多西環(huán)素對乳腺癌移植瘤小鼠mmp2及timp2mrna表達(dá)的影響

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1、多西環(huán)素對乳腺癌移植瘤小鼠MMP2及TIMP2mRNA表達(dá)的影響：甘萍李艾珊聶桂麗范英昌【摘要】目的研究多西環(huán)素在小鼠乳腺癌肺轉(zhuǎn)移模型中對基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)及金屬蛋白酶組織抑制因子2(TIMP2)mRNA表達(dá)的影響。方法30只TAⅡ近交系小鼠建立肺轉(zhuǎn)移性乳腺癌BCMLTAⅡ99模型，隨機(jī)分為對照組及給藥組，每組15只，于可觸及腫物后次日，給藥組腹腔注射鹽酸多西環(huán)素0.1ml(10mg/ml)，對照組給予等量生理鹽水。7RNA表達(dá)水平。結(jié)果多西環(huán)素給藥組小鼠腫瘤生長大小及轉(zhuǎn)移率分別為(2.718±0.337)g和13

2、.3%均低于對照組〔(4.313±0.468)g，53.3%，P＜0.01，P＜0.05〕。與對照組比較，多西環(huán)素治療組MMP2mRNA為0.637±0.088，明顯低于對照組(1.035±0.097，P＜0.05)；TIMP2mRNA為0.778±0.148，明顯高于對照組(0.484±0.125，P＜0.05)。結(jié)論多西環(huán)素通過調(diào)節(jié)MMP2及TIMP2mRNA的表達(dá)水平，對小鼠乳腺癌肺轉(zhuǎn)移模型中腫瘤生長及轉(zhuǎn)移發(fā)揮抑制作用?！娟P(guān)鍵詞】多西環(huán)素；乳腺癌；基質(zhì)金屬蛋白酶2；金屬蛋白酶組織抑制因子2【Abstract】Object

3、iveTostudyeffectandmechanismofdoxycyclineonthemRNAexpressionsofmatrixmetalloproteinase(MMP)2andtissueinhibitorofmetalloproteinase(TIMP)2inbreastcanceretastasismodelmice(BCMLTAⅡ99).Methods30TAⅡ99miceofbreastcancermodelsetastasislydividedintodoxycyclinetreatmentgroupandc

4、ontrolgroup.Miceintreatmentgrouporcouldbetouched.7iceorsallpartsoftumorsRNAandTIMP2mRNAbytheRTPCR.ResultsBothtumoretastasisrateintreatmentgroupRNARNAentgroupthanthatofcontrolgroup(P＜0.05).ConclusionsDoxycyclinecaninhibittumorgroetastasisinbreastcanceretastasismodelmiceb

5、yregulatingMMP2mRNAandTIMP2mRNAexpression.【Keyetalloproteinase(MMP)2;Tissueinhibitorofmetalloproteinase(TIMP)2　　腫瘤患者的生存率與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的降解是腫瘤完成侵襲和轉(zhuǎn)移的先決條件?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)在ECM的降解中起重要作用〔1〕。MMPs活性主要由基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMPs)調(diào)節(jié)。研究表明MMPs/TIMPs調(diào)節(jié)失衡在腫瘤轉(zhuǎn)移中起決定性作用〔2〕。多西環(huán)素是一種四

6、環(huán)素類抗生素，除具有抗菌作用外，還是一種MMPs的廣譜抑制劑。本研究通過建立小鼠肺轉(zhuǎn)移性乳腺癌BCMLTAⅡ99模型，成瘤后給予多西環(huán)素處理，觀察其對MMP2和TIMP2表達(dá)的影響?！　?材料與方法　　1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物　　TAⅡ近交系雌性小鼠30只，8周齡，體重18～21g，平均20g，由天津醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物室提供。小鼠肺轉(zhuǎn)移性乳腺癌BCMLTAⅡ99模型，引自天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院研究所?！　?.2主要試劑　　Trizol(一步法)RNA提取試劑盒及RNA酶抑制劑均為Gibco公司產(chǎn)品。RTPCR試劑盒及MarkerDL2000均

7、為上海寶生物工程有限公司。ID柯達(dá)凝膠成像系統(tǒng)，Eppendorf梯度PCR儀，ABIGeneAmpPCRSystem9700。引物由北京奧科生物技術(shù)有限責(zé)任公司合成。　　1.3方法　　1.3.1建模及實(shí)驗(yàn)分組　　30只小鼠隨機(jī)分為對照組及給藥組，各15只，按照文獻(xiàn)〔3〕建模(第92代BCML瘤株傳代小鼠，頸椎脫臼法處死后，無菌條件下取癌組織，剪切成2mm3小塊，置于生理鹽水中，分別接種于30只小鼠左下腹乳腺區(qū)域)。造模后于小鼠皮下出現(xiàn)可觸及腫塊后次日開始給藥，對照組每天腹腔注射0.1ml生理鹽水，給藥組每天腹腔注射鹽酸多西環(huán)素0.1ml

8、(10mg/ml),共7×0.5cm×0.5cm，放入凍存管，迅速投入液氮罐，用以檢測MMP2和TIMP2mRNA。　　1.3.3RNA提取　　采用Trizol一步法RNA提取試劑盒提取腫