第一講基因工程、克隆技術(shù)

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1、第一講基因工程、克隆技術(shù)專(zhuān)題九現(xiàn)代生物科技題組1基因工程1．(2010·全國(guó)Ⅱ，5)下列敘述符合基因工程概念的是()A．B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞中含有B淋巴細(xì)胞中的抗體基因B．將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株C．用紫外線(xiàn)照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株D．自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上解析：基因工程是在生物體外，通過(guò)對(duì)DNA分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接”，對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，然后導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行無(wú)性繁殖，使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，產(chǎn)

2、生出人類(lèi)所需要的基因產(chǎn)物。所以B為基因工程，而A為動(dòng)物細(xì)胞工程，C為誘變育種，D無(wú)人為因素不屬于基因工程。答案：B2．(2010·浙江理綜，2)在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過(guò)程中，下列操作錯(cuò)誤的是()A．用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸B．用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C．將重組DNA分子導(dǎo)入煙草原生質(zhì)體D．用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞解析：限制性核酸內(nèi)切酶用于提取目的基因和切割載體，煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，不能用限制性核酸內(nèi)切酶切割，A項(xiàng)錯(cuò)誤；DNA連接酶可以連接具有相同黏性末端的目的基因和載體，B項(xiàng)

3、正確；受體細(xì)胞可以是受精卵和體細(xì)胞，也可以是去除細(xì)胞壁的原生質(zhì)體，C項(xiàng)正確；目的基因?yàn)榭钩輨┗?，所以未成功?dǎo)入目的基因的細(xì)胞不具有抗除草劑的能力，篩選時(shí)應(yīng)該用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞，D項(xiàng)正確。答案：A3．(2010·天津理綜，7Ⅰ)下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線(xiàn)。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線(xiàn)所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答：(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用________________限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體

4、的大腸桿菌首先需要在含______________的培養(yǎng)基上進(jìn)行。(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是_____(填字母代號(hào))。A．啟動(dòng)子B．tetRC．復(fù)制原點(diǎn)D．a(chǎn)mpR(3)過(guò)程①可采用的操作方法是________(填字母代號(hào))。A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化B．大腸桿菌轉(zhuǎn)化C．顯微注射D．細(xì)胞融合HindⅢ和BamHⅠ氨芐青霉素AC(4)過(guò)程②采用的生物技術(shù)是________________。(5)對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程②可獲得多個(gè)新個(gè)體。這利用了細(xì)胞的________性。(6)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用________(填

5、字母代號(hào))技術(shù)。A．核酸分子雜交B．基因序列分析C．抗原—抗體雜交D．PCR胚胎移植技術(shù)全能C解析：(1)由圖示可知：需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因，因酶切后tetR四環(huán)素抗性基因結(jié)構(gòu)被破壞而ampR結(jié)構(gòu)完好，故用含氨芐青霉素的選擇培養(yǎng)基可篩選含有重組載體的大腸桿菌。(2)啟動(dòng)子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，可調(diào)控基因的特異性表達(dá)。(3)過(guò)程①表示把重組載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的過(guò)程，當(dāng)受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，常采用顯微注射法。(4)過(guò)程②表示把早期胚胎移植到代孕母牛子宮的過(guò)程，屬于胚胎移植技術(shù)。(5)經(jīng)過(guò)

6、程②得到新個(gè)體是細(xì)胞全能性的體現(xiàn)。(6)人乳鐵蛋白基因是否成功表達(dá)，關(guān)鍵看是否有其表達(dá)產(chǎn)物即人乳鐵蛋白，可用抗原—抗體雜交法檢測(cè)該蛋白是否存在。4．(2010·江蘇生物，27)下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：限制酶BamHⅠHindⅢEcoRⅠSmaⅠ識(shí)別序列及切割位點(diǎn)G↓GATCCCCTAG↑GA↓AGCTTTTCGA↑AG↓AATTCCTTAA↑GCCC↓GGGGGG↑CCC(1)一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有________個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。(2)若對(duì)圖中質(zhì)

7、粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越________。(3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是________________________________________________________。(4)與只使用EcoRⅠ相比較，使用BmaHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止________________________________________________。0、2高SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片

8、段自身環(huán)化(5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入__________