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1、黃連多糖抑菌活性初探論文姜延偉王懿萍吳玉娟洪鵬舉許倫杰【摘要】目的探討黃連多糖對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用。方法用擴散法研究黃連多糖對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用，并選用黃連水提液和鹽酸小檗堿作為對照。結(jié)果黃連水提液和小檗堿對菌體均有抑菌效果，黃連水提液的抑菌效果尤為明顯；黃連多糖沒有抑菌作用。結(jié)論黃連多糖在體外條件下，不具有對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用?！娟P(guān)鍵詞】黃連多糖；小檗堿；水提液；抑菌作用Abstract：ObjectiveToresearchtheinvitrogroetho
2、dples.ResultsTheaqueousextractsolutionandberberinehadeffectofgroaynothavetheeffectofgrol。2.1.2除蛋白將其中一份加木瓜酶0.06g，40℃水浴1h，Sevag法4次。(Sevag法：即，提取液∶氯仿∶正丁醇＝25∶5∶1，電動攪拌20min，靜置分層后棄蛋白質(zhì)沉淀及有機層。)2.1.3醇沉將提取液的醇濃度調(diào)至80%，在冰箱中4℃靜置12h后取出。將醇沉液以5000r/min離心5min，將沉淀用無水乙醇洗滌3次，真空干
3、燥即得灰白色粉末狀的黃連多糖。2.1.4溶液的制備黃連多糖分為除蛋白黃連多糖和未除蛋白黃連多糖。分別加水配制成5mg/ml即為高濃度溶液，稀釋10倍為中濃度，再稀釋10倍為低濃度。2.2小檗堿溶液的制備將小檗堿藥片研磨成粉，加水配成小檗堿溶液。5mg/ml為高濃度，稀釋10倍為中濃度，再稀釋10倍為低濃度。2.3黃連水提液的制備將粉碎至20目的黃連粗粉加入10倍重量的水，浸泡1h，再80℃水浴加熱2h，然后濃縮至1/10體積，即配成了高濃度的黃連水提液，稀釋10倍為中濃度，再稀釋10倍為低濃度。2.4菌液的制
4、備將大腸桿菌，金黃色葡萄球菌分別接種于固體肉湯培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)24h，然后在無菌條件下用無菌生理鹽水洗滌菌體，混合菌體制備菌懸液。2.5抑菌實驗在無菌操作條件下，將牛肉膏固體培養(yǎng)基熔化冷卻至45～55℃，加入適量的菌懸液，混勻，吸取40ml于平皿內(nèi)，待凝固后，在平板內(nèi)挖取直徑8mm圓形小坑，將不同濃度的除蛋白黃連多糖溶液、未除蛋白黃連多糖溶液、小檗堿溶液、黃連水提液注入小坑中，37℃培養(yǎng)24h，觀察并測量抑菌圈直徑。各溶液在平皿中注入的位置和順序如圖1。3結(jié)果3.1抑菌效果的比較各樣品對大腸桿菌、金黃色葡
5、萄球菌的抑制作用見圖2～5。3.2抑菌圈直徑的比較黃連水提液，小檗堿溶液對大腸桿菌，金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑比較見表1。圖1各溶液在平皿中注入的位置和順序（略）圖2高濃度溶液對大腸桿菌的抑制效果（略）圖3中濃度溶液對大腸桿菌的抑制效果（略）圖4高濃度溶液對金葡菌的抑制效果（略）圖5中濃度溶液對金葡菌的抑制效果（略）表1黃連水提液和小檗堿對菌體抑菌圈直徑平均值（略）3.3結(jié)果根據(jù)圖片效果和表中數(shù)據(jù)可以看出，黃連水提液和小檗堿對菌體均有抑菌效果，黃連水提液的抑菌效果尤為明顯；黃連多糖沒有抑菌作用。4討論黃連本身
6、具有清熱燥濕、瀉火解毒、清心明目等功效，相關(guān)研究證明其有抑菌作用。本實驗研究結(jié)果也證實了黃連水提液的高濃度溶液和中濃度溶液對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均有明顯的抑制作用，并顯示出抑菌的效果隨著濃度升高而增強。鹽酸小檗堿對細菌的抑制作用也得到了證實。對于黃連多糖，從本實驗的結(jié)果看，對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌不具備抑制作用，黃連多糖對其它微生物的抑菌效果有待進一步研究。本研究對目前使用比較普遍的抑菌實驗方法、紙片擴散法［6］進行了改進。由于濾紙片所能夠承載的藥液量很少，而中藥成分在體外的抑菌作用普遍較弱，因此我們采
7、取在平板內(nèi)挖取圓形小坑，然后注入藥液的方式來代替紙片擴散法。改進之處在于圓形小坑能夠承載的藥液量更多，并且能夠使藥液與培養(yǎng)基接觸的更加充分，從而能更加直觀準確地反映藥液的抑菌效果。實驗結(jié)果表明，各樣品抑菌效果區(qū)別非常明顯，該方法用于中藥提取物的抑菌實驗效果較好。【
