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《米非司酮對體外培養(yǎng)子宮肌瘤細胞作用的形態(tài)學觀察.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、米非司酮対體外培養(yǎng)子宮肌瘤細胞作用的形態(tài)學觀察作者：姚愛琳，糜若然，崔全新,朱爭艷單位：天津市第三中心醫(yī)院（姚愛琳、朱爭艷）;天津醫(yī)科大學附屈醫(yī)院（糜若然、崔全新）【摘要】目的觀察不同濃度米非司酮作用下體外培養(yǎng)的子宮肌瘤細胞的形態(tài)學變化，尋找治療子宮肌瘤的最佳米非司酮濃度。方法光鏡及電鏡下觀察不同濃度米非司酗（10必?IO-4mol/L）T體外培養(yǎng)的子宮肌瘤細胞的其形態(tài)學變化。結(jié)果10-8?10-7mol/L米非司酮対細胞生長無影響，10-6mol/L以上濃度肌瘤細胞菱縮，10-4mol/L抑制作用垠強。結(jié)論米非司酮破壞肌瘤細胞結(jié)構(gòu)，干擾核膜、胞膜、細胞器、及
2、染色體，并與米非司齣濃度成止相關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】體外培養(yǎng);子宮肌瘤細胞;米非司酮;形態(tài)學[Abstract]ObjectiveToobservethemorphologicalchangesofthehumanleiomyomacellsculturedinthepresenceofmifepristone,andtoexploretheoptimalconcentrationoftreatingleiomyomawithmifepristone.MethodsThemorphologicalchangesofthecellswereobservedundermi
3、croscopeandelectronniicroscope.ResultsTheinhibitoryeffectofmifepristoneonthecellswasonlyexpressedwhentheconcentrationofmifepristonewasrelativelyhigh（10-6mol/L）,andthecellbegantoregression.ConclusionMifepristionemaydestroythestrutureofleiomyomacellsandinterferethemembraneofcellandnuc
4、lei,organsofcell,chromosome.Theinhibitoryeffectofmifepristoneonhumanleiomyomacellsinvitroisconcentrationdependent.【Keywords]cultureinvitro;uterineleiomyoma;mifepristone;morphology子宮肌瘤是激素依賴性腫瘤己被公認，抗孕激素制劑米非司酮用于治療子宮肌瘤已収得一定療效，但肌瘤縮小程度差異較大，從0%?80%不等[1],故人們對米非司酮治療子宮肌瘤機制進行了不同層面的研究。本研究采用子宮肌瘤
5、細胞體外培養(yǎng)法加入不同濃度的米非司恫，用電鏡及光鏡觀察其結(jié)構(gòu)變化，以了解米非司酮縮瘤的機制，并為臨床應(yīng)用米非司酗治療子宮肌瘤時劑量的選擇提供參考依據(jù)。1材料與方法1」標本來源2009年2至6月在天津市第三中心醫(yī)院于?術(shù)室行子宮肌瘤剝除及子宮切除17例患者的肌瘤紐織，患者年齡40?55歲，并口確認術(shù)前3個月未服用過激素類藥物。根據(jù)月經(jīng)周期和病理診斷確定子宮內(nèi)膜分期，口紐?織學診斷確診子宮肌瘤，并未發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜有病理性改變，其中增生期15例，分泌期2例。1.2方法1.2.1子宮肌瘤細胞分離與原代培養(yǎng):將新鮮的肌瘤組織剪碎成1mm3小塊，5g纟
6、[織加入細胞生長液與
7、細胞消化液2：1的混合液20ml中消化,過目篩網(wǎng)除去未消化的組織,離心，得到純化的子宮平滑肌瘤細胞。用0.04%臺盼藍染色行活細胞計數(shù)，觀察細胞活力約90%,用細胞生長液調(diào)幣細胞種植濃度為2×105/ml,混勻后接種于24孔培養(yǎng)板中，每孔接利*2ml,置37°C5%CO2恒溫孵育箱中培養(yǎng)，每2?3天換液1次。1.2.2米非司酮對肌瘤細胞體外生長的作用:取同批培養(yǎng)成單層生長至融合狀態(tài)的細胞（5?7d）,加入米非司酮濃度10-8?10-4nwl/L,每天記錄觀察細胞的形態(tài)及生長情況，并及時照相。每組均設(shè)對照，對照紐?加入等體積無水乙醇。1.2.3米非司
8、酮作用后的肌瘤細胞的超微結(jié)構(gòu)：用1：1的2%乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）及0.05%的胰蛋白酶2ml加入培養(yǎng)3cl細胞的孔板中消化，離心制成細胞團，2.5%戊二醛固定，PBS液漂洗，10%四氧化餓后固定，乙醇逐級脫水，Epon812環(huán)氧樹脂包埋。LKBNOVE型超薄切片機切片，厚度為50?70nm,經(jīng)酷酸鈾和檸檬酸鉛染色后，JEOL1010透射電鏡觀察。2結(jié)果2.1米非司酮對體外培養(yǎng)的子宮肌瘤細胞作用的光鏡下形態(tài)體外培養(yǎng)生長良好的子宮肌瘤細胞呈梭形、或不規(guī)則三角形，細胞呈放射狀或旋渦狀生長，HE染色中-央有卵圓形的核，核旁可見空泡，胞漿飽滿（圖l）o10-8-
9、10-7mol/L的米非司酮組細胞生長
