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《菊花高頻再生體系建立及農桿菌介導FT基因轉化的研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、分類號：墨魚墨2密級：公玨菊花高單位代碼：學號：100862鯉墨墨圣墨頻再生體系建立及農桿菌介導FT基因轉化的研究StudiesonEstablishmentofHighFrequenceRegenerationSystemandAgrobacterium--mediatedTransformationofChrysanthemumwithFT學位申請人：劉冰指導教師：肖建忠教授楊際雙副教授學科專業(yè)：園林植物與觀賞園藝學位類別：農學碩士授予單位：河北農業(yè)大學答辯日期：二。一一年五月二十九日獨創(chuàng)性聲明本
2、人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得塑皇墾盔些盤堂或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名：主t＼冰簽字日期：釓11年步月叼日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解塑蘭堡盛些盤堂有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，
3、允許論文被查閱和借閱。本人授權塑蘭墾壅些盤堂可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者簽名：袁、1琳籮月明日I學位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：通訊地址：翮躲艫k椽紐簽字日期：矽l1年歲月1日電話：郵編：摘要IIIIIrlIIIrlrlIIIIIIY1897092菊花是原產于我國的十大名花之一，但是絕大多數(shù)品種的菊花自然花期集中在11月左右，能夠在夏季或早秋開花的只有少數(shù)花色單調、花型較
4、小的品種。因此菊花的生產發(fā)展因為其花期問題受到了嚴重制約。FT基因是一個激酶抑制蛋白，可以通過對CO對FT的調節(jié)促進開花。本試驗旨在通過對菊花高效再生體系及根癌農桿菌介導的轉化體系的研究，將Fr基因導入到菊花品種‘神馬’中，以期獲得花期提前的菊花新品種，并為廣泛運用轉基因技術改良菊花品種打下基礎。本試驗以菊花品種‘神馬’為試驗材料。研究了不同激素濃度配比對菊花直接誘導不定芽再生以及對生根誘導的影響，對菊花的再生條件進行了優(yōu)化，從而獲得了菊花葉片高速快效的再生體系。試驗結果表明，將菊花‘神馬’葉盤接種在
5、MS+NAA1m∥L+6．BAlmgrL培養(yǎng)基上，經過20天的組織培養(yǎng)后，可直接再生出不定芽，而且再生率高達95．5％，再生芽在I／2MS+NAA0．7mg／L培養(yǎng)基上經過10天左右可誘導出根，生根率可達100％。在菊花品種‘神馬’高效再生體系建立的基礎上，利用根癌農桿菌介導的遺傳轉化法對其遺傳轉化進行了研究。研究結果表明，葉盤預培養(yǎng)時間、侵染時間、共培養(yǎng)時間以及延遲培養(yǎng)時間均對菊花的遺傳轉化效率有較大影響。同時得出經過預培養(yǎng)12h的葉盤置于菌液侵染5min，黑暗共培養(yǎng)3d；延遲篩選3d時菊花遺傳轉化
6、率最高。共培養(yǎng)后將葉盤接種到MS+NAAling／L+6．BAlmg／L+Km20mg／L培養(yǎng)基上進行抗性芽的篩選培養(yǎng)。25天后可直接分化出不定芽，當不定芽長到1-2cm左右時轉到I／2MS+NAA0．7m∥L+Km20mg／L培養(yǎng)基上進行生根篩選培養(yǎng)。在加km的培養(yǎng)基中連續(xù)篩選8周以上，將期間產生的抗性芽切下接種在含有20mg／Lkm的生根培養(yǎng)基中進行二次篩選，提取能夠正常生根的抗性苗的DNA，進行PCR檢測，共獲得PCR陽性植株7株，轉化率大約0．90／o．說明目的基因FT整合到菊花的基因組中。關
7、鍵詞：菊花；根癌農桿菌；遺傳轉化；Fr基因StudiesonEstablishmentofmghFrequenceRegenerationSystemandAgrobacterium-mediatedTransformationofChrysanthemumwithFTAuthor：．LiubingTutor：．XiaoBanzhongYangJishuangMajor：．LandscapePlantandOranmentalHorticultureAbstractChrysanthemumisone
8、ofthetenfamousflowerwhichoriginatedinourcountry．butmostvarietiesofthembloomconcentratedinNovemberorso，atthesametimeonlyafewalittlekindsofcolorsandsmallertypeofflowerscanbloomatsummerorearlyautumn．Therefore，thedevelopmentofchrysan
