基因工程與克隆技術(shù)講義答案復(fù)習(xí)進(jìn)程.doc

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1、基因工程與克隆技術(shù)講義答案精品文檔基因工程與克隆技術(shù)　　　　　　　　　　　　　　　考點(diǎn)1　基因工程1.(2015·浙江10月選考,節(jié)選)答案:限制性核酸內(nèi)切酶2.(2016·浙江4月選考,節(jié)選)答案:(1)逆轉(zhuǎn)錄　重組DNA分子　農(nóng)桿菌　B(2)搖床　維持滲透壓3.(2018·浙江4月選考,節(jié)選)回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題:(1)將含某抗蟲基因的載體和含卡那霉素抗性基因的載體pBI121均用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ酶切,在切口處形成　　　　　　。選取含抗蟲基因的DNA片段與切割后的pBI121用DNA連接酶連接,在兩個片段相鄰處形成　　　　　　　,獲得重組質(zhì)粒。?(2)已知用Ca

2、Cl2處理細(xì)菌,會改變其某些生理狀態(tài)。取CaCl2處理過的農(nóng)桿菌與重組質(zhì)粒在離心管內(nèi)進(jìn)行混合等操作,使重組質(zhì)粒進(jìn)入農(nóng)桿菌,完成　　　　實(shí)驗(yàn)。在離心管中加入液體培養(yǎng)基,置于搖床慢速培養(yǎng)一段時間,其目的是　,?從而表達(dá)卡那霉素抗性基因,并大量增殖。解析:(1)EcoRⅠ酶切目的基因和載體,在切口處形成粘性末端;DNA連接酶使具有相同粘性末端的兩個片段形成磷酸二酯鍵,能獲得重組質(zhì)粒。(2)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程,稱為轉(zhuǎn)化。經(jīng)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌,在離心管中加入液體培養(yǎng)基,置于搖床慢速培養(yǎng)一段時間,以使CaCl2處理過的農(nóng)桿菌恢復(fù)細(xì)胞的正常狀態(tài)。答案:(1)粘性末端　磷酸

3、二酯鍵(2)轉(zhuǎn)化　使CaCl2處理過的農(nóng)桿菌恢復(fù)細(xì)胞的正常狀態(tài)1.基因工程的工具2.基因工程的原理與操作步驟(1)基因工程的原理①基本原理:讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定和高效地表達(dá)。②基本要素:多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等。(2)基因工程的基本操作步驟3.形成重組DNA分子(1)單酶切法收集于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)請聯(lián)系管理員刪除精品文檔將同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割的質(zhì)粒與目的基因片段混合,加入DNA連接酶,兩兩連接的產(chǎn)物(重組DNA分子)有以下3種:目的基因與目的基因的連接物;質(zhì)粒與質(zhì)粒的連接物;目的基因與質(zhì)粒的連接物。其中,只有目的基因與質(zhì)粒的連接物才是真正需要的

4、。(2)雙酶切法雙酶切法的優(yōu)點(diǎn)主要在于防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化以及保證目的基因單向插入質(zhì)粒。【自我診斷】1.轉(zhuǎn)入外源基因的動物稱為轉(zhuǎn)基因動物。(　√　)2.從豬血液中提取的胰島素屬于基因工程藥物。(　×　)3.限制性核酸內(nèi)切酶作用于DNA分子的氫鍵,使DNA雙鏈斷開。(　×　)4.限制性核酸內(nèi)切酶能夠特異性識別并切割煙草花葉病毒遺傳物質(zhì)。(　×　)5.基因工程的工具酶包括限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶及質(zhì)粒。(　×　)6.質(zhì)粒中的抗生素合成基因等標(biāo)記基因通常會用于含有目的基因受體細(xì)胞的篩選。(　×　)7.質(zhì)粒是一種直鏈DNA分子,可作為基因工程中的載體。(　×　)8.DNA聚合酶和限制性

5、核酸內(nèi)切酶是基因工程中常用的兩種工具酶。(　×　)9.土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因與農(nóng)桿菌質(zhì)粒重組,然后將重組DNA分子導(dǎo)入植物受體細(xì)胞。(　×　)10.基因工程的原理是讓人們感興趣的基因在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定的保存和表達(dá)。(　√　)11.多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞是進(jìn)行基因工程操作的基本要素。(　√　)12.目的基因序列未知,可采用PCR擴(kuò)增獲得目的基因。(　×　)13.構(gòu)建基因文庫時需包含目的基因。(　√　)14.將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞和植物細(xì)胞最常用的方法分別是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和顯微注射法。(　×　)15.利用氯化鈣處理農(nóng)桿菌細(xì)胞,可以增加其細(xì)胞膜的通透性。(　×　)16.在宿主細(xì)胞

6、中檢測到目的基因存在,說明轉(zhuǎn)基因技術(shù)操作成功。(　×　)17.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶為基因的分離和重組提供了必要手段。(　√　)18.基因治療是向目的細(xì)胞中導(dǎo)入正常基因以替換細(xì)胞中不正常的基因。(　×　)考向1　基因工程的工具【例1】下列關(guān)于基因工程的有關(guān)敘述,正確的是(　　)A.基因工程常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、載體B.一種限制性核酸內(nèi)切酶能識別幾種特定的核苷酸序列,并在特定的切點(diǎn)上切割DNAC.質(zhì)粒是一種常用載體,是擬核外能自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子D.DNA連接酶可代替DNA聚合酶用于DNA的復(fù)制解析:基因工程常用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接

7、酶,載體是工具;一種限制性核酸內(nèi)切酶能識別一種特定的核苷酸序列,并在特定的切點(diǎn)上切割DNA;質(zhì)粒是獨(dú)立于擬核區(qū)之外的特殊環(huán)狀DNA分子,具有自主復(fù)制能力;DNA聚合酶以DNA的一條鏈為模板進(jìn)行復(fù)制,DNA連接酶不需要模板,將具有末端堿基互補(bǔ)的2個DNA片段連接在一起,形成重組DNA分子。答案:C基因工程操作中的6點(diǎn)易錯(1)在切割目的基因時要求用同一種限制性核酸內(nèi)切酶,目的是產(chǎn)生相同的粘性末端。(2)將目的基因從DNA分