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《酵母雙雜交及其衍生系統(tǒng)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、生物技術(shù)通報(bào)·技術(shù)與方法·BIOTECHNOLOGYBULLETIN2014年第1期酵母雙雜交及其衍生系統(tǒng)12黃欣媛范紅波（1.湖北工程學(xué)院特色果蔬質(zhì)量安全控制湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，孝感432000；2.湖北職業(yè)技術(shù)學(xué)院，孝感432000）摘要：酵母雙雜交系統(tǒng)是一種研究蛋白質(zhì)相互作用的分子生物學(xué)方法，過(guò)去20多年里，大量衍生系統(tǒng)的出現(xiàn)使得這套雙雜交技術(shù)體系更加完善和高效，成為研究蛋白質(zhì)-配體相互作用的重要技術(shù)手段，廣泛應(yīng)用于功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、病理學(xué)等研究領(lǐng)域。對(duì)酵母雙雜交及其衍生系統(tǒng)的基本原理和應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行綜述。關(guān)鍵詞：酵母雙雜交系統(tǒng)蛋白質(zhì)相互作用雙雜交技術(shù)體系TheYeastTw
2、o-HybridSystemandItsSeveralDerivedSystems12HuangXinyuanFanHongbo（1.HubeiKeyLaboratoryofQualityControlofCharacteristicFruitsandVegetables，HubeiEngineeringUniversity，Xiaogan432000；2.HubeiPolytechnicInstitute，Xiaogan432000）Abstract:?TheYeasttwo-hybrid（Y2H）systemisamolecularbiologyapproachtodetectpr
3、otein-proteininteractions.Adiverseseriesoftechnologiesderivedfromithaveemergedinthepast20years,whichmakesthistwo-hybridmethodologysystemmorecompleteandefficient.Theyhavebeenamongthemostimportantandpowerfultoolstostudyptotein-ligandinteractionsthatwidelyusedinfunctionalgenomics,proteomicsandpatho
4、logystudy.ThisarticleprovidesanoverviewonthebasicprinciplesandapplicationprogressofY2Hsystemandsomederivedtechniques.Keywords:?Yeasttwo-hybrid（Y2H）systemProtein-proteininteractionTwo-hybridmethodologysystem生物大分子間的相互作用是有機(jī)體細(xì)胞活動(dòng)的子區(qū)域從而激活基因的轉(zhuǎn)錄。兩者分開時(shí)不能激活基礎(chǔ)，在蛋白質(zhì)層面上揭示生命活動(dòng)本質(zhì)是現(xiàn)代生基因轉(zhuǎn)錄，只有BD和AD通過(guò)一定方式在空間上足物學(xué)的
5、一個(gè)主要目標(biāo)。1989年誕生的酵母雙雜交夠靠近，才能發(fā)揮完整的GAL4轉(zhuǎn)錄因子活性?；?］（Yeasttwo-hybrid，Y2H）系統(tǒng)以及隨后出現(xiàn)的各種于此特點(diǎn)，F(xiàn)ields和Song設(shè)想以一對(duì)能相互作用衍生系統(tǒng)是研究蛋白質(zhì)之間以及蛋白質(zhì)和RNA、小的蛋白質(zhì)為橋梁，將空間上分開的BD和AD彼此分子化合物之間相互作用的最重要的工具，已成功拉近，從而重建出具有活性的轉(zhuǎn)錄因子，以此創(chuàng)立揭示了大量的蛋白相互作用，在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋了Y2H系統(tǒng)。在該系統(tǒng)中，將BD和AD基因分別［1］白質(zhì)組學(xué)、病理學(xué)、藥物研發(fā)等方面有著廣泛應(yīng)用。和誘餌蛋白（Bait）和獵物蛋白（Prey）基因構(gòu)建本文對(duì)Y2H
6、系統(tǒng)的基本原理、衍生系統(tǒng)和應(yīng)用進(jìn)展成融合蛋白表達(dá)載體，使其在酵母中共表達(dá)出BD-等方面進(jìn)行介紹。Bait和AD-Prey，借助Bait和Prey的物理性相互作1酵母雙雜交系統(tǒng)的原理用使BD和AD相互靠近而產(chǎn)生具有功能的轉(zhuǎn)錄因子，進(jìn)而激活1個(gè)或多個(gè)報(bào)告基因（如lacZ、HIS3酵母GAL4轉(zhuǎn)錄因子由兩個(gè)可以分開的結(jié)構(gòu)和URA3等）的轉(zhuǎn)錄。域組成：DNA結(jié)合域（DNAbindingdomain，BD）負(fù)責(zé)結(jié)合基因的上游激活序列，將轉(zhuǎn)錄激活域2酵母雙雜交系統(tǒng)的衍生系統(tǒng)（Transcriptionalactivationdomain，AD）募集到啟動(dòng)Y2H系統(tǒng)是在酵母菌這種真核細(xì)胞環(huán)境中研究收
7、稿日期：2013-08-03基金項(xiàng)目：特色果蔬質(zhì)量安全控制湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金項(xiàng)目（2013K04）作者簡(jiǎn)介：黃欣媛，女，博士，研究方向：生物化學(xué)與分子生物學(xué)；E-mail：huangxycn@gmail.com76生物技術(shù)通報(bào)BiotechnologyBulletin2014年第1期蛋白相互作用的一種技術(shù)，具有操作簡(jiǎn)便、無(wú)需繁2.2報(bào)告基因的改進(jìn)瑣的蛋白純化操作、可以檢測(cè)較弱的相互作用等優(yōu)多個(gè)報(bào)告基因的引入有利于提高Y2H技術(shù)的靈［3］［
