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《從孕婦外周血分選胎兒細(xì)胞行無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、一、本研究的現(xiàn)實(shí)意義在過去的半個(gè)多世紀(jì)中，伴隨著人口和疾病模式的轉(zhuǎn)變，出生缺陷問題日益突出，已成為我國嬰兒死亡、兒童和成人殘疾的主要原因Z—。根據(jù)1986年至1987年衛(wèi)生部組織的全國出生缺陷監(jiān)測資料，全國出生缺陷的總發(fā)生率為13.01%。。但我國出生缺陷監(jiān)測結(jié)果所顯示的數(shù)據(jù)，并不能反映我國出生缺陷的真實(shí)發(fā)生水平，監(jiān)測所得到的出生缺陷發(fā)生率僅僅是冰山之頂，明顯偏低。國外研究表明，在發(fā)展屮國家，嚴(yán)重遺傳性疾病和岀生缺陷到5歲時(shí)的累積發(fā)生率可達(dá)到78.6%。，但在出生時(shí)僅僅能發(fā)現(xiàn)其中的27.6%。。鑒于我國出生缺陷監(jiān)測對(duì)象偏重于城市地區(qū)、
2、診斷水平還不高等原因，我國專家根據(jù)現(xiàn)有的國內(nèi)外資料判斷我國出生缺陷的發(fā)生率應(yīng)在40%。?50%。以上，我國毎年實(shí)際發(fā)生的出生缺陷至少有80刀?100萬例，即每30秒?40秒鐘就有一個(gè)出生缺陷兒降生。所以，從2000年起，我國決定在全國范圍開展出生缺陷干預(yù)工程。出生缺陷干預(yù)的關(guān)鍵是預(yù)防，世界衛(wèi)生組織提出的預(yù)防出生缺陷的“三級(jí)預(yù)防'‘策略是：一級(jí)預(yù)防是防止出生缺陷兒的發(fā)生，包括婚前檢查、遺傳咨詢、選擇最佳的生育年齡、孕早期保健，包括合理營養(yǎng)、預(yù)防感染、謹(jǐn)慎用藥、戒煙戒酒、避免接觸放射線和冇毒冇害物質(zhì)、避免接觸高溫環(huán)境等；二級(jí)預(yù)防是減少出生
3、缺陷兒的出生，主要是在孕期通過早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早采取措施，以預(yù)防出生缺陷兒的出生；三級(jí)預(yù)防是對(duì)出生缺陷的治療。出于大部分出生缺陷還缺乏特異的一級(jí)預(yù)防措施，目前出生缺陷干預(yù)在很大程度上依賴于產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷。產(chǎn)前診斷是近代醫(yī)學(xué)科學(xué)的一項(xiàng)重大進(jìn)展，它通過對(duì)胚胎或胎兒是否患有某種遺傳病或先天缺陷在出生前作出準(zhǔn)確判斷，指導(dǎo)進(jìn)行選擇性流產(chǎn)，以防止病殘兒出生，從而使生育健康后代的理想成為現(xiàn)實(shí)。在過去的幾十年中，產(chǎn)前診斷的方法主要是靠絨毛活檢（chorionicvillussampling,CVS羊膜腔穿刺和臍靜脈穿刺等冇創(chuàng)傷性的檢查，且主要是應(yīng)
4、用在懷疑孕育冇染色體病胎兒的孕婦和高齡孕婦中。但作為一個(gè)群體，這些高危人群生出的唐氏綜合癥患兒的絕對(duì)數(shù)量只占20%左右，80%以上的患兒是35歲以下的低危孕婦所生⑴，而這些孕婦往往并沒有做產(chǎn)前診斷，原因是這些有創(chuàng)性產(chǎn)前診斷方法可能導(dǎo)致0.5%?1%的胎兒流產(chǎn)或早產(chǎn)，另外還可能造成宮內(nèi)感染、胎兒肢體損傷、孕婦焦慮癥等不良后果，從而妨礙了產(chǎn)前診斷的普及?？谇霸谂R床上常規(guī)應(yīng)用的無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷方法包括超聲和孕婦血清篩查。但研究證實(shí)這兩種方法均不十分理想。Ewigman及其同事⑷在1993年進(jìn)行了一項(xiàng)多中心研究，15000名選用超聲篩查的孕婦，
5、只冇35%的胎兒畸形被發(fā)現(xiàn)，口這其中只有一半(17%)的異常是在妊娠24周以前被發(fā)現(xiàn)的。盡管許多超聲學(xué)標(biāo)志如胎兒頸項(xiàng)透明層(nuchalfoldthickening,NT)＞心臟缺陷、股骨及鼻骨縮短等被證明與唐氏綜合征有關(guān)，但用這些聯(lián)合指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)也只能診斷出40%?60%的唐氏綜合征患兒⑶。在孕婦血清中含有由胎兒或胎盤產(chǎn)生的特異性蛋口如未結(jié)合雌三醇、甲胎蛋白及人絨毛膜促性腺激素，如果在孕早期檢測孕婦血清中以上三種激素的含量，即所謂孕婦血清學(xué)三聯(lián)篩查，用于35歲以上的高齡孕婦吋，可以發(fā)現(xiàn)87%的唐氏綜合征，但假陽性率高達(dá)23%?34%
6、；如果用于篩查小于35歲的孕婦，則只有60%的唐氏綜合征病例被篩出，假陽性率為所以這種篩查方法也是不理想的。因此探索一條可應(yīng)用于所冇孕婦的、常規(guī)篩查胎兒染色體異常的無創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷新途徑近年來一直是當(dāng)前國際醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)和生殖醫(yī)學(xué)界關(guān)注的焦點(diǎn)之一。本研究即是要探討一種從孕婦外周血中分選出胎兒有核紅細(xì)胞從而進(jìn)行無創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷的方法，如果這種方法可行并能成功應(yīng)用于臨床，必將使未來的產(chǎn)前診斷更加簡便、安全和普及，必將明顯降低新生兒出生缺陷發(fā)生率，提高出生人口素質(zhì)，具有極大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。二、孕婦外周血中胎兒細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)及種類早在1893年
7、，Schmol就在死于子癇的孕婦肺循環(huán)屮發(fā)現(xiàn)滋養(yǎng)層細(xì)胞，首先提出孕婦血中存在來自胎兒的細(xì)胞，該觀點(diǎn)后來被其他研究者所證實(shí)“】。盡管滋養(yǎng)層細(xì)胞早在妊娠6周就可以出現(xiàn)于孕婦血中，終止妊娠后即不復(fù)存在，其特殊的形態(tài)也便于在顯微鏡下辨認(rèn)，但因其在正常妊娠中，會(huì)很快在肺循環(huán)中被清除，且其多核特征及嵌合性特點(diǎn)干擾遺傳學(xué)分析，故滋養(yǎng)層細(xì)胞并沒有作為胎兒細(xì)胞的分選對(duì)象而得到廣泛應(yīng)用。1969年，Walknowska[6]等發(fā)現(xiàn)了母血中的胎兒淋巴細(xì)胞可以說是無創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷技術(shù)發(fā)展的一個(gè)里程碑。他們發(fā)現(xiàn)在孕有男性胎兒的母血中的淋巴細(xì)胞分裂原存在Y染色體
8、。1979年，Herzenberg等⑺報(bào)道使用HLA-A2的單克隆抗體，用熒光激活的細(xì)胞分選法自孕婦外周血屮分離岀了淋巴細(xì)胞。但因淋巴細(xì)胞的生存周期較長，難以分辨是否來源于前一次妊娠的胎兒，所以淋巴細(xì)胞也不適宜作為分選對(duì)
