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《人肺腺癌多藥耐藥細胞系a549 2fcddp的建立及相關基因表達檢測》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、華中科技大學碩士學位論文人肺腺癌多藥耐藥細胞系A549/cDDP的建立及相關基因表達檢測姓名：趙偉剛申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學（胸外科）指導教師：潘永成20090528華中科技大學碩士學位論文人肺腺癌多藥耐藥細胞系A549/cDDP的建立及相關基因表達檢測華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬協(xié)和醫(yī)院胸外科研究生趙偉剛導師潘永成王建軍副教授教授中文摘要目的：本研究旨在建立人肺癌多藥耐藥細胞系，研究其耐藥特性和機制。方法：應用人肺腺癌細胞株A549，采用順鉑（cDDP）大劑量間歇誘導法，建立多藥耐藥細胞系A549/cDDP。相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)和結構差異，繪制兩種細胞的體外生長曲
2、線。用MTT法檢測該耐藥細胞株對多種化療藥物的多藥耐藥性，采用流式細胞術檢測該耐藥細胞表面多耐藥基因（MDR）的表達產物P糖蛋白（P-gp）、多藥耐藥相關蛋白（MRP）及谷胱甘肽硫轉移系統(tǒng)（GSH/GST）的表達情況，應用RT-PCR檢測MDR、MRP基因表達水平。結論：建立的A549/cDDP具有明確的多藥耐藥性，其多藥耐藥基因MDR及MRPmRNA表達升高。關鍵詞：人肺腺癌；多藥耐藥；基因表達2華中科技大學碩士學位論文AbstractObjectiveIthasbeenproventhatchemotherapyfailurecausedbymultidrugresi
3、stanceinlungtumorcellsisthemainreasoninfluencesthepatient’ssurvivalrate.Theaimofthestudyistoestablishamultidrugresistancecelllineofhumanlungadenocarcinomaandstudythemechanismofmultidrugresistance．MethodsHumanlungadenocarcinomacelllineA549wasinducedtomultidrugresistancecelllineA549/cDDPbyi
4、ntermittentadministrationofhighdoseofcisplatin(cDDP)．ThemultidrugresistancewasdetectedbyusingMTTassay．Theexpressionsofmdr-1gene-codedP-glycoportein(P-gP)，multidrugresistance-associatedprotein(MRP),andGSH／GSTwereexaminedbyflowcytometricassay．TheexpressionsofMDRandMRPgenewerealsodetectedusi
5、ngRT—PCRinbothA549/cDDPandA549celllines.ResultsA549/cDDPwasresistanttomanyanti—tumoragents．TheIC50ofA549/cDDPwas16.87timeshigherthanthatofA549．It’sexpressionsofP-gPandMRPwereincreasedsignificantlyto(70.5±4.9)％and(29.4±2.9)，respectively，3華中科技大學碩士學位論文whilethoseofA549wereonly(42.4±5.6)and(21
6、.4±3.5)，respectively．TherewasnodifferenceoftheGSH／GSTexpressionbetweenA549/DDPandA549cells．ConclusionA549/cDDPisamodelwithmultidrugresistanceandthelevelsofMDRandMRPmRNAexpressionsarehigherinA549/cDDPthanthoseinA549.Keywordshumanlungadenocarcinoma；multidrugresistance；geneexpression4獨創(chuàng)性聲明本人
7、鄭重聲明，本學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果的總結。盡我所知，除文中已經標明引用的內容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本人將承擔本聲明引起的一切法律后果。學位論文作者簽名：日期：年月日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權華中科技大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入
