外源性wnt5a誘導(dǎo)k562細(xì)胞分化表型的實(shí)驗(yàn)研究

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1、從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果外源性Wnt5a誘導(dǎo)K562細(xì)胞分化表型的實(shí)驗(yàn)研究作者：袁媛，司維柯，李招權(quán)，潘靜，趙宸【摘要】本研究探討外源性Wnt5a誘導(dǎo)K562細(xì)胞定向分化的作用。用重組腺病毒AdWnt5a、AdGFP感染CHO細(xì)胞，分別制備Wnt5a和GFP對(duì)照條件培養(yǎng)液，并處理K562細(xì)胞1-7天，用光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化；采用過氧化物酶、糖原和非特異性酯酶染色、細(xì)胞表面分化抗原CD13、CD14、CD68

2、鑒定K562細(xì)胞的分化表型；用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞分化周期的變化。結(jié)果表明：與對(duì)照GFP條件培養(yǎng)液相比，Wnt5a條件培養(yǎng)液處理的K562細(xì)胞形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)均出現(xiàn)了分化成熟的特征；POX、PAS、αNAE細(xì)胞化學(xué)染色均為陽性，并且αNAE陽性70％可被氟化鈉抑制；單核細(xì)胞系表面標(biāo)志抗原CD14、CD68和粒細(xì)胞系表面標(biāo)志抗原CD13經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)染色均呈陽性，但CD13與對(duì)照比較無顯著性差異；Wnt5a處理K562細(xì)胞5天，細(xì)胞周期阻滯在G2期。結(jié)論：外源性的Wnt5a可誘導(dǎo)K562細(xì)胞向成熟方向分化，并且有向單核細(xì)胞系分化的現(xiàn)象

3、。【關(guān)鍵詞】誘導(dǎo)分化DifferentiationPhenotypesofK56CellsInducedbyExogenousWnt5a課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果AbstractThisstudywasaimedtoinvestigatetheeffectofexogenousWnt5aondirectionaldi

4、fferentiationofK56cells.Wnt5aandGFPconditionmediumswerepreparedbyrecombinantadenoviralvectorAdWnt5aandAdGFPtransfectingCHOcells.K56cellsweretreatedwithWnt5aandtheGFPconditionmediumsfor1-daysasWnt5atreatedgroupandcontrolgrouprespectively.ThemorphologicalchangesofK56cell

5、swereobservedbylightmicroscopeandelectronmicroscope;thedifferentiationphenotypesofK56cellswereidentifiedbythecytochemicalstainingofPOX，PAS，αNAEandimmunocytochemistryofCD13,CD14,CD68,andtheeffectofWnt5aoncellcycledistributionofK56cellswasdetectedbyflowcytometry.Theresu

6、ltsshowedthatthemorphologyandultrastructureofK56cellstreatedbyWnt5adisplayeddifferentiationmaturefeature;bothPOXandPASstainingshowedhigherpositiveratioinWnt5atreatedgroupthanthatincontrolgroup;theαNAEstainingalsowaspositive，butpositiveintensityinWnt5atreatedgroupcould

7、beinhibitedupto0％byNaF.TheexpressionsofmonocyticdifferentiationantigensofCD14,CD68inWnt5atreated課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果groupwerehigherthanthoseincontrolgroup，buttheexpre

8、ssiondifferencesofgranulocyticdifferentiationantigenCD1betweenWnt5atreatedgroupandcontrolgroupwerenotsignificant.Thec