宮內(nèi)膜干細(xì)胞的成肝分化及其對(duì)肝損傷修復(fù)作用的研究

宮內(nèi)膜干細(xì)胞的成肝分化及其對(duì)肝損傷修復(fù)作用的研究

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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文宮內(nèi)膜干細(xì)胞的成肝分化及其對(duì)肝損傷修復(fù)作用的研究姓名:林建申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師:項(xiàng)春生201202浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要官內(nèi)膜干細(xì)胞的成肝分化及其對(duì)肝損傷修復(fù)作用的研究浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士研究生導(dǎo)師1ry’r內(nèi)科學(xué)(傳染病學(xué))林建項(xiàng)春生教授中文摘要本研究目的為探討宮內(nèi)膜干細(xì)胞的體外成肝誘導(dǎo)分化及其在肝臟損傷中發(fā)揮的修復(fù)作用。首先,我們從招募的志愿者經(jīng)血中分離出單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行體外傳代培養(yǎng)并對(duì)獲得的細(xì)胞進(jìn)行聞充質(zhì)干細(xì)胞鑒定。官內(nèi)膜干細(xì)胞不具有致瘤性,可以呈單層貼壁生長(zhǎng),可以24小時(shí)倍增一次,為典型的棒狀或長(zhǎng)梭狀的成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞。流

2、式細(xì)胞術(shù)分析這類細(xì)胞均表達(dá)cD44,CD73,cD90,和cD29,而不表達(dá)CDll7,CD34,CD45,和HLA.DR。宮內(nèi)膜干細(xì)胞在體外可以被誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞和成脂細(xì)胞。其次,我們研究了宮內(nèi)膜干細(xì)胞的體外成肝誘導(dǎo)分化能力。宮內(nèi)膜干細(xì)胞在與HGF、FGF4、OsM以及DEx等共培養(yǎng)后,逐漸向上皮細(xì)胞樣細(xì)胞形態(tài)變化。誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞能夠表達(dá)ALB和AFP蛋白,以及基因彳£B.彳即.似,8.C腳9.C即J么J和C刪4等。表達(dá)譜芯片分析可見(jiàn)分化后的細(xì)胞能表達(dá)33個(gè)肝臟相關(guān)基因,這些基因在原代肝臟細(xì)胞中表達(dá),而宮內(nèi)膜干細(xì)胞中則不表達(dá)。另外,誘導(dǎo)分化后細(xì)胞功能驗(yàn)證顯示,其具

3、有糖原合成、ICG排泌和尿素合成功能等。這些數(shù)據(jù)可以初步證實(shí),所誘導(dǎo)的細(xì)胞是具有肝細(xì)胞表型且能發(fā)揮部分肝臟細(xì)胞功能的較成熟的細(xì)胞。最后,為了驗(yàn)證移植細(xì)胞能否參與肝損傷修復(fù)過(guò)程,小鼠肝臟部分切除后,分別移植宮內(nèi)膜干細(xì)胞和誘導(dǎo)分化后細(xì)胞,移植后10天,移植分化組小鼠肝功能較移植宮內(nèi)膜干細(xì)胞組恢復(fù)明顯,具有顯著性差異。移植8周后,在小鼠肝臟中可以檢測(cè)到移植細(xì)胞的存在,并且移植宮內(nèi)膜干細(xì)胞在受體肝臟內(nèi)發(fā)生分化。F撕厶n浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要小鼠作為移植受體,移植細(xì)胞后8周,發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)分化組小鼠肝臟可見(jiàn)大量Fall陽(yáng)性細(xì)胞,而移植宮內(nèi)膜干細(xì)胞組則僅有少量散在分布的Fah陽(yáng)性細(xì)

4、胞存在。這些數(shù)據(jù)說(shuō)明,分化后細(xì)胞可以部分重建小鼠肝臟,未分化細(xì)胞可以發(fā)生分化但整體水平較低。結(jié)果顯示,移植細(xì)胞可以隨血流遷移至小鼠肝臟,并在小鼠肝臟內(nèi)達(dá)到一定程度的重建。綜上所述,宮內(nèi)膜干細(xì)胞及其來(lái)源的細(xì)胞在肝臟疾病治療中可以發(fā)揮一定作用。關(guān)鍵詞官內(nèi)膜干細(xì)胞;成肝分化;肝損傷III浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文英文摘要MenstrualBloodStemCeUs:PotentialforLiVerRepairZhejiangUniVersitySchoolofMedicineDepartmentofInfectiousDiseasesPostgraduateJianLinSupe

5、rVisorCharlieXiangAbstractEI州lometrialstemcell,c(’nsideredasasomaticstemcen,h鶴beenstudiedeXtensiVelyi11recentyea璐.ncaIlbellarvestedeaSilyandbeabletosub-cultureforalongtinleiIlVitr0誦tllout鋤ykaD,ot),picabno冊(cè)mi吼Manyreportsshowedthattheynot011lydisplayt11estemceUmarkers,such鶴OCT.4andSSEA-4,b

6、utalsodi虢remiateintolotsofcelllineagesandexmbittissuer印airinaVariet)rofdiseaSes.ImmuIlemodulationandimmunesuppressionalsoparticipateiIlnleprocess.Becauseof“slowerimmunogenicity,ilI】衄unereje“oncanbeaVoidedt0occW.IIladdition,n0iIlstallceofteratomaorectopicfo肌ationw雒detectedinthe吮lsplanteda

7、Ilimals.IIlt11isstLIdy,weisolatedmeputatiVepopulationofstemcells矗omhumanmenstrIlalblood.Thecellswerepr0Vedt0expressmestemcell—relatedphenot),picmarl(erS,suchaSCD29,CD73,CD90andCDl05,wmlewithoutn圮markersCD34,CD45,CDl17andHLADR.ThecellsmVitrocultureddoubledateVe巧24hourS.The

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