木薯西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探

木薯西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探

ID:34920936

大?。?.76 MB

頁數:69頁

時間:2019-03-14

木薯西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探_第1頁
木薯西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探_第2頁
木薯西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探_第3頁
木薯西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探_第4頁
木薯西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探_第5頁
資源描述:

《木薯西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在學術論文-天天文庫。

1、巧古學化論義",,木善西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探‘詩二背—-'1.:;其解諸卑杳V;....f/之..擴Vv*''■h;-■■■....I.*‘■J王燕Jr1H爲爲乂緣^―二〇—五年六月Mimm—I4HHI巧nwsaB^分類號S533密級公開UDC633.6碩±學位論文''"木馨西選03再生體系建立及農桿菌介導遺傳轉化初探王燕學科專業(yè)楠物學指導教師楊美純教授

2、論文答辯日期20巧年5月24日學位授予日期2015年6月成宜答辯委員會主席何龍飛教授廣西大學學位論文原創(chuàng)性和使用授權聲明本人聲明所呈交的論文,是本人在導師的指導下獨立進行研究所?。崳姷玫难芯砍晒?。除己特別加W標注和致謝的地方外,論文不包含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫的研究成果,也不包含本人或他人為獲得廣西大學或其它單位的學位而使用過的材料一。與我同工作的同事對本論文的研究王作所做的貢獻均已在論文中作了明確說明。本人在導師指導下所完成的學位論文及相關的職務作品,知識產權歸屬廣西大學。本人授權廣

3、西大學擁有學位論文的部分使用權,即:學校有權保存并向國家有關部口或機構送交學位論文的復印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,可將學位論文的全部或部分內容編入有關數據庫進行檢索和傳播,可W采用影印、縮印或其它復制手段保存、匯編學位論文。本學位論文屬于:□保密,在年解密后適用授權。0不保密。""請在W上相應方框內打V()論文作者簽名:撫曰期;次的帥閑習期6肖指導教師簽名:蹄私也1日:W巧叩作者聯系電話:電子郵箱;w西迭"木著03再生體系建立及農桿菌介導透傳轉化初探摘要廣

4、西是我國木馨種植第一大省一,圍繞木善淀粉加工形成的系列木馨加工產業(yè)鏈‘‘",是廣西經濟組成的重要部分。西選03是廣西大學選育的木曹優(yōu)良品種,耐旱、產量高,具有較高的經濟和推廣價值,采用轉基因方法把抗逆基因導入優(yōu)良木著品"。種中可有效提高抗逆性,改良木著品種本試驗主要研究西選03幼嫩莖段販芽為外植體建立快繁體系、W獲得的無茵苗幼嫩葉片為材料建立離體葉片再生體系W及初步建立農桿菌介導的無苗葉片遺傳轉化體系,結果如下:1.外桂體滅菌.1%KMn〇0min和75%酒精20,;經過04預處理1浸泡S后大

5、田栽培、室內水培、大棚沙培來源的外植體用0.1%HgCk分別滅菌lOmin、5min、6min效果最好,污染率分別為30.8%、11.1%、17.1%,成活率分別可達61.5%、80.0%、74.4%。2-.初代培養(yǎng):添加低濃度6BA的培養(yǎng)基中外植體蔽芽萌發(fā)優(yōu)于KT和TDZ,一最適宜初代誘導的培養(yǎng)基為MS+-6BA化05mg/L,外植體在周內萌發(fā),萌芽率達90.0%,萌發(fā)芽長勢良好。3+-.繼代增殖:單芽增殖培養(yǎng)宜采用MS6BA0.1m/L培養(yǎng)基g,芽增殖倍數+-m可達4.6+;密集

6、叢生芽培養(yǎng)宜采用MS6BA0.3m/LGA30.5/L培養(yǎng)基gg:無菌芽壯苗培養(yǎng)宜采用MS+PP3333.0mg/L培養(yǎng)基,無茵芽節(jié)間縮短、増粗。4.生根:單獨添加NAA、PP333或者直接用MS培養(yǎng)基均可誘導無菌芽生根,其中WMS+PP3330.3mg/L誘導生根效果較好,根短而粗壯,生根率達100%,平均根數6.9。5.生根苗移栽;取生根3條左右,株高3^cm的健壯組培苗移栽至草炭:姪石:=菜園±1:1:1的基質中,30d成活率可達55.1%。6.愈傷組織誘導;M

7、S+毒莽定口mg/L+CuS〇40.5mg/L適合作為無菌葉片愈傷組織誘導培養(yǎng)基,出愈率法100%。形成愈傷組織呈淡黃色,部分愈傷組織塊表面有顆粒狀突起。7.愈傷組織繼代:最佳的愈傷組織繼代培養(yǎng)基為1/2MS+毒莽定12mg/L,I86.7%増殖率達,用此培養(yǎng)基繼代,可使硬化愈傷組織塊變得疏松,表面顆粒狀突。起明顯,為轉化成巧性愈傷組織做準備8.愈傷組織分化誘導:采用生長素類與細胞分裂素類植物生長調節(jié)劑配合使用+-+m+誘導愈傷組織產生不定芽,分化率極低。采用MS6BA

8、1.0mg/LIAA0.5g/LAN〇0+一3.5m/LCuS〇40.5m/L培養(yǎng)基可定程度上提高不定芽的分化率ggg,但仍然不足15%。乂抗生素篩選:分別對帶膠芽莖段、無菌葉片和愈傷組織塊進行抗生素Km耐+-受壓篩選6BA0.05m

當前文檔最多預覽五頁,下載文檔查看全文

此文檔下載收益歸作者所有

當前文檔最多預覽五頁,下載文檔查看全文
溫馨提示:
1. 部分包含數學公式或PPT動畫的文件,查看預覽時可能會顯示錯亂或異常,文件下載后無此問題,請放心下載。
2. 本文檔由用戶上傳,版權歸屬用戶,天天文庫負責整理代發(fā)布。如果您對本文檔版權有爭議請及時聯系客服。
3. 下載前請仔細閱讀文檔內容,確認文檔內容符合您的需求后進行下載,若出現內容與標題不符可向本站投訴處理。
4. 下載文檔時可能由于網絡波動等原因無法下載或下載錯誤,付費完成后未能成功下載的用戶請聯系客服處理。