灰楸兩個材性基因的snp關(guān)聯(lián)分析

灰楸兩個材性基因的snp關(guān)聯(lián)分析

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1、分類號Q7密級UDC碩士學(xué)位論文灰楸兩個材性基因的SNP關(guān)聯(lián)分析學(xué)位申請人:梅芳學(xué)科專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:王軍輝研究員陳發(fā)菊教授二○一四年五月萬方數(shù)據(jù)ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceSNPandAssociationanalysisoftwowoodpropertygenesofCatalpafargesiiBur.GraduateStudent:MeiFan

2、gMajor:BiochemistryandMolecularBiologySupervisor:Prof.WangJunhuiProf.ChenFajuChinaThreeGorgesUniversityYichang,443002,P.R.ChinaMay,2014萬方數(shù)據(jù)三峽大學(xué)碩士學(xué)位論文三峽大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果,除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個

3、人和集體均已在文中以明確方式標(biāo)明,本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:日期:I萬方數(shù)據(jù)三峽大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要灰楸(CatalpafargesiiBur.)屬紫葳科(Bignoniaceae)梓屬(Catalpa)植物,是我國特有珍貴用材樹種,主要分布于渭河、涇河、汾河、黃河流域及秦嶺山地。目前對灰楸的研究主要側(cè)重于繁殖方法、資源收集、新品種選育等方面,而分子標(biāo)記輔助育種方面的研究剛剛起步。本研究利用單核苷酸多態(tài)性和關(guān)聯(lián)分析的方法,對灰楸材性相關(guān)基因蔗糖合酶基因和香豆酸-3-羥基化酶基因進(jìn)行

4、研究,旨在為灰楸的遺傳育種奠定理論基礎(chǔ)。本研究獲得如下結(jié)果:1)蔗糖合酶基因(sucrosesynthase,簡稱SUS)是纖維素合成途徑中的關(guān)鍵酶基因。本研究克隆得到CfSUS的cDNA2887bp,含有完整的開放閱讀框2418bp,編碼805個氨基酸。獲得CfSUS的DNA全長5067bp,編碼區(qū)被11個內(nèi)含子分割成12段。在93個灰楸無性系中進(jìn)行SUS基因擴(kuò)增,經(jīng)序列比對得到135個SNP位點(diǎn),外顯子、內(nèi)含子和非編碼區(qū)上的SNPs分別有76個、53個和6個,出現(xiàn)的頻率分別為1/32、1/19和1/9;在該基因

5、序列上檢測到5次插入和7次缺失,共涉及到44個變異位點(diǎn),插入和缺失長度范圍為1~15bp,其中發(fā)生在外顯子上的插入和缺失有1次,內(nèi)含子上的10次,3’UTR上1次。核苷酸多態(tài)性為0.01841。編碼區(qū)76個SNPs中有19次同義突變,57次非同義突變,包括55次錯義突變和2次無義突變。135個SNPs中有1個位點(diǎn)為三等位變異,T/C/A,對其余134個二等位突變位點(diǎn)進(jìn)行變異類型統(tǒng)計(jì),共發(fā)生轉(zhuǎn)換84次,顛換50次。135個SNPs中的48個常見SNPs與9個材性性狀的關(guān)聯(lián)分析結(jié)果顯示:有8個標(biāo)記位點(diǎn)(分別命名為sSN

6、P1-sSNP8)與中央平均直徑極顯著關(guān)聯(lián),3個標(biāo)記位點(diǎn)(分別命名為sSNP9-sSNP11)與弦向中央直徑極顯著關(guān)聯(lián);8個與中央平均直徑關(guān)聯(lián)的位點(diǎn)均只檢測到2種基因型,且純合基因型所對應(yīng)的中央平均直徑均值均高于雜合基因型所對應(yīng)的均值;3個與弦向中央直徑關(guān)聯(lián)的位點(diǎn)均檢測到3種基因型,3種基因型的弦向中央直徑均值均表現(xiàn)為:某一純合基因型對應(yīng)弦向中央直徑均值高于另一純合基因型所對應(yīng)的均值,而兩種純合基因型對應(yīng)的弦向中央直徑均值均高于雜合基因型對應(yīng)的均值。2)香豆酸-3-羥基化酶基因(p-coumarate3-hydro

7、xylase,簡稱C3H)是木質(zhì)素合成途徑中的關(guān)鍵基因。本研究克隆得到CfC3H的cDNA全長1825bp,含完整開放閱讀框1530bp,編碼509個氨基酸。獲得CfC3H的DNA全長3511bp,外顯子被2個內(nèi)含子分割成3段。在88個灰楸無性系中進(jìn)行CfC3H克隆,經(jīng)序列比對得到163個SNP位點(diǎn),其中5’UTR、外顯子、內(nèi)含子和3’UTR上的SNPs分別為4個、55個、94個和10個,出現(xiàn)的頻率分別為1/11、1/36、1/6和1/13。共發(fā)生插入和缺失45次,II萬方數(shù)據(jù)三峽大學(xué)碩士學(xué)位論文涉及位點(diǎn)152個。

8、核苷酸多態(tài)性為0.00307。編碼區(qū)內(nèi)的55個SNPs有15次為同義突變,40次為非同義突變,其中無義突變4次,非同義突變/同義突變?yōu)?.67>1。163個SNPs中的157個二等位位點(diǎn)共發(fā)生轉(zhuǎn)換104次,顛換53次,轉(zhuǎn)換/顛換為1.96。163個SNPs中的17個常見SNPs與9個材性性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析的結(jié)果顯示:僅1個標(biāo)記位點(diǎn)(命名為cSNP)與管孔率顯著

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