兒風(fēng)濕病患兒31例，男10例，女21例，年齡2～14歲，平均年齡（8.0±3.2）歲，其中包括幼年型特發(fā)性關(guān)節(jié)炎(J
4、IA)患兒12例（男5例，女7例）和系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)17例（男4例，女13例），系統(tǒng)性血管炎1例，皮肌炎［1］1例。均于疾病活動(dòng)期抽取非抗凝靜脈血2～3ml，離心后收集血清，置4℃保存；同時(shí)收集30例健康兒童作為正常對(duì)照組，男16例，女14例，年齡2～14歲，平均年齡（7.2±3.2）歲。1.2研究方法1.2.1MP-IgM的檢測(cè)采用SerodiaMycoⅡ方法，試劑盒由日本FujiRebioinc生產(chǎn)。1.2.2操作步驟(1)吸取200μl待測(cè)血清，56℃30min滅活補(bǔ)體。(2)將滅活后的待測(cè)血清25μl，進(jìn)行倍比稀釋1：10、
5、1：20、1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280。每孔25μl加入U(xiǎn)型反應(yīng)孔內(nèi)，同時(shí)設(shè)陽(yáng)性血清對(duì)照。(3)于每份標(biāo)本的1：10濃度孔中加入25μl非感應(yīng)粒子作為陰性對(duì)照，以下濃度孔中加入25μl感應(yīng)粒子。最終滴度則為1：20（陰性對(duì)照）、1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280。輕輕混勻，加蓋，于室溫（20℃左右）反應(yīng)3h。1.2.3檢測(cè)方法用目測(cè)法與陽(yáng)性血清及非感應(yīng)粒子對(duì)照判斷結(jié)果。滴度≥1：80者為陽(yáng)性。1.3MP-IgA的檢測(cè)采用ELISA，試劑盒由陜西華煜生物醫(yī)學(xué)技術(shù)公司生產(chǎn)
6、。操作步驟：(1)用標(biāo)本處理液稀釋標(biāo)本（1：100）100μl加入相應(yīng)孔中。設(shè)陽(yáng)性、陰性、空白對(duì)照各一孔，置37℃水浴或濕盒30min；(2)棄去標(biāo)本液以洗滌液洗滌3次，每次3～5min甩干；(3)加酶標(biāo)抗體，每孔2滴，空白孔中只加洗滌應(yīng)用液，置37℃濕盒20min；(4)棄去酶結(jié)合物，同上洗板5次，拍干；(5)加顯色底物A、B各1滴，置37℃5～10min；(6)終止：每孔加50μl終止液終止反應(yīng)；(7)結(jié)果判斷：以空白對(duì)照孔調(diào)零點(diǎn)，酶標(biāo)儀測(cè)450nm下各孔OD值，待測(cè)孔OD值/陰性孔OD值≥2.1者為陽(yáng)性。1.4EBV-IgM、IgA的
7、測(cè)定全病毒EBV-IgM、IgA測(cè)定采用ELISA，試劑盒購(gòu)自德國(guó)IBL公司（批號(hào)為RE56211），操作步驟按常規(guī)進(jìn)行，判斷標(biāo)準(zhǔn)CUTOFF為陽(yáng)性。2結(jié)果檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1、表2、表3。表1風(fēng)濕病組與對(duì)照組血清MP-IgM、IgA，EBV-IgM、IgA陽(yáng)性率分析(%)注：與風(fēng)濕病組比較，*χ2=14.8067，P＜0.01；△χ2=6.3186，P＜0.05表2風(fēng)濕病組患兒年齡與血清MP-IgM、MP-IgA檢測(cè)結(jié)果分析(%)表3SLE組和JIA組血清MP-IgM、MP-IgA檢測(cè)結(jié)果分析3討論支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的最小的原核細(xì)胞型微生物
8、，早在20多年前就有學(xué)者提出：支原體特別是發(fā)酵支原體是引起人類類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的可能原因［2］，但未得到證實(shí)，尤其是肺炎支原體。1997年Schaeverbeke等［3］用PCR法
