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《章病毒感染的檢查方法與防治原則.ppt》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、病毒的檢測生物學(xué)檢測免疫學(xué)檢測核酸的檢測第一節(jié)病毒感染的檢查方法標(biāo)本的采集與送檢1.標(biāo)本中常加入抗生素。2.低溫保存，盡快送檢。3.血清學(xué)標(biāo)本：兩份二、病毒的分離與鑒定標(biāo)本分離培養(yǎng)動物接種雞胚培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)病毒形態(tài)觀察光鏡電鏡包涵體病毒體CPETCID50,PFU（一）病毒的分離培養(yǎng)1.動物接種應(yīng)用：尚無敏感細(xì)胞的病毒培養(yǎng)動物：兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點：結(jié)果易觀察，可建立動物模型缺點：有飼養(yǎng)條件要求，費用高，動物體內(nèi)常帶有潛伏病毒動物接種2.雞胚培養(yǎng)采用孵化9-14天的雞胚絨毛尿囊膜（allantocherion）痘苗病毒、人類皰疹病毒
2、尿囊腔（allantoiccavity）接種部位流感病毒、腮腺炎病毒羊膜腔（amnioticcavity）流感病毒的初次分離卵黃囊（yolksac）嗜神經(jīng)病毒優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低缺點：操作程序復(fù)雜3.細(xì)胞培養(yǎng)單層細(xì)胞培養(yǎng)（monolayercellculture）懸浮細(xì)胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）原代細(xì)胞（primarycell）細(xì)胞種類二倍體細(xì)胞（diploidcell）傳代細(xì)胞系（continuouscellline）病毒的細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)瓶單層細(xì)胞病毒增殖的指征1.細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopat
3、hiceffect,CPE)①細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等（多數(shù)病毒）；②形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞（麻疹病毒、巨細(xì)胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；③在培養(yǎng)細(xì)胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。麻疹病毒感染細(xì)胞呼吸道合胞病毒感染細(xì)胞形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞形成包涵體(inclusionbody)腮腺炎病毒感染細(xì)胞2.紅細(xì)胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋紅細(xì)胞表面HA受體3.干擾現(xiàn)象（interference）4.細(xì)胞代謝改變細(xì)胞代謝變慢pH變化減慢（二）病毒的鑒定病毒形態(tài)學(xué)鑒定病毒血清學(xué)鑒定病
4、毒分子生物學(xué)鑒定（三）病毒數(shù)量與感染性測定1.血凝試驗：病毒總量（活病毒＋死病毒）2.空斑形成試驗（plaqueformationtest）3.50％組織細(xì)胞感染量（50％tissuecultureinfectiousdose,TCID50）感染性病毒量空斑試驗三、病毒感染的血清學(xué)診斷應(yīng)用：①采取標(biāo)本分離病毒為時已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實所分離的病毒的臨床意義④進(jìn)行血清流行病學(xué)調(diào)查等1.中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和抗體病毒失去感染性特點：特異性高，抗體維持時間長應(yīng)用：人群免疫情況的
5、調(diào)查臨床診斷少用2.血凝抑制試驗（hemagglutinationinhibitiontest）—正粘病毒型與亞型鑒定病毒＋雞紅細(xì)胞＝凝集（血凝試驗）病毒＋特異性抗體＋雞紅細(xì)胞＝不凝集（血凝抑制試驗）3.補體結(jié)合試驗（complementfixationtest）用已知病毒可溶性補體抗原檢測病人血清中相應(yīng)的補體抗體特點：特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快應(yīng)用：近期感染指標(biāo)。四、病毒感染的快速診斷數(shù)小時內(nèi)出結(jié)果病毒顆粒病毒成分（抗原或核酸）早期抗體檢測（IgM）（一）形態(tài)學(xué)檢查電鏡和免疫電鏡檢查普通光學(xué)顯微鏡檢查包涵體（二）病毒成分檢測1.病
6、毒蛋白抗原檢測免疫標(biāo)記技術(shù)2.病毒核酸檢測核酸擴增技術(shù)核酸雜交技術(shù)基因芯片技術(shù)基因測序（三）早期抗體檢測可診斷急性感染特異性IgM抗體：孕婦感染風(fēng)疹病毒EBV早期抗原抗體第二節(jié)病毒感染的特異性預(yù)防人工主動免疫(artificialactiveimmunization):將疫苗(vaccine)或類毒素(toxoid)接種于人體，使機體主動產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。主要用于預(yù)防疫苗第一代疫苗第二代疫苗第三代疫苗死疫苗活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗重組載體疫苗合成肽疫苗DNA疫苗轉(zhuǎn)基因植物疫苗*載體疫苗利用非致病微生物做載
7、體，將病毒的保護(hù)性抗原基因片段重組到載體微生物基因組中，用表達(dá)保護(hù)性抗原的微生物作為疫苗。載體疫苗是活疫苗，具有和減毒活疫苗相似的特點。*亞單位疫苗用化學(xué)方法裂解和提取而制成的病毒保護(hù)性抗原組份。其特點與滅活疫苗類似。基因工程亞單位疫苗*用基因工程表達(dá)的病毒蛋白抗原制成的疫苗。*表達(dá)外源基因的系統(tǒng)----細(xì)菌、酵母、哺乳動物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞等。*基因工程亞單位疫苗的安全性好，但免疫原性較差，需使用佐劑以提高其免疫原性。*核酸疫苗@將編碼病毒某種抗原蛋白的外源基因，即抗原的cDNA或mRNA與載體（如質(zhì)粒DNA）重組直接注入體內(nèi)，使體細(xì)胞
8、編碼病毒抗原，并通過細(xì)胞MHC分子結(jié)合遞呈后，在輔助因子的協(xié)助下誘導(dǎo)細(xì)胞免疫和抗體應(yīng)答。@DNA疫苗；RNA疫苗。人工被動免疫(artificialpassiveimmunization)輸入含有特異性抗體的免疫血清、純
