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《利用嗜酸乳桿菌轉(zhuǎn)化亞油酸為共軛亞油酸的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、鄭州工程學院碩士學位論文利用嗜酸乳桿菌轉(zhuǎn)化亞油酸為共軛亞油酸的研究姓名：魏明申請學位級別：碩士專業(yè)：農(nóng)產(chǎn)品加工與儲藏工程指導教師：曹健2003.3.1摘要共軛亞油酸由于具有重要生理功能，如抗癌、抗氧化、減肥、抗粥狀動脈硬化等，在國際上已引起了廣泛的關注。與化學方法相比，利用酶法生產(chǎn)共軛亞油酸具有很多優(yōu)點。我們對一株嗜酸乳桿菌進行了紫外誘變，對突變株轉(zhuǎn)化亞油酸為共軛亞油酸的條件進行了初步研究，對菌株產(chǎn)酶條件進行了優(yōu)化。／最適產(chǎn)酶培養(yǎng)條件為：最適培養(yǎng)基為脫脂乳培養(yǎng)基，添加1％(w／v)的乳＼糖，1％(w／v)的(NH4)2S04，0
2、．1％(v／v)的亞油酸和1％(w／v)NaCl，接種量為l％，培養(yǎng)時間為36h，培養(yǎng)溫度為37。C，在此條件下，酶活力可達252．0U／ml?！?／通過單因素和正交實驗得到亞油酸異構(gòu)酶轉(zhuǎn)化亞油酸為共軛亞油酸的最佳條件為：反應溫度35℃，pH4．0，保溫時間48h，亞油酸與酶液的比例為1000mg：lOOml。在此條件下亞油酸的轉(zhuǎn)化率達38．1％。在1mmol／L濃度下，Na+、Fe2+、M92+有助于提高共軛亞油酸的產(chǎn)量，而H92+、C02+、Cu2+、Mn”、Fe”不利于共軛亞油酸的合成。用超聲波處理細胞以后，亞油酸的轉(zhuǎn)化率
3、顯著提高。／粗酶液經(jīng)酸堿沉淀、硫酸銨分段鹽析、透析脫鹽、柱層析等步驟，純化＼倍數(shù)為52．0倍，活力回收7．0％。經(jīng)分離膠濃度為12％的SDS．聚丙烯酰胺凝膠電泳后只有一條譜帶，說明該酶由一種亞基構(gòu)成，其亞基分子量為40700D左右。本實驗得到的亞油酸異構(gòu)酶最適反應pH為4．0左右，最適反應溫度為30～40℃；在60℃以下、pH2．0～7．0之間該酶穩(wěn)定。在lmmol／L濃度下，H92+、Cu2+、Mn”、Fe3+能抑制酶的活性，而Fe2十、M92+、Zn2+、Na+能提高酶的活性。該酶的動力學常數(shù)是21．6mmol／L，最大反應
4、速度是7．14mmol／L．hL，／關鍵詞：嗜酸乳桿菌}亞油酸j亞油酸異構(gòu)酶r共軛亞油酸，AbstractConjugatedlinoleicacidhasattractedconsiderableaattentionintheworldbecauseofitspotentialbeneficialeffects，suchas嶷nticarcinogenieeffect，reducingbodyfatcontent，antioxidation，andpreventingatherosclerosis．Producingconju
5、gatedlinoleicacidbyenzymehasmanyadvantagescomparedtochemicalmethod．PreliminarystudiesonproductionofCOnjugatedlinoleicacidwereconductedbyLactobacillusacidophilus．Theoptimumconditionsfortinoleateisomeraseproducingwereasfollows：thepropermediumwasskimmilk，withadditionof1
6、％(w／v)lactose，t％(W／V)(NH4)2S04，0。t％(v／v)iinoleieacidand1％(w／v)NaCl．Theinoculumvolumnwas1％(v／v)，thecultivationperiodwas36hrs，andcultivationtemperaturewas37℃．Linoleateisomeraseactivityreached252．0U／mlundersuchcondition。ThereactionconditionoftheenzymeforproducingCO趣ugat
7、edlinoteieacidwasdetermined．Theoptimumconditionswereasfollowd：reactiontemperature35℃，pH4．0，incubationtime48hrs，theproportionofculturemediumtolinoteieacid1000rag：t00mt，About38．1％linoteieacidwastransferredtoconjugatedlinoleicacidundersuchcondition．Theyiledofconjugatedl
8、inoleicacidcouldbeimprovedbyNa+，F(xiàn)e2+andM92+，whileinhibitedbyH92+，C02+，Cu2+，Mn2+andFe3+undertheconcentrationof1mmol／L．Ultrasonictrea
