超聲法提取香椿葉多糖條件優(yōu)化-論文.pdf

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1、第28卷第4期安徽工程大學(xué)學(xué)報(bào)V01．28．No．42013年12月JournalofAnhuiPolytechnicUniversityDec．，2O13文章編號：1672—2477(2013)04—0001—03超聲法提取香椿葉多糖條件優(yōu)化徐強(qiáng)，黃曉東，盧健(安徽工程大學(xué)生物與化學(xué)工程學(xué)院，安徽蕪湖241000)摘要：以香椿老葉為原材料，通過正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化方法，探討了超聲時(shí)間、超聲功率、溫度對香椿葉粗多糖提取的影響．結(jié)果表明，香椿葉多糖超聲提取最優(yōu)工藝條件為超聲時(shí)間45min、超聲功率240W、溫度60℃，此條件下香椿

2、老葉多糖提取率為5．49．該工藝較一般傳統(tǒng)工藝香椿老葉粗多糖提取率有所提高．關(guān)鍵詞：香椿葉；多糖；超聲提取；正交試驗(yàn)中圖分類號：$132文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A香椿(Toonasinensis)又名椿樹、椿，楝科，香椿葉、芽具有很高的藥食作用，被國外譽(yù)為“綠色保健菜”[．香椿葉含有如多糖、生物堿、皂苷、揮發(fā)油等大量生物活性物質(zhì)，其提取物具有調(diào)血脂、降血糖、抗癌、體外抗氧化等生理作用]．對多糖的提取方法主要有熱水浸提]、微波預(yù)處理n]、超聲提取等方法．超聲波本身就是能量的一種形式，形成反復(fù)的沖擊波可以激活反應(yīng)分子，使多糖的提取得率大

3、大提高，其主要是利用超聲波的空化作用使生物活性物質(zhì)加速溶解，從而增強(qiáng)提取效率．而對香椿老葉超聲提取方法未見文獻(xiàn)報(bào)道．本研究采用正交實(shí)驗(yàn)法對香椿老葉多糖進(jìn)行優(yōu)化，為香椿老葉資源深度開發(fā)提供理論依據(jù)．1實(shí)驗(yàn)材料與方法1．1材料、試劑與儀器香椿葉于1O月份采摘于連云港贛榆縣沙河子園藝場，于5O℃烘干粉碎備用，葡萄糖、苯酚、濃硫酸等皆為分析純，以蒸餾水作為提取溶劑．722可見分光光度計(jì)，上海佑科儀表儀器有限公司；KQ4OO—KDB型高功率數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司．1．2試驗(yàn)方法(1)多糖的測定方法．采用硫酸一苯酚

4、法，以葡萄糖作為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行測定．(2)香椿老葉多糖得率的測定．以蒸餾水溶解香椿老葉粉末制得香椿老葉提取液，提取后抽濾處理，取該濾液1mL于帶刻度試管中，補(bǔ)加蒸餾水至2mL，以2mL蒸餾水作對照．根據(jù)下式計(jì)算多糖得率：多糖提取得率()一提取液中多糖含量／香椿老葉質(zhì)量×100．(3)單因素及正交試驗(yàn)．試驗(yàn)首先考察不同單因素提取條件下對香椿老葉多糖得率的影響，包括提取時(shí)間、提取溫度、提取功率、料液比，再選取3個(gè)主要因素進(jìn)行正交試驗(yàn)，以確定最優(yōu)提取條件．2結(jié)果與討論2．1繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確稱取105℃下干燥恒重葡萄糖粉末20

5、mg于500mL容量瓶，加水至刻度，搖勻作為貯備液．分別用移液管于貯備液中移取0．2mL、0．4mL、0．6mL?08mL、1．0mL、1．2mL、1．4mL和1．6mL，補(bǔ)加蒸餾水至2mL，分別加入6％苯酚溶液1mL和濃硫酸5mL，靜置30rain后于490nm處測定其吸光度，并以2mL蒸餾水作對照進(jìn)行空白實(shí)驗(yàn)．按紫外一可見分光光度法，以吸光度(A)為縱坐標(biāo)，以葡萄糖質(zhì)量為橫坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，如收稿日期：2013—07—10作者簡介：徐強(qiáng)(1988一)，男，江蘇連云港人，碩士研究生．通訊作者：黃曉東(1963一)

6、，男，安徽蕪湖人，副教授，碩導(dǎo)．安徽工程大學(xué)學(xué)報(bào)第28卷圖1所示．得到線性回歸方程：Y一0．0089x一0．0003，該方程線性關(guān)系良好(R一0．9989)，表明葡萄糖在10～70ug范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系，可用此方程計(jì)算待測溶液中多糖含量．葡萄糖質(zhì)量／ug2．2單因素試驗(yàn)圖1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(1)超聲時(shí)間對提取率的影響．準(zhǔn)確稱取香椿老葉粉末5g各5份，按料液比1：30，超聲功率200W，溫度60℃，時(shí)間取15min、30min、45rain、60rain、75rain，按1．2所述方法測定多糖含量，并進(jìn)行3次平行試

7、驗(yàn)，結(jié)果取平均值，提取多糖結(jié)果如圖2所示．結(jié)果表明，隨著提取時(shí)間增加，多糖提取率逐漸增加，但在50min后多糖提取率趨于平穩(wěn)，考慮到可能是由于達(dá)到一定時(shí)間后多糖已經(jīng)溶出，45min時(shí)多糖最大提取率為5．13，所以選擇45min為適宜的提取時(shí)間．(2)超聲功率對提取率的影響．準(zhǔn)確稱取香椿老葉粉末5g各5份，按料液比1．：30，時(shí)間45min，溫度6O℃，超聲功率取160W、200W、240W、280W、320W，按1．2所述方法測定多糖含量，并進(jìn)行3次平行試驗(yàn)，結(jié)果取平均值，提取多糖結(jié)果如圖3所示．結(jié)果表明，開始時(shí)提取率隨

8、超聲功率增大而變高，在240W下提取率達(dá)到最大5．13，之后功率增大反而提取率下降，分析可能是超聲波空化作用加劇，導(dǎo)致其他成分溶出增加的原因．因此，選取240W為適宜功率．(3)溫度對提取率的影響．準(zhǔn)確稱取香椿老葉粉末5g各5份，按料液比1：3O，時(shí)間45min，功率240W，溫度取30℃、4OC、50℃、6O℃、7