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《新型防治流感藥物發(fā)現(xiàn)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、Ph．D．DISSERTATION—Chines—eAcademyofMedicalSciences＆PekingUnionMedicalCollege學(xué)校代碼：10023學(xué)號(hào)：B2009318博士學(xué)位論文新型防治流感藥物發(fā)現(xiàn)研究所院：藥物研究所姓名：楊帆指導(dǎo)教師：杜冠華研究員劉艾林研究員導(dǎo)師小組：方蓮花張?zhí)焯埨蛲踉氯A學(xué)科專業(yè)：藥理學(xué)研究方向：抗病毒藥理及新藥發(fā)現(xiàn)完成日期：二零一二年五月Ph．D．DISSERTATIONChineseAcademyofMedicalSciences&PekingUnionMed
2、icalCollege目錄摘要???????????????????????????????5ABSTRACT????????????????????????????????????．7第一章流感病毒與抗流感藥物研究現(xiàn)狀???????????????．11第一節(jié)流感病毒的生物學(xué)特性???????????????????????．11第二節(jié)流感病毒的致病性及致病機(jī)制????????????????????．13第三節(jié)防治流感的藥物作用靶點(diǎn)以及藥物研究現(xiàn)狀??????????????．17第四節(jié)本論文主要研究內(nèi)容??
3、??????????????????????．19參考文獻(xiàn)?????????????????????????????????20第二章RNA聚合酶抑制劑高通量篩選方法建立????????????25前言??????????????????????????????????????????????．．25第一節(jié)RNA聚合酶的制備及活性鑒定????????????????????261．實(shí)驗(yàn)材料??????????????????????????????．．262．實(shí)驗(yàn)方法???????????????????????
4、????????273．結(jié)果???????????????????????????????????????????．293．1ATP測(cè)定的線性范圍????????????????????????293．2RNA聚合酶活性測(cè)定???????????????????????．293_3金屬離子對(duì)酶活性的影響??????????????????????303．4RNA聚合酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定????????????????????．30第二節(jié)RNA聚合酶高通量篩選模型的建立??????????????????．321．實(shí)驗(yàn)
5、材料???????????????????????????????322．實(shí)驗(yàn)方法???????????????????????????????323．結(jié)果??????????????????????????????????????????．．333．1反應(yīng)最佳DH的確定????????????????????????333．2反應(yīng)最佳溫度的確定????????????????????????343．3酶反應(yīng)酶體系中M92+濃度的確定??????????????????．343．4高通量篩選模型的評(píng)價(jià)??????
6、?????????????????353．5RNA聚合酶抑制劑高通量篩選???????????????????．35／J、±吉???????????．??．????．?．???????????????????????????．36參考文獻(xiàn)?????????????????????????????????38第三章流感病毒內(nèi)切酶抑制劑的篩選模型的建立???????????41第一節(jié)內(nèi)切酶在大腸桿菌中的表達(dá)純化????????????????????431．實(shí)驗(yàn)材料??????????????????????????
7、????．．432．實(shí)驗(yàn)方法??????????????????????????????．．443．實(shí)驗(yàn)結(jié)果??????????????????????????????．46Ph．D．DISSERTALTIoNchi堅(jiān)竺堅(jiān)A!璺曼塑yofMedicaISciences&PekingUnionMedicalCollege3．1流感病毒內(nèi)切酶在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達(dá)???????????????463．2流感病毒內(nèi)切酶的純化??????????????????????一474．討{侖??????????????????
8、?????????????????????????。48第二節(jié)內(nèi)切酶的活性鑒定以及新活性測(cè)定方法的建立??????????????491．實(shí)驗(yàn)材料??????????????????????????????一492．實(shí)驗(yàn)方法??????????????????????????????．．503．實(shí)驗(yàn)結(jié)果??????????????????????????????．．523
