ssi高效液相的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

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1、SSI高效液相的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程適用于所有使用此儀器者1.流動(dòng)相的處理1.1過濾溶劑溶劑在使用前一定要用0.5μm的過濾器過濾，如果使用固體化學(xué)試劑（緩沖鹽）配制流動(dòng)相，過濾特別重要，不能讓固體微粒污染泵，阻塞進(jìn)樣器和柱頭過濾片。本實(shí)驗(yàn)室有水溶性和有機(jī)性兩種過濾膜供選擇，過濾水溶性流動(dòng)相時(shí)（如甲醇/水），先用1-2ml甲醇潤濕過濾膜，有助于快速抽濾。1.2保持儲(chǔ)液瓶的清潔用普通溶劑瓶作流動(dòng)相儲(chǔ)液器應(yīng)不定期廢棄瓶子，最后一次應(yīng)用HPLC級(jí)的水或溶劑清洗，不能在清洗過程中留下污跡。1.3保證溶劑的質(zhì)量一定要用HPLC級(jí)的溶劑

2、，水也應(yīng)達(dá)到HPLC級(jí)，同樣也要使用高純度的緩沖鹽。1.4故障及解決方法1.4.1流動(dòng)相脫氣不充分流動(dòng)相受熱，或者流動(dòng)相不同組分混合時(shí)會(huì)有氣體產(chǎn)生，氣泡進(jìn)入泵內(nèi)引起壓力波動(dòng)，增加噪音，色譜圖上出現(xiàn)毛刺?？稍囉孟铝蟹椒ń鉀Q問題：流動(dòng)相再脫氣；采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用；改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外預(yù)混合。1.4.2流動(dòng)相供給不暢流動(dòng)相用完，管道中吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn)。應(yīng)經(jīng)常觀察儲(chǔ)液器中流動(dòng)相的量，加足流動(dòng)相保證所有的樣品分析完畢。輸液管上裝溶劑濾頭，既可使輸液管沉至瓶底，又可過濾流動(dòng)相，儲(chǔ)液器蓋上留一小孔正好夾住

3、進(jìn)液管，使其不能上下移動(dòng)。溶劑濾頭阻塞引起管道和泵腔空化，壓力不穩(wěn)。溶劑濾頭被微粒所阻塞或長霉，去掉溶劑濾頭后如果系統(tǒng)運(yùn)轉(zhuǎn)正常，說明已找出問題，換上新的溶劑濾頭則可。有時(shí)候換上新的溶劑濾頭仍然不暢，那就需要查查流動(dòng)相的制備過程，或者換大孔徑的溶劑濾頭。不管如何，流動(dòng)相都需要重新過濾。流速過高、阻力大，造成空化現(xiàn)象，這是由于溶劑濾頭孔徑、管道內(nèi)徑、流速和溶劑黏度等引起的。如果流速大于10ml/min，常會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象。使用下列方法解決：（1）使用低流速；（2）換大孔徑的溶劑濾頭；（3）增加進(jìn)液管道內(nèi)徑；（4）抬高或加壓

4、儲(chǔ)液器；（5）不用溶劑濾頭，但流動(dòng)相一定要先過濾；（6）儲(chǔ)液器蓋子太緊，在儲(chǔ)液器內(nèi)形成真空，打出的流動(dòng)相不連續(xù)。應(yīng)松開蓋子或留有1mm的縫隙；（7）進(jìn)液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液，注意調(diào)整進(jìn)液管道或更換新的。其它問題包括滲漏或接頭松動(dòng)、泵部件損壞等，都能引起供液不正常。1.4.3流動(dòng)相和儲(chǔ)液器被污染由于污染，噪音越來越大，檢測(cè)器基線上升。污染物可能被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統(tǒng)，而再以穩(wěn)定的濃度流出來，所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時(shí)弱流動(dòng)相可以使污染物聚在柱頂，流動(dòng)相強(qiáng)度增加后污染物可能被洗脫出來一個(gè)大的偽峰。有

5、時(shí)基線噪音突然增大或突然提高，都是因?yàn)榉磸?fù)加進(jìn)新的流動(dòng)相或系統(tǒng)用得太久（通宵）所造成的。新加進(jìn)的流動(dòng)相有污染物或者流動(dòng)相長霉，繁殖了細(xì)菌。臟的儲(chǔ)液器會(huì)污染清潔的流動(dòng)相。每種流動(dòng)相備有專用的儲(chǔ)液器，或者定期報(bào)廢儲(chǔ)液器。流動(dòng)相污染來自這幾個(gè)方面：試劑質(zhì)量不高，玻璃器皿不合格；微生物的影響；配制流動(dòng)相時(shí)操作不當(dāng)?shù)?。因此要求高純度化學(xué)試劑和HPLC級(jí)溶劑。玻璃器皿按規(guī)定清洗干凈。為防止微生物生長，每天要用甲醇清洗系統(tǒng)。懷疑系統(tǒng)內(nèi)生長了微生物，可用稀硝酸沖洗既可（注意不要損壞柱和管道系統(tǒng)），真空脫氣時(shí)防止泵油帶入流動(dòng)相。用清潔

6、的惰性塞子、攪棒、溶劑濾頭和玻璃器皿配制流動(dòng)相。已經(jīng)污染的流動(dòng)相一定要廢棄掉。2.儀器組成及電源2.1儀器組成本系統(tǒng)由SeriesⅢ泵，7725i進(jìn)樣器，Model500型紫外/可見光檢測(cè)器，柱溫箱（可選件），數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)一套。2.2電源儀器使用時(shí)按泵、檢測(cè)器、打印機(jī)和計(jì)算機(jī)的順序，依次接通電源。3.SeriesⅢ泵的操作3.1操作環(huán)境要求室內(nèi)應(yīng)保持環(huán)境清凈、無塵，并且有恒溫和恒濕設(shè)備。一般實(shí)驗(yàn)室的溫度應(yīng)保持在20~30℃之間，相對(duì)濕度保持在20%~90%之間。3.2溶劑使用注意事項(xiàng)除使用PEEK?泵頭以外，Seri

7、esIII泵里面跟溶劑接觸的所有部件的制造材料為316L不銹鋼、藍(lán)寶石、紅寶石或聚合物材料。這里面有一些材質(zhì)對(duì)酸（包括路易斯酸）和鹵化酰基非常敏感。應(yīng)避免使用以下溶劑：王水、溴、無水氯、氯化銅、氯化鐵、氯化亞鐵、氟利昂、胍、氫溴酸、鹽酸、氫氟酸、過氧化氫、碘、氯化汞等。注意，三氯甲烷和四氯化碳會(huì)緩慢分解，產(chǎn)生游離的氯化氫（鹽酸），會(huì)腐蝕不銹鋼流路系統(tǒng)，應(yīng)盡量避免使用。3.3前面板介紹3.3.1Prime/Purge閥：這是一個(gè)高效的空氣排放閥，當(dāng)打開閥時(shí)，液體將從此出口排出，而該閥完全關(guān)閉時(shí)，液體將從Filter/O

8、utlet出口排出，并進(jìn)入系統(tǒng)。當(dāng)泵或者流動(dòng)相入口管路有氣泡時(shí)，打開這個(gè)閥，用一個(gè)大注射器插在閥口抽液，或者按泵前控制面板上的“Prime”鍵。一般抽出20~30ml溶液即可。（注意：當(dāng)您擰開這個(gè)閥的時(shí)候，系統(tǒng)壓力一定要在100psi以下）3.3.1.1Filter/Outlet這是泵出口，內(nèi)置一個(gè)高壓在線過濾器（0.5um），該接口設(shè)計(jì)連接管