鲇源擬態(tài)弧菌的分離鑒定研究

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1、、‘ｖｓ－，、：１學號Ｓ２０：分類號Ｓ９４１．４１２６ｎ〇四川農化大學專業(yè)碩±學位論文．？．站源擬態(tài)弧菌的分離鑒定研究＊－Ｖ－－Ｖ、＇＊韓帥？＊＇廣，、－＼指導教師耿毅教授、校外導師劉沖高級工程師．．，學位類別獸醫(yī)碩±．＇領域名稱基礎獸醫(yī)學研究方向水生動物疾?。崳姡担墸壓ⅲВВ壎?、，、－：■、■■扣．＇．、‘．戶、一斬＊—１—？一，Ａ？一■、．

2、戶乂產Ｖ、２０１５年５月■二－‘＇＇＇兵．＊’，？一‘－■＼，?！觯牐牎?、，．’＇、、＇ｒ４ｒ；“’．．４．？；．＂？、，ｔｏ．Ｃｌａｓｓｉ１．４１ＳｔｕｄＮｒ２０１１ｉｆｃａｔｉｏｎＮｕｍｂｅｒＳ９４ｅｎｔｕｍｂｅＳ１２６０ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａｓｔｅｒＤｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ巧Ｓｔｕｄｙｏｎｉｓｏｌａｔｉｏｎ

3、ａ打ｄｉｄｅ凸ｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＦｉｆ＆ｒｚＶ？ｍｉｍｉｃｕｓｆｒｏｍｆｒｅｓｈｗａｔｅｒｃａｔｆｉｓｈＢＨａｎＳｈｕａｉｙＤｉｒｅｃｔ：ｅｄｂＰｒｏｆ．ＧｅｎＹｉｙｇ（Ｍａｓ化ｒｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙ）ＣｏｌｌｅｅｏｆＶｅｔｅｒｉ田ａｒＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｉｃｈｕａｎ乂ｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙｇｙＣｈｅｎｄｕＳｉｃｈｕａｎＰｒｏｖｉｎｃｅＰ．Ｒ．Ｃｈｇ，ｉｎａ，Ｍａ２０１５ｙ，論文獨創(chuàng)性聲

4、明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行研究工作所?。崳姷玫某晒１M我所知，除了文中特別加化際注和致謝的地方外，學位論文中不包含其他個人或集體己經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川農業(yè)大學或其它教育機構的學位或證書所使用過的材料一。與我同工作的同志對本研巧所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。＾研巧生簽名：口年＾月／曰奔葉衣ａｔ關于論文使用授權的聲明本人完全了解四川農業(yè)大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留并

5、向圍家有關部口或機構送燙論文的復印件和電子版Ｉ允許論文被査閱和借閱，可Ｗ采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意四川農業(yè)大學可Ｗ用不同方式在不圖媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容。＇＾本論文不保密。□本論文保密，在年解密后適用本授權。＿＿＿＂＂（請在從ｉ：□內劃Ｖ））研究生簽名；為葉ｗｆ年《月八曰一＾導師簽名：乂己ｗＫ＾月／去＿年日＾中文摘要？２０，，１２年ｙ、來四川各地南方鉆和溝鉆的養(yǎng)殖場常爆發(fā)種Ｗ體表出現(xiàn)視色斑背部、腹部?。崳姡谓∨c尾

6、罐基部出血為特征的傳染?。玻埃保玻玻埃保?，肉出現(xiàn)明顯的長方狀潰瘍化。年間從四川各—４０３－ＳＣＣＦ０６鉆魚養(yǎng)殖區(qū)自然感染發(fā)病的南方解和溝站體內分離到株（ＳＣＣＦ）Ｇ弧形，極生單°鞭毛短桿菌。在ＴＳＡ平板于２８Ｃ培養(yǎng)４化，形成表面光滑，邊緣整齊，微隆起，乳白色的圓形菌落，在鑒別培養(yǎng)基ＴＣＢＳ上則形成綠色菌落。在光學顯微鏡下，４分離菌呈ＣＴ短桿菌，茜體稍彎，呈；生理生化特性與弧茜屬細菌極為相似弧形或逼點狀；電鏡下可見菌體極生單鞭毛。根據(jù)’（Ｊ＾ｎｏｓ）１６ＳｒＤＮＡ與巧序列分析表

7、分離菌株的形態(tài)學和生理生化轉性初步判定其為弧菌ｐ；ｇｙ６ＳＤＮＡ序列（ＫＣ５０３０５７、ＫＣ５０３０５９、ＫＫ）０１８２２、ＫＦ９０７１２７）與ＧＢ扣ｋ中Ｔ＇ｃ；＾ｏｋｒ幻ｅ明，４分離株ｒｅｎｌ１１化ｒＤＮＡ序列同源性最商！而留曲序列（ＫＣ５０３０５８、ＫＣ５０３０６０、ＫＣ５０３０５４、扮ＦＷ８％９）與’’Ｋｒａ／ｍＣＭｓｇｒＢ序列同源性最高。在抖分離菌１６ＳｒＤＮＡ序列及其ＧｅｎＢａｎｋ中同源性較商的相關ｙ’’一＂ｗｒａ序列構建的系統(tǒng)發(fā)育樹上，４分離菌與ｃＡｏ似ｆｌｃ和Ｋ

8、ｃｗｒＢＴ聚為族；在Ｗｇｙ基因序列及＇ｅｎｋ一其ＧＢａｎ中同源性較富的相關序列構建的系統(tǒng)發(fā)育樹上，４分離株與ＫｗｉｗＨｃＭｓ聚為族。在基于弧菌系統(tǒng)發(fā)育標志性鑒別基因ｄｎｏ／的雙重ＰＣＲ檢測中，４分離株基因組ＤＮＡ中巧特異性擴一致增出大小約為７７ｂ，，進而鑒定４株分離菌為Ｋｍ加扣趴１ｐ條帶與預期Ｋ擴増片段藥物敏感性實驗結果顯示４株Ｆｍ細ｋｗ對鏈霉素、Ｔ胺卡那、氣脈酸、氣苯尼考和氧氣沙星等抗菌藥物敏感，對青霉素和羅紅霉素等耐藥。病理學觀察發(fā)現(xiàn)