73株弧菌的分離與鑒定

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1、73株弧菌的分離與鑒定龐敏王波田春梅（桓臺(tái)縣結(jié)核病防治所256400）【摘要】從657例瀉便標(biāo)木分離出弧菌屬細(xì)菌73株，分離率為11.1%,以致傷弧菌（24株32.8%）、副溶血弧菌（19株26%）和河弧菌（9株9.6%）為主?0-1群霍亂弧菌9株（5.5%）經(jīng)血清學(xué)鑒定均為小川型，患者呈散在發(fā)病。【關(guān)鍵詞】弧菌屬霍亂弧菌急性腹瀉【中圖分類號(hào)】R931.5【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】2095-1752（2014）21-0187-02弧菌屬（Vibrio）細(xì)菌是一群短小，彎曲呈弧狀的的革蘭氏陰性菌，是引起人類急性腹瀉的主要病原菌之一。廣泛分布于自然界，以水中多見，木菌

2、屬大多菌種為非病原菌，對(duì)人致病的主要有霍亂弧菌和副溶血弧菌，分別引起霍亂和食物中毒。近年來，由于水質(zhì)污染和海產(chǎn)品的大量食用，由弧菌屬細(xì)菌引起的腹瀉明顯增加。我們?cè)?007-2011年夏秋二季在監(jiān)測霍亂弧菌的工作中，從657例急性腹瀉便標(biāo)木中分離出73株弧菌屬細(xì)菌。材料和方法一、標(biāo)木來源2007-2011年夏秋二季來我院就診的急性腹瀉病人糞便標(biāo)木657份。二、培養(yǎng)基霍亂、副溶血弧菌增菌液，硫代硫酸鹽枸櫞酸鹽肭鹽蔗糖瓊脂（TCBS）,霍亂弧菌專用4號(hào)瓊脂，克氏雙糖鐵瓊脂（KIA＞和各種生化反應(yīng)培養(yǎng)基，由桓臺(tái)縣衛(wèi)生防疫檢驗(yàn)所提供。霍亂弧菌診斷分型血清由蘭州生物制品研宄所提

3、供。三、分離鑒定程序以無菌棉簽取腹瀉便分別置l%NaCI胨水和堿性胨水中，經(jīng)37°C8—10h增菌，取表面培養(yǎng)物分別接種在4號(hào)瓊脂甲板和TCBS平板，經(jīng)37°C18—24h培養(yǎng)后，挑取可疑菌落接種在KIA上。用霍亂弧菌多價(jià)診斷血清做玻片凝集試驗(yàn)。暗視野觀察動(dòng)力。做一系列生化反應(yīng)，氧化酶、硝酸鹽還原試驗(yàn)陽性菌落用弧菌科細(xì)菌編碼和微量生化反應(yīng)管進(jìn)行細(xì)菌生化鑒定，最后參考冇關(guān)文獻(xiàn)確定菌種［2］。四、藥敏試驗(yàn)藥敏紙片由桓臺(tái)縣衛(wèi)生防疫檢驗(yàn)所提供結(jié)果一、73株弧菌屬細(xì)菌的分類從657例急性腹瀉病人糞便中分離出弧菌屬細(xì)菌率為11.1%。經(jīng)生化反應(yīng)鑒定可歸屬于10個(gè)種，結(jié)果見附表：

4、二、藥敏試驗(yàn)結(jié)果73株弧菌屬細(xì)菌對(duì)10種抗菌藥物中最敏感的是氯霉素(96.9%)，依次為復(fù)方新諾明(94.8%),慶大霉素(87.4%),阿米卡星(66.8%｝，妥布霉素(64.9%)，多粘菌素(59.5%),四環(huán)素(56.6%),環(huán)丙沙星(51.7°%)。主要弧菌的耐藥情況：副溶血弧菌的耐藥率是氨芐西林(94.8%),青霉素G鹽(91.8%);致傷弧菌是氨芐西林(89.3%),青霉素G鹽(92.8%);河弧菌是氨芐西林(85.7%)，青霉素G鹽(100.0%);0—1群霍亂弧菌對(duì)氨芐西林耐藥62.7%,對(duì)青霉素G鹽和多粘菌素耐藥率均為75.0%。討論與人類感染冇關(guān)

5、的弧菌屬冇12個(gè)種，感染后可引起不同程度的腹瀉和食物中毒［3］。近年由弧菌屬引起的感染性腹瀉引起人們的關(guān)注。微生物實(shí)驗(yàn)室也從監(jiān)測沙門、志賀菌屬為主，向弧菌屬轉(zhuǎn)移。為加強(qiáng)霍亂弧菌的監(jiān)測，2007-2011年我們對(duì)來院就診的腹瀉病人全部進(jìn)行了弧菌屬的培養(yǎng)鑒定。同期檢出弧菌屬細(xì)菌73例，分離率為11.1%，而檢出的沙門、志賀菌屬只有21例，分離僅為3.1%,說明弧菌屬細(xì)菌已成為桓臺(tái)地區(qū)感染性腹瀉的主要病原菌?；【鷮僭鼍阂詌%NaCI胨水和堿性胨水為好，方便，適用，且效果滿意，選擇培養(yǎng)基則以TCES為佳［4］。本文分離出的4株o—1群霍亂弧菌經(jīng)血清學(xué)鑒定均為小川型。患者呈

6、散在發(fā)病。由于隔離治療及時(shí)，經(jīng)住院后均痊愈，末造成流行，因而微生物實(shí)驗(yàn)室在夏秋二季加強(qiáng)對(duì)霍亂弧菌的監(jiān)測工作是防止霍亂流行的重要措施[5】。必須貫徹預(yù)防為主的方針，加強(qiáng)檢疫，及時(shí)檢出病人，嚴(yán)格隔離治療,必要時(shí)實(shí)行疫區(qū)封鎖，以免疫情擴(kuò)大蔓延。接種霍亂死菌苗，能增加人群的免疫力，保護(hù)率為55%-90%,免疫力維持的吋間較短，一般為3-6個(gè)月?？诜p毒活菌茁和注射類毒素可自動(dòng)免疫，特別是自然篩選或通過基因重組技術(shù)獲得只產(chǎn)生B亞單位的活菌苗，可誘導(dǎo)產(chǎn)生有效的抗毒性和抗菌性免疫。Ml吋，及吋和適當(dāng)補(bǔ)充液體和電解質(zhì)是治愈霍亂的關(guān)鍵所在。常用的抗菌藥物奮四環(huán)素，強(qiáng)力毒素。近年來用氟

7、哌酸，氟嗪酸撩閑亦佳。參考文獻(xiàn)[1]龐敏，山東省淄博市桓臺(tái)縣結(jié)核病防治所檢驗(yàn)科[2]畢平安，李素波.浙江嘉興地區(qū)感染性腹瀉患者病原菌調(diào)查。中華流行病學(xué)雜志，1994，15(6A)；117[3]委永新，王金良.實(shí)用臨床細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)與進(jìn)展.天津：天津科技翻譯出版公司，1993：145[4】李蓉，徐迪誠.微生物分類和鑒定技術(shù)進(jìn)展.哈爾濱：光明日?qǐng)?bào)出版社，1989：[5]李素波，畢平安，腹瀉患者糞便弧菌屬及氣單胞菌屬分離鑒定結(jié)果分析.佳木斯醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1995,18