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《bFGF對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的作用及機制》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文bFGF對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的作用及機制姓名：江和碧申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：李廷玉2003.5.20重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中文全稱符號說明英文全稱骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞Marrowstromalstemcelis英文縮寫MSCs堿性成纖維生長因子BasicfibroblastgrowthfactorbFGF全反式維甲酸Alltrans—retinoicacid二甲亞砜DimethyIsulfoxide三羥基四甲基茴香醚gutylatedhydroxya
2、nisole流式細(xì)胞儀磷酸緩沖液胎牛血清F10WcytometerPhosphatebufferSOlutionFc!talboyilieserum神經(jīng)特異烯醇化酶NeuronspecifiCenolase神經(jīng)微絲Neurofilament微管相關(guān)蛋白2Microtubuleassociatedprotein2ATRADMSOBHAFCMPBSFBSNSENFMAP2神經(jīng)特異核蛋白NeuronspecialnuclearproteinNeuN神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸蛋白Glialfibrillaryacidpro
3、tein五羥色胺受體l。5-Hydroxytryptamine。。GFAP5一HT。。成纖維生長因子受體FibroblastgrowthfactorreceptorFGFR2bFGF對骨髓問充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的作用及機制—————，————一中文摘要目的對于神經(jīng)系統(tǒng)疾病所致的神經(jīng)功能障礙理想的治療方～●I-_●-●●__-_-_●__‘-?法就是神經(jīng)細(xì)胞移植，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)認(rèn)為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Marrowstromalstemcells，MSCs)是神經(jīng)細(xì)胞移植理想的供體來源。為了探討堿性成纖
4、維生長因子(BasiCfibroblastgrowthfactor，bFGF)對MSCs分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的作用及其機制，本課題利用bFGF與不同生長因子和化學(xué)誘導(dǎo)劑組合誘導(dǎo)MSCs向神經(jīng)元轉(zhuǎn)化，以期了解bFGF在MSCs轉(zhuǎn)分化中的作用機制，為MSCs用于神經(jīng)細(xì)胞移植提供重要基礎(chǔ)。／方法選擇以下不同條件，誘導(dǎo)Mscs向神經(jīng)元轉(zhuǎn)化：第1(組：不預(yù)誘導(dǎo)，接種細(xì)胞一天后加2％--甲基亞砜(Dimethylsulfoxide，DMSO)+200umo]／L三羥基四甲基茴香醚(Butylatedhydroxyan
5、isole，BHA)和不含血清的DMEM／F12；第2組：lOng／mlbFGF預(yù)誘導(dǎo)一天，再加2％DMSO+200umol／LBHA和不含血重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文清的DMEM／F12；第3組：0．5umol／L全反式維甲酸(Alltrans—retinoJcacid，ATRA)+10ng／mlbFGF預(yù)處理一天，再用加2％DMSO+200urnol／LBHA和不含血清的DMEM／F12；第4組：10ng／mlbFGF預(yù)處理一天，再加不含血清的改良的神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基(Modifiedneuronalme
6、dium，MNM)處理：觀察分化過程中細(xì)胞形態(tài)、數(shù)目的變化，免疫細(xì)胞化學(xué)檢測分化后細(xì)胞神經(jīng)元烯醇化酶(Neuronspecificeno]ase，NSE)、微管相關(guān)蛋白2(Microtubuleassociatedprotein2，MAP2)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(G1ialfibrillaryacidprotein，GFAP)以及N一甲基(酰)一D一、]冬氨酸受體(NN)AR)和五羥色胺受體。(5-Hydroxytryptamine。)的表達(dá)情況，并計算轉(zhuǎn)化率；觀察FGFR的表達(dá)及誘導(dǎo)后不同時間點原癌基因
7、c—myc蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果1．經(jīng)各組條件誘導(dǎo)后，MSCs均能分化為具有典型神經(jīng)元形態(tài)的細(xì)胞，并明顯表達(dá)NSE、MAP。、NMDAR和5一HT。但不表達(dá)GFAP；2．各組誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化率相比較，第2和3組即經(jīng)bFGF，ATf}A+bFGF預(yù)誘導(dǎo)組明顯高于不預(yù)誘導(dǎo)的第l組，第四組的轉(zhuǎn)化率最高，達(dá)95％以上；3．誘導(dǎo)后的神經(jīng)元樣細(xì)胞FGFR一3表達(dá)明顯增強，F(xiàn)GFR一1無明顯改變；4．誘導(dǎo)后的神經(jīng)元樣細(xì)胞4小重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文時開始表達(dá)c—myc蛋白，持續(xù)表達(dá)至36小時。結(jié)論以DMSO和BHA為基礎(chǔ)誘導(dǎo)劑
8、，bFGF預(yù)處理可明顯提高M(jìn)SCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率達(dá)30％之多：首次發(fā)現(xiàn)濃度為10ng／ml的bFGF主要是通過FGFR一3作用于MSCs，基本上不通過FGFR一1：首次發(fā)現(xiàn)在MSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化中的過程中，c—myc可能發(fā)揮著促進(jìn)MSCs轉(zhuǎn)分化與凋亡雙重作用。、一。。L，，。。一關(guān)鍵詞骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；轉(zhuǎn)分化；FGFR；c—myc；重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文THEEFFECT0FbFGFONMARROWSTROMALSTEMCE
