高效液相色譜的操作規(guī)程

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1、島津LC20A高效液相色譜操作規(guī)程一、儀器開機過程1、開機前的檢查工作在開機前，首先檢查柱子與檢測器（目前連接的是示差檢測器）是否連接完好。實驗過程中只能使用一種檢測器，將使用的柱子直接接入相應(yīng)的檢測器。（注：標(biāo)有“IN”/藍(lán)色的管路為進液管，標(biāo)有“OUT”/白色的管路為流出廢液管）柱子有方向性。2、液相色譜的開機順序及自檢首先打開柱溫箱及檢測器的開關(guān)，最后打開泵開關(guān)。開啟后檢查是否有如下界面：紫外檢測器：254nm0.00AUD21.0AV/V柱溫箱：SETACTUALT.MAX泵：1.000mlmax20.05.3MPamin0.0示差檢測器

2、：0over100A(注：自檢需要1~2min，如果出現(xiàn)“CHECK-GOOD”為正常；出現(xiàn)“CHECK-NOGOOD”為故障需與工程師聯(lián)系)3、電腦開機及軟件的進入方式打開電腦，點擊桌面圖標(biāo)“LCSolution”，打開后點擊“儀器1”（上方方框）進入操作界面。在操作欄中找到“LC：就緒”，出現(xiàn)兩聲爆鳴聲，即表示開機正常。如不出現(xiàn)“LC：就緒”可以在左側(cè)邊欄中找到“系統(tǒng)配置”中的“自動配置”，點擊“自動配置”將自動添加或更改檢測器。如果完成以上操作后，仍未出現(xiàn)“LC：就緒”，與工程師聯(lián)系。4、上樣前的排空工作（很重要）剛開機以及換流動相時都要做

3、排空（1）點擊電腦控制泵的圖標(biāo)（機器上的“PUMP”燈滅），確認(rèn)泵處于關(guān)閉狀態(tài)。（2）逆時針旋轉(zhuǎn)泵上的排空閥90度以上（3）按“purge”鍵（4）屏幕上出現(xiàn)“purgingline”（5）再按“purge”鍵（6）順時針關(guān)閉排空閥（注：此過程大概需要3min，且每次使用前都必須排空。轉(zhuǎn)不動的時候為關(guān)，即順時針為關(guān)閉，則走柱子，可進行實驗；逆時針轉(zhuǎn)動為開閥，即不進柱子，將泵里空氣和廢液排空。）5、排空后電腦操作過程點擊“文件”菜單下的“打開文件”，檢查一下方法是否準(zhǔn)確。先在電腦上調(diào)出方法文件，方法如果不改的話，點擊下載；如果更改的話，先保存方法后

4、點擊下載。然后在電腦上點儀器開關(guān)（注：圖標(biāo)凹陷表示打開，點儀器開關(guān)后，所有的泵、柱溫箱開關(guān)都打開）。開泵后，如果使用示差檢測器的話，就要點擊Rflow和Balance，用于沖洗參比池和檢測池。首先點擊Rflow，屏幕出現(xiàn)0和Over的時候，關(guān)掉Rflow。點擊Balance，檢測沖洗的效果。Balance數(shù)字會上升然后再下降，直到0左右。這個過程可以重復(fù)數(shù)次，知道Balance顯示0為止。這個時候系統(tǒng)一直以方法文件中的參數(shù)運行，待基線平穩(wěn)后，準(zhǔn)備進樣。6、單次運行方式及參數(shù)設(shè)定點擊“單次運行”按鈕，出現(xiàn)“采集信息、數(shù)據(jù)文件、方法文件、進樣體積”對

5、話框。將“數(shù)據(jù)文件”重新命名，“進樣體積”設(shè)定為20μL。點擊“確定”，彈出“開始/否”對話框，不要進行任何點擊操作。此時開始進樣。7、進樣方法：插入進樣針，向上搬動閥門，推針進樣，然后向下搬動閥門，拔出進樣針。（注：如果進樣前未點擊“單次運行”鍵，“停止”鍵不可用。這時可按“LC停止”鍵強制停止當(dāng)前操作。）二、數(shù)據(jù)分析1、如需改變實驗的分析時間，可點擊工具欄中的“采集”，找到“更改分析時間”進行修改。2、從“數(shù)據(jù)文件”中可以找到已命名的所需文件，進行實驗分析。3、在“數(shù)據(jù)采集”中選擇“顯示批處理”，可刪除無用的表格。三、關(guān)機操作過程1、用示差檢

6、測器的話，首先換掉柱子，流動相含鹽的話，將流動相換成抽慮完的雙蒸水，停泵，排空，開泵，點擊Rflow，2ml/min流速的話，沖洗1min，0.8ml/min流速的話，沖洗10min，通過Balance檢查。此過程是為了將鹽置換；再將流動相更換成甲醇（30%-40%甲醇水，V/V）（預(yù)備長期閑置時應(yīng)用純甲醇）沖洗時間在0.8ml/min時半小時。如果流動相不含鹽的話（0.0001mol/LH2SO4），直接將流動相換成甲醇，停泵，排空，開泵，點擊Rflow，0.8ml/min流速，沖洗30min，通過Balance檢查。停泵，再依次關(guān)閉柱溫箱和檢

7、測器開關(guān)。2、用紫外檢測器的話，如果流動相不含鹽分時，在就緒狀態(tài)下，用此流動相以原流速大量沖洗，待基線穩(wěn)定后，停泵（按電腦上的泵按紐，其與機器上的開關(guān)效果一樣），再依次關(guān)閉柱溫箱和檢測器開關(guān)。3、用紫外檢測器的話，如果流動相含有鹽分時，在就緒狀態(tài)下，先用此流動相以原流速大量沖洗，待基線穩(wěn)定后，停泵、排空換成甲醇水（甲醇含量30%~40%）繼續(xù)以原流速大量沖洗至基線穩(wěn)定。停泵、排空再換成純甲醇溶液沖洗。停泵，再依次關(guān)閉柱溫箱和檢測器開關(guān)。（注：每次更換流動相時都要進行排空操作）四、清洗、出現(xiàn)問題與維護1、清洗泵頭后面的方法：由于泵頭后存在死角，極易

8、殘留鹽分，可用針管吸入純水或30%的甲醇水，緩慢推入，注意壓力不易過大。每天兩次，做樣之前1次，做樣后一次2、清洗進樣閥殘留物的方法：不