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《免疫膠體金實(shí)驗(yàn)報(bào)告》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃免疫膠體金實(shí)驗(yàn)報(bào)告 免疫膠體金技術(shù)常見影響因素分析 自膠體金作為特殊標(biāo)記物進(jìn)行研究以來,建立的各種免疫膠體金技術(shù)以其特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡捷等特點(diǎn),在醫(yī)學(xué)、農(nóng)牧業(yè)、環(huán)境及食品檢測等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用。免疫膠體金技術(shù)的反應(yīng)過程是一個(gè)由金顆粒、抗原與抗體動(dòng)態(tài)結(jié)合的反應(yīng)過程,在這個(gè)過程中每個(gè)環(huán)節(jié)的好壞都直接影響試驗(yàn)的成敗。而試驗(yàn)過程中每個(gè)環(huán)節(jié)又受到很多因素的影響和制約,下面將影響免疫膠體金技術(shù)的因素作一分析,為成功制備膠體金檢測產(chǎn)品提供參考?! ?耗材的選擇 不同型號(hào)膜的篩選
2、。硝酸纖維素膜的型號(hào)在試驗(yàn)中至關(guān)重要,作為反應(yīng)載體影響到整個(gè)試驗(yàn)的成敗。不同的生產(chǎn)廠家生產(chǎn)硝酸纖維素膜時(shí)使用的聚合物和表面活性劑的來源、類型和數(shù)量均大不目的-通過該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃相同,對(duì)生產(chǎn)出的膜的性能產(chǎn)生較大影響——膜的孔徑和分布結(jié)構(gòu)不同。膜孔徑減小,膜的實(shí)際可用表面積遞增,膜結(jié)合蛋白的量也遞增;膜孔徑越小,層析速度也越慢,金標(biāo)復(fù)合物通過T線的時(shí)間就越長,反應(yīng)也就越充分;因此
3、膜孔徑越小靈敏度越高,但是同時(shí)也減慢了跑板速度,增加了非特異性結(jié)合的機(jī)會(huì),也就是假陽性越高。用于金標(biāo)免疫快速試驗(yàn)的膜多為硝酸纖維素膜或硝酸纖維素/醋酸纖維素混合膜,不同的包被蛋白對(duì)膜有特定要求,試驗(yàn)者應(yīng)根據(jù)蛋白質(zhì)的性質(zhì)選擇適合孔徑大小和分布結(jié)構(gòu)的膜,找到合適的平衡點(diǎn),使膠體金的標(biāo)記物在膜上的流動(dòng)速率為最佳。 結(jié)合墊的選擇。結(jié)合墊位于層析系統(tǒng)的中間,一般要求結(jié)合墊的網(wǎng)格均一且非特異性吸附低,能很好地負(fù)載膠體金標(biāo)記物和待檢測樣品,而不被吸附;玻璃纖維素膜具備以上優(yōu)點(diǎn),同時(shí)具有一定的硬度,為試驗(yàn)中常用?! 悠穳|及吸水紙的選擇。樣品墊和吸水紙位于膠體金免疫層析系統(tǒng)的兩端,對(duì)于膠體金層析系統(tǒng)
4、功能的實(shí)現(xiàn)起著舉足輕重的作用。試驗(yàn)中應(yīng)根據(jù)試紙條檢測樣品的性質(zhì)選擇合適的樣品墊和吸水紙,保證樣品在樣品墊形成的通道中快速地流動(dòng)而不被非特異性地吸附或者改變樣品的性質(zhì)。如檢測樣品為血清,則可選擇網(wǎng)格較疏松的玻璃纖維素膜即可;如果檢測樣品為毒素,則可選擇質(zhì)量好的吸水紙和樣品墊。吸水紙則要有很好的蓄水能力,保證樣品中所用的液體都經(jīng)過膜的反應(yīng)區(qū)而被樣品墊吸收和蓄積。 2關(guān)于膠體金的制備目的-通過該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的
5、業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 制備顆粒均勻、分散度好的膠體金在金標(biāo)免疫快速試驗(yàn)中非常關(guān)鍵,如果金顆粒直徑的變異范圍太大就會(huì)影響到試驗(yàn)的穩(wěn)定性和重復(fù)性,如果金顆粒的形狀不規(guī)則或粒徑不均一,使得膠體金標(biāo)記物容易解離和沉淀而產(chǎn)生金標(biāo)擴(kuò)散不完全、反應(yīng)區(qū)底色過深和假陽性現(xiàn)象;而且膠體金質(zhì)量不好,膠體 金結(jié)合物就不能快速而完整的從玻璃纖維上解離,從而影響試驗(yàn)結(jié)果?! ∧z體金的制備除了保證藥品的質(zhì)量外,制備過程中的細(xì)節(jié)關(guān)乎膠體金制備的成敗。首先是操作環(huán)境和所用容器的清潔度。所有進(jìn)入溶膠內(nèi)的污物都會(huì)干擾膠體金顆粒的生成或使生成的膠體金出現(xiàn)聚堆現(xiàn)象,容器最好經(jīng)酸洗和硅化處理。操作環(huán)境應(yīng)保持清潔無塵粒
6、,最好有專用工作區(qū)。其次,配制溶液均需使用雙蒸水或三蒸去離子水配制,燒制膠體金最好用去離子水。再者是不同的還原劑對(duì)膠體金質(zhì)量的影響。膠體金制備基于還原法,改變還原劑的性質(zhì)和濃度,可制備粒徑不同的膠體金懸液。根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康倪x擇膠體金的粒徑,根據(jù)選擇的粒徑確定還原劑,如制備金顆粒直徑在5~12nm的膠體金溶液用白磷或抗壞血酸還原氯金酸;如制備大于12nm直徑的金顆粒的膠體金則用檸檬酸三鈉還原氯金酸。此外不同的燒制方法、膠體金的制備量、還原劑的加入方式、加熱容器的大小及加熱的時(shí)間等也影響膠體金顆粒的大小和均一性。根據(jù)所需膠體金的粒徑和數(shù)量,結(jié)合自身試驗(yàn)條件選擇合適的膠體金制備方法?! ?標(biāo)記蛋
7、白與相關(guān)抗原、抗體的制備目的-通過該培訓(xùn)員工可對(duì)保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 標(biāo)記蛋白、T線和C線的抗原或者抗體的純度和濃度直接影響金標(biāo)探針的質(zhì)量。獲得純度高、濃度適中的抗原、抗體,關(guān)鍵在于制備和純化方法的選擇及條件的優(yōu)化。試驗(yàn)前須采用高速離心去雜質(zhì),應(yīng)用飽和