多西環(huán)素對(duì)乳腺癌移植瘤小鼠mmp2及timp2 mrna表達(dá)的影響

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1、多西環(huán)素對(duì)乳腺癌移植瘤小鼠MMP2及TIMP2mRNA表達(dá)的影響作者:甘萍李艾珊聶桂麗范英昌【摘要】目的研究多西環(huán)素在小鼠乳腺癌肺轉(zhuǎn)移模型中對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)及金屬蛋白酶組織抑制因子2(TIMP2)mRNA表達(dá)的影響。方法30只TAⅡ近交系小鼠建立肺轉(zhuǎn)移性乳腺癌BCMLTAⅡ99模型,隨機(jī)分為對(duì)照組及給藥組,每組15只,于可觸及腫物后次日,給藥組腹腔注射鹽酸多西環(huán)素0.1ml(10mg/ml),對(duì)照組給予等量生理鹽水。7RNA表達(dá)水平。結(jié)果多西環(huán)素給藥組小鼠腫瘤生長(zhǎng)大小及轉(zhuǎn)移率分別為(2.718±0.337)g和13.3%

2、均低于對(duì)照組〔(4.313±0.468)g,53.3%,P<0.01,P<0.05〕。與對(duì)照組比較,多西環(huán)素治療組MMP2mRNA為0.637±0.088,明顯低于對(duì)照組(1.035±0.097,P<0.05);TIMP2mRNA為0.778±0.148,明顯高于對(duì)照組(0.484±0.125,P<0.05)。結(jié)論多西環(huán)素通過(guò)調(diào)節(jié)MMP2及TIMP2mRNA的表達(dá)水平,對(duì)小鼠乳腺癌肺轉(zhuǎn)移模型中腫瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移發(fā)揮抑制作用?!娟P(guān)鍵詞】多西環(huán)素;乳腺癌;基質(zhì)金屬蛋白酶2;金屬蛋白酶組織抑制因子2【Abstract】ObjectiveTostu

3、dyeffectandmechanismofdoxycyclineonthemRNAexpressionsofmatrixmetalloprotEinase(MMP)2andtissueinhibitorofmetalloprotEInase(TIMP)2inbreastcanceretastasismodelmice(BCMLTAⅡ99).Methods30TAⅡ99miceofbreastcancermodelsetastasislydividedintodoxycyclinetreatmentgroupandcontrolgroup.M

4、iceintreatmentgrouporcouldbetouched.7iceorsallpartsoftumorsRNAandTIMP2mRNAbytheRTPCR.ResultsBothtumoretastasisrateintreatmentgroupRNARNAentgroupthanthatofcontrolgroup(P<0.05).ConclusionsDoxycyclinecaninhibittumorgroetastasisinbreastcanceretastasismodelmicebyregulatingMMP2mR

5、NAandTIMP2mRNAexpression.【Keyetalloproteinase(MMP)2;Tissueinhibitorofmetalloproteinase(TIMP)2  腫瘤患者的生存率與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),而細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的降解是腫瘤完成侵襲和轉(zhuǎn)移的先決條件?;|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)在ECM的降解中起重要作用〔1〕。MMPs活性主要由基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMPs)調(diào)節(jié)。研究表明MMPs/TIMPs調(diào)節(jié)失衡在腫瘤轉(zhuǎn)移中起決定性作用〔2〕。多西環(huán)素是一種四環(huán)素類(lèi)抗生素,除具有抗菌作用外,還是一種MMP

6、s的廣譜抑制劑。本研究通過(guò)建立小鼠肺轉(zhuǎn)移性乳腺癌BCMLTAⅡ99模型,成瘤后給予多西環(huán)素處理,觀察其對(duì)MMP2和TIMP2表達(dá)的影響。  1材料與方法  1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物  TAⅡ近交系雌性小鼠30只,8周齡,體重18~21g,平均20g,由天津醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物室提供。小鼠肺轉(zhuǎn)移性乳腺癌BCMLTAⅡ99模型,引自天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院研究所?! ?.2主要試劑  Trizol(一步法)RNA提取試劑盒及RNA酶抑制劑均為Gibco公司產(chǎn)品。RTPCR試劑盒及MarkerDL2000均為上海寶生物工程有限公司。ID柯達(dá)凝膠成像系統(tǒng),Eppe

7、ndorf梯度PCR儀,ABIGeneAmpPCRSystem9700。引物由北京奧科生物技術(shù)有限責(zé)任公司合成?! ?.3方法  1.3.1建模及實(shí)驗(yàn)分組  30只小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組及給藥組,各15只,按照  2結(jié)果  2.1多西環(huán)素的抑瘤及抗轉(zhuǎn)移作用  實(shí)驗(yàn)過(guò)程中給藥組小鼠一般狀況較對(duì)照組好,給藥組平均瘤重(2.718±0.337)g明顯低于對(duì)照組〔(4.313±0.468)g,P<0.01〕,給藥組肺轉(zhuǎn)移率為13.3%(2/15)低于對(duì)照組53.3%(8/15)(P<0.05)?! ?.2多西環(huán)素對(duì)MMP2及TIMP2mRNA表

8、達(dá)的影響  見(jiàn)圖1。示MMP2、TIMP2及βactin經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得片段大小分別為310、150和517bp。給

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