黃連多糖抑菌活性初探

黃連多糖抑菌活性初探

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1、黃連多糖抑菌活性初探姜延偉王懿萍吳玉娟洪鵬舉許倫杰【摘要】  目的探討黃連多糖對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用。方法用擴(kuò)散法研究黃連多糖對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用,并選用黃連水提液和鹽酸小檗堿作為對照。結(jié)果黃連水提液和小檗堿對菌體均有抑菌效果,黃連水提液的抑菌效果尤為明顯;黃連多糖沒有抑菌作用。結(jié)論黃連多糖在體外條件下,不具有對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用?!娟P(guān)鍵詞】黃連多糖;小檗堿;水提液;抑菌作用  Abstract:ObjectiveToresearchtheinvitrogroethodples.ResultsTheaq

2、ueousextractsolutionandberberinehadeffectofgroaynothavetheeffectofgrol?! ?.1.2除蛋白將其中一份加木瓜酶0.06g,40℃水浴1h,Sevag法4次。(Sevag法:即,提取液∶氯仿∶正丁醇=25∶5∶1,電動(dòng)攪拌20min,靜置分層后棄蛋白質(zhì)沉淀及有機(jī)層。)  2.1.3醇沉將提取液的醇濃度調(diào)至80%,在冰箱中4℃靜置12h后取出。將醇沉液以5000r/min離心5min,將沉淀用無水乙醇洗滌3次,真空干燥即得灰白色粉末狀的黃連多糖?! ?.1.4溶液的制備黃連多糖分為除

3、蛋白黃連多糖和未除蛋白黃連多糖。分別加水配制成5mg/ml即為高濃度溶液,稀釋10倍為中濃度,再稀釋10倍為低濃度?! ?.2小檗堿溶液的制備將小檗堿藥片研磨成粉,加水配成小檗堿溶液。5mg/ml為高濃度,稀釋10倍為中濃度,再稀釋10倍為低濃度?! ?.3黃連水提液的制備將粉碎至20目的黃連粗粉加入10倍重量的水,浸泡1h,再80℃水浴加熱2h,然后濃縮至1/10體積,即配成了高濃度的黃連水提液,稀釋10倍為中濃度,再稀釋10倍為低濃度?! ?.4菌液的制備將大腸桿菌,金黃色葡萄球菌分別接種于固體肉湯培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)24h,然后在無菌條件下用

4、無菌生理鹽水洗滌菌體,混合菌體制備菌懸液?! ?.5抑菌實(shí)驗(yàn)在無菌操作條件下,將牛肉膏固體培養(yǎng)基熔化冷卻至45~55℃,加入適量的菌懸液,混勻,吸取40ml于平皿內(nèi),待凝固后,在平板內(nèi)挖取直徑8mm圓形小坑,將不同濃度的除蛋白黃連多糖溶液、未除蛋白黃連多糖溶液、小檗堿溶液、黃連水提液注入小坑中,37℃培養(yǎng)24h,觀察并測量抑菌圈直徑。各溶液在平皿中注入的位置和順序如圖1?! ?結(jié)果  3.1抑菌效果的比較各樣品對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的抑制作用見圖2~5。  3.2抑菌圈直徑的比較黃連水提液,小檗堿溶液對大腸桿菌,金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑比較見

5、表1。  圖1各溶液在平皿中注入的位置和順序(略)  圖2高濃度溶液對大腸桿菌的抑制效果(略)  圖3中濃度溶液對大腸桿菌的抑制效果(略)  圖4高濃度溶液對金葡菌的抑制效果(略)  圖5中濃度溶液對金葡菌的抑制效果(略)  表1黃連水提液和小檗堿對菌體抑菌圈直徑平均值(略)  3.3結(jié)果根據(jù)圖片效果和表中數(shù)據(jù)可以看出,黃連水提液和小檗堿對菌體均有抑菌效果,黃連水提液的抑菌效果尤為明顯;黃連多糖沒有抑菌作用?! ?討論  黃連本身具有清熱燥濕、瀉火解毒、清心明目等功效,相關(guān)研究證明其有抑菌作用。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果也證實(shí)了黃連水提液的高濃度溶液和中濃度溶

6、液對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均有明顯的抑制作用,并顯示出抑菌的效果隨著濃度升高而增強(qiáng)。鹽酸小檗堿對細(xì)菌的抑制作用也得到了證實(shí)。對于黃連多糖,從本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果看,對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌不具備抑制作用,黃連多糖對其它微生物的抑菌效果有待進(jìn)一步研究?! ”狙芯繉δ壳笆褂帽容^普遍的抑菌實(shí)驗(yàn)方法、紙片擴(kuò)散法〔6〕進(jìn)行了改進(jìn)。由于濾紙片所能夠承載的藥液量很少,而中藥成分在體外的抑菌作用普遍較弱,因此我們采取在平板內(nèi)挖取圓形小坑,然后注入藥液的方式來代替紙片擴(kuò)散法。改進(jìn)之處在于圓形小坑能夠承載的藥液量更多,并且能夠使藥液與培養(yǎng)基接觸的更加充分,從而能更加直觀準(zhǔn)

7、確地反映藥液的抑菌效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,各樣品抑菌效果區(qū)別非常明顯,該方法用于中藥提取物的抑菌實(shí)驗(yàn)效果較好?!?/p>

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