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1、錫類散緩釋貼膜對RAU家兔模型TNF【摘要】目的建立復發(fā)性口瘡（RAU）家兔動物模型，探討錫類散緩釋貼膜對RAU家兔TNF-α、IL-1表達的影響。方法家兔脊柱兩側皮內注射家兔口腔黏膜抗原乳化液，造模后將潰瘍家兔隨機分成三組，一組空白模型組，一組為模型治療組，一組為模型散劑組，固定家兔口腔，分別將貼膜敷之潰瘍面上和散劑吹撒潰瘍面上。連續(xù)用藥5天，檢測給藥后家兔RAU炎性細胞因子TNF-α、IL-1表達水平。結果實驗動物出現口腔黏膜潰瘍，于最后一次抗原注射10天后口腔潰瘍開始增多。模型治療組和模型散劑組炎性細胞因子TNF-α、IL-
2、1表達水平均明顯降低。結論錫類散緩釋貼膜及錫類散對RAU家兔具有治療作用，其機制可能主要是通過減少炎性細胞因子的分泌?！娟P鍵詞】錫類散緩釋貼膜；復發(fā)性口瘡；TNF-α；IL-1［Abstract］ObjectiveTostudytheeffectofxilEioralsustained-releasemucoadhesivefilmsanditspossiblemechanisminRAUrabbits.MethodsRAUmodelucosa，0.5ml，oncepertodelanddonothing，grouptucoadh
3、esivefilms，groupthreereceivedxileioral,onceadayfor5daysingrouptedtissueofeachgroupeasuredattheendofexperiment.ResultsTheexperimentalrabbitsappearedtheoralulcer，theulcergreberafter10daysofthelastantigeninjection.Therematorytissueingrouptentucoadhesivefilmsandxileioralh
4、asbeneficialeffectinRAUrabbits.Themechanismmaydecreaseinflammatorycytokinesecretion.［Keyucoadhesivefilms;recurrentaphthousulcer;tumornecrosisfactor-alpha;interleukin-1復發(fā)性阿弗他潰瘍（recurrentaphthousulcer，RAU），又稱復發(fā)性口腔潰瘍，是一種具疼痛癥狀、周期性復發(fā)的口腔潰瘍性疾病，其發(fā)病原因不詳，致病機制不明確，是多因素綜合作用的結果，由于口
5、腔特殊的生理環(huán)境，傳統(tǒng)的口腔黏膜給藥劑型（如散劑、涂劑、含片、含漱液、咀嚼片等）雖能快速起效，但由于易受唾液沖洗、人不自覺的吞咽動作而導致藥物滯留時間較短，且藥物濃度隨著持續(xù)的唾液分泌而下降，從而難以達到持續(xù)有效的藥物濃度，造成療效下降。為充分發(fā)揮藥效，我們利用現代藥學新技術藥物緩釋技術和生物黏附技術制成了生物黏附貼膜錫類散緩釋貼膜，通過局部外用對RAU家兔動物模型進行治療觀察。1對象與方法1.1研究對象取家兔24只，由實驗動物中心提供，所有大鼠同室分籠飼養(yǎng)，自然光照，自由飲水進食。兔TNF-α、IL-1、ELISA試劑盒上海藍基
6、生物科技有限公司。錫類散緩釋貼膜自備。1.2RAU動物模型制備1.2.1抗原乳化液制備取2只家兔，急性處死后剝取口腔黏膜組織，用內切式勻漿器勻漿，超聲波震蕩，低溫離心，保留沉淀物，取上清液再行透析以濾過小分子物質，將大分子蛋白留于袋內。透析過程反復5次，將袋內物冷凍干燥，獲得粉末狀蛋白。1.2.2動物模型制備將提取的口腔黏膜蛋白12.5mg溶于0.5ml磷酸緩沖液中，再加入0.5ml的完全弗氏佐劑呈乳化液，注入家兔脊柱兩側皮內，共注射20點，每隔2周注射1次，共注射5次。1.3實驗分組及給藥取家兔9只，隨機分成三組，一組空白模型組
7、，不給藥；一組為模型貼膜組，固定家兔口腔，將貼膜敷之上；一組為模型散劑組，1日1次，固定家兔口腔，將散劑吹撒潰瘍面上，每4h1次，1日3次。用藥后固定2h。1.4檢測項目與方法潰瘍組織TNF-α、IL-1測定：將組織標本剪切成1mm3的小塊，按1塊/cm2的密度種植于培養(yǎng)瓶內，30min后置入RPMI1640完全培養(yǎng)液，37℃培養(yǎng)，24h后采集組織標本上清液，-70℃保存，待測。采用雙抗體夾心ELISA法檢測，嚴格按照試劑盒說明書進行操作。1.5統(tǒng)計學處理所有的數據均以均數±標準差（x±s）表示，經SPSS11.5處理，P<
8、0.05為差異有統(tǒng)計學意義。2結果2.1實驗動物數量分析納入家兔24只，均進入結果分析，無脫失。2.2組織培養(yǎng)液上清TNF-α測定與空白模型組相比，模型貼膜組TNF-α明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。模型散劑組濃度較空白模型組低，
