兩種糞便隱血檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用探討

兩種糞便隱血檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用探討

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1、兩種糞便隱血檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用探討摘要:目的探討鄰聯(lián)甲苯胺法(化學(xué)法)與單克隆膠體金檢測(cè)法(免疫法)檢測(cè)糞便隱血的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法選取本院2015年4月?2016年3月糞便標(biāo)本100例,分別采用鄰聯(lián)甲苯胺法與單克隆膠體金檢測(cè)法進(jìn)行糞便隱血檢測(cè)。2種方法均參考試劑說(shuō)明書(shū)并按照全國(guó)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。結(jié)果100例糞便標(biāo)木中鄰聯(lián)甲苯胺法檢出陽(yáng)性結(jié)果86例(86%),單克隆膠體金檢測(cè)法檢出陽(yáng)性結(jié)果68例(68%),二者一致性符合率為76%,有24%的不符合率。結(jié)論鄰聯(lián)甲苯胺法(化學(xué)法)特異性差,敏感性高,容易出現(xiàn)假陽(yáng)性,而單克隆膠體金檢測(cè)法(免疫法)雖然特異性高,但對(duì)上消化

2、道出血的標(biāo)本容易出現(xiàn)假陰性,兩種檢測(cè)方法各有優(yōu)缺點(diǎn),在臨床工作中單獨(dú)使用鄰聯(lián)甲苯胺法或單克隆膠體金檢測(cè)法都可能因其方法學(xué)的限制而產(chǎn)生一定的假陰性(漏檢)或假陽(yáng)性(誤診),如果一份標(biāo)本同時(shí)使用這兩種方法檢測(cè),能冇效避免假陰性和假陽(yáng)性,提高準(zhǔn)確性,避免誤診和漏診,更具有臨床應(yīng)用價(jià)值。關(guān)鍵詞:糞便潛血;鄰聯(lián)甲苯胺;單克隆膠體金糞便隱血試驗(yàn)主要用于消化道慢性出血、消化道腫瘤的篩檢。B前,消化道腫瘤的發(fā)病率呈上升趨勢(shì),危害著人類(lèi)的健康,而臨床上仍缺乏有效的早期診斷手段[1]。冃前,臨床上應(yīng)用的糞便隱血檢測(cè)的方法主要有化學(xué)法和免疫法,化學(xué)法種類(lèi)較多,如鄰聯(lián)甲苯胺法、愈創(chuàng)木酯法等

3、?;瘜W(xué)法特異性差[1],且受飲食和藥物的影響,極易出現(xiàn)假陽(yáng)性,干擾臨床的診斷。免疫法目前應(yīng)用最多的為單克隆膠體金檢測(cè)法,但在某些情況下也會(huì)出現(xiàn)假陰性。故筆者通過(guò)實(shí)驗(yàn)探討2種糞便隱血檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用,為進(jìn)一步說(shuō)明在臨床工作中如果2種方法同時(shí)使用,取長(zhǎng)補(bǔ)短,冰能得出更準(zhǔn)確的試驗(yàn)結(jié)果,提高消化道腫瘤的早期檢出率及對(duì)治療效果提供更有意義的臨床價(jià)值。1資料與方法1.1糞便標(biāo)本來(lái)源選取木院2015年4月?2016年3月100例無(wú)重復(fù)門(mén)診和住院患者的新鮮糞便(糞便從采集到檢測(cè)時(shí)間不超過(guò)lh),患者年齡在12?91歲,平均年齡(45±12)歲,其中女59例(非月經(jīng)期),男41例。

4、1.2試劑1.2.1單克隆膠體金檢測(cè)法采用艾博生物醫(yī)藥(杭州)有限公司生產(chǎn)的膠體金檢測(cè)試紙,規(guī)格為50人份/盒。1.2.2?聯(lián)甲苯胺法10g/L鄰聯(lián)甲苯胺冰醋酸溶液和3%過(guò)氧化氫。10g/L鄰聯(lián)甲苯胺冰醋酸溶液[2]:取鄰聯(lián)甲苯胺1g,溶于冰乙酸及無(wú)水乙醇各50ml的混合液中,置棕色瓶?jī)?nèi),保存于4QC冰箱,可用2?12w,若有變色,應(yīng)重新配置。1.3方法1.3.1單克隆膠體金檢測(cè)法操作方法參見(jiàn)試劑說(shuō)明書(shū)將樣品杯標(biāo)記后放于水平操作臺(tái)面上,加入約0.5ml的蒸餾水(或去離子水),用采樣棒挑取糞便10?50mg(相當(dāng)于綠豆粒大小)放入杯內(nèi),并混勻待用(與蒸餾水混勻的糞便樣

5、木應(yīng)在1h內(nèi)盡快檢測(cè))。然后從原包裝鋁箔袋中取出試劑,將試劑箭頭所指的一端浸入樣本溶液中,注意:樣本液面不能超過(guò)試劑條的“MAX”標(biāo)記線(xiàn)。等待紫紅色條帶出現(xiàn),檢測(cè)結(jié)果應(yīng)在5min時(shí)判讀,10min后判讀結(jié)果無(wú)效。1.3.2鄰聯(lián)甲苯胺法操作方法[3]用小木棍挑取少量糞便,涂在消毒棉簽或白瓷板上,滴加10g/L鄰聯(lián)甲苯胺冰醋酸溶液2?3滴與糞便上,再滴加3%過(guò)氧化氫2?3滴,立即觀察結(jié)果,在2min內(nèi)顯藍(lán)色為陽(yáng)性。1.4檢測(cè)原理1.4.1單克隆膠體金檢測(cè)法的原理單克隆膠體金采用雙抗夾心法,試劑含有被事先固定于膜上檢測(cè)區(qū)(T)的抗人血紅蛋0抗體和質(zhì)控區(qū)(C)的相應(yīng)抗體,以

6、及固定于標(biāo)記墊上的抗人血紅蛋白抗體。1.4.2鄰聯(lián)甲苯胺法的原理血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類(lèi)似過(guò)氧化物酶活性,能催化過(guò)氧化氫作為電子受體使色原(如鄰聯(lián)甲苯胺)氧化而顯色(如鄰聯(lián)甲苯胺氧化成鄰平偶氮苯顯色藍(lán)色)。2結(jié)果選取的100例新鮮糞便標(biāo)本采用鄰聯(lián)甲苯胺法與單克隆膠體檢測(cè)法同時(shí)進(jìn)行檢測(cè),鄰聯(lián)甲苯胺法檢出陽(yáng)性結(jié)果86例(86%),單克隆膠體金檢測(cè)法檢出陽(yáng)性結(jié)果68例(68%),如果以單克隆膠體金檢測(cè)法為標(biāo)準(zhǔn),則鄰聯(lián)甲苯胺法假陽(yáng)性率為18%[(86-68)/100]。二者一致性符合率為76%,有24%的不符合率。統(tǒng)計(jì)兩種檢測(cè)方法符合率的情況,見(jiàn)表1。3討論通過(guò)上面結(jié)果可

7、以看出鄰聯(lián)甲苯胺法(化學(xué)法)的陽(yáng)性率明顯高于單克隆膠體金檢測(cè)法(免疫法),如果以單克隆膠體金檢測(cè)法為標(biāo)準(zhǔn),則鄰聯(lián)甲苯胺法假陽(yáng)性率為18%[(86-68)/100]。鄰聯(lián)甲苯胺法(化學(xué)法)根據(jù)其原理可以看出,如果糞便中含有一定量的除人血紅蛋白外的其他具有類(lèi)似過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)(如動(dòng)物血、魚(yú)、肝臟、富含氧化酶的葉綠蔬菜等或服用鐵劑、氧化性藥物等),或糞便標(biāo)本被具有氧化性物質(zhì)污染時(shí),糞便隱血試驗(yàn)即可出現(xiàn)假陽(yáng)性,如果糞便中含有大量的還原物質(zhì)(如大量維生素C),抵消了人血紅蛋白的類(lèi)過(guò)氧化物酶活性作用,糞便隱血即可出現(xiàn)假陰性。故,使用鄰聯(lián)甲苯胺法(化學(xué)法)檢測(cè)糞便隱血試驗(yàn)

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