連續(xù)溫度變化對(duì)葡聚糖酶酶解酵母葡聚糖地影響

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1、實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案連續(xù)溫度變化對(duì)β-1,3-葡聚糖酶酶解酵母β-葡聚糖的影響摘要:為了探索反應(yīng)溫度對(duì)產(chǎn)物組分的影響,利用自制連續(xù)變化的溫度梯度實(shí)驗(yàn)裝置,研究了22℃~60℃(±0.1℃)區(qū)間內(nèi)溫度對(duì)一內(nèi)切β-1,3-葡聚糖酶酶解酵母β-葡聚糖的影響,獲得了酶解過(guò)程多點(diǎn)溫度特性數(shù)據(jù)。分析表明:該酶酶解酵母β-葡聚糖的活化能為84.17kJ/mol;以產(chǎn)物積累表示的最適酶解溫度隨時(shí)間延長(zhǎng)呈指數(shù)下降;酶解產(chǎn)物組分受溫度的影響,低溫較高溫獲得的寡糖鏈長(zhǎng),高溫區(qū)大于46℃可以獲得以昆布二糖、昆布三糖為主的組分,而低溫區(qū)小于30℃可以獲得昆布五糖及

2、更大分子量的產(chǎn)物。研究結(jié)果可為寡糖生產(chǎn)提供精確的溫度控制參數(shù)。關(guān)鍵詞:溫度梯度,β-1,3-葡聚糖酶,水解,β-1,3-D-葡寡糖Effectofcontinuoustemperaturechangeonhydrolyticproductsofyeastβ-glucanbyendo-β-1,3-glucanaseAbstract:Inordertoexploretheinfluenceofreactiontemperatureontheproductcomposition,theeffectofcontinuoustemperat

3、urechange(22°C?60°C,±0.1°C)onhydrolysisofyeastβ-glucanbyendo-β-1,3-glucanasewasdeterminedbyusingself-developedBiochem-temperatureCharacteristicApparatus.Theactivationenergyofenzymatichydrolysisofyeastβ-glucanwas84.17kJ/mol.Theoptimumtemperaturerepresentedbyaccumulatio

4、nofproductsdecreasedexponentiallywithinacertainperiodoftime.Thecomponentsoftheproductswerechangedwithreactiontemperature.Thelengthofoligosaccharidesdecreasedwiththeincreaseoftemperature.Themainproductswerelaminaribioseandlaminaritrioseatthetemperaturehigherthan46°C,wh

5、ilethemainproductswerelaminaripentaoseandlargermolecularweightcomponentsatthetemperaturelowerthan30°C.Theresultscanprovidepreciseparameterstocontrolthereactiontemperatureoftheproductionof1,3-β-D-glucooligosaccharides.段峰等:連續(xù)溫度變化對(duì)β-1,3-葡聚糖酶酶解酵母β-葡聚糖的影響1093Journals.im.ac

6、.cnKeywords:temperaturegradient,endo-β-1,3-glucanase,hydrolysis,1,3-β-D-glucooligosaccrides溫度是生命環(huán)境的重要因素之一,是生命科學(xué)研究工作中必須控制的首要條件。研究溫度對(duì)生命體生長(zhǎng)繁殖的影響,以及溫度對(duì)生物酶反應(yīng)的效率等是生命科學(xué)研究領(lǐng)域中的一個(gè)關(guān)鍵內(nèi)容。目前實(shí)驗(yàn)室所用恒溫裝置主要是空氣浴、水浴形式,對(duì)溫度的控制為一室一控。在一個(gè)恒溫裝置中進(jìn)行一次實(shí)驗(yàn)只能獲得一個(gè)溫度點(diǎn)的特性數(shù)據(jù),欲完成一條溫度特性曲線的完善描述,還需要多次實(shí)驗(yàn)才能完精彩文

7、檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案成,由于多次實(shí)驗(yàn)要受到環(huán)境條件、儀器穩(wěn)定性、試劑配制、操作手法等不確定性因素干擾,所得各溫度點(diǎn)的數(shù)據(jù)不適合溫度特性研究工作。綜觀已報(bào)道的溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)和產(chǎn)物形成過(guò)程分析的報(bào)告,都是依據(jù)上述溫度梯度試驗(yàn)結(jié)果而作出的,通常都是相隔5℃和溫差±1℃下得到的,由此可見(jiàn)一個(gè)確切的溫度影響的動(dòng)力學(xué)過(guò)程是難以得到的,特別是對(duì)于“轉(zhuǎn)折點(diǎn)”的判斷會(huì)造成顯著誤差,而這又是微生物生理學(xué)和生物工程學(xué)上的重要參數(shù)。早在1958年,Halldal和French開(kāi)始利用金屬鋁板產(chǎn)生溫度梯度,在其上鋪瓊脂介質(zhì)支持海藻生長(zhǎng),并利用水槽、毛玻璃、紙梳

8、形成光照梯度,進(jìn)行溫度與光照兩個(gè)因素對(duì)海藻生長(zhǎng)影響的研究[1]。后來(lái)有許多研究者改進(jìn)或自行設(shè)計(jì)新型溫度梯度裝置進(jìn)行溫度特性的相關(guān)研究工作。Thompson利用自制“溫度梯度柵”研究了溫度對(duì)野生植物種子的發(fā)芽影響與其對(duì)自身生長(zhǎng)環(huán)境適應(yīng)性的關(guān)系[2];

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