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1、黃芩莖葉總黃酮對Aβ引起癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響論文葉紅王瑞婷左彥珍關(guān)麗華申興斌【摘要】目的觀察黃芩莖葉總黃酮對大鼠雙側(cè)海馬注射Aβ25－35引起的學(xué)習(xí)記憶及神經(jīng)元形態(tài)的影響。方法將30只雄性ethods30maleorrisazetaskemoryonthefifteenthday,oncefor5d.Nisslstainingpusnervecells.ResultsThemodelgroupresultedinasignificantlyincreasedlatencytofindthehiddenplatform.SSFgroupresultedinasignificantlyr
2、educedlatencyasparedodelgroup.Thepathologicalchangesincludedneuronloss,nucleardisappearanceinthemodelgroup.SSFgroupshoageparedodelgroup.ConclusionSSFmaybebeneficialforimprovingthelearningandmemorydeficitinducedbyAβ25-35.Keyer'sdisease;Amyloid-betaprotein;TotalflavonoidofScutellareaBaicalensisste
3、m-leaf(SSTF)阿爾茨海默病（Alzheimer'sdisease,AD）亦稱老年性癡呆癥，是一種以進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙和記憶力損害為主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，與年齡的增長密切相關(guān)。AD的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前研究主要集中在氧自由基、炎癥因子及中樞神經(jīng)元凋亡3個(gè)方面。黃芩是我國傳統(tǒng)的中草藥，眾多研究集中在其有效成分黃酮類化合物的研究上，研究表明黃芩莖葉總黃酮具有抗炎、抗免疫、保護(hù)心肌缺血再灌注損傷、治療腦缺血等作用［1］。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠海馬內(nèi)注射淀粉樣蛋白（Aβ）致大鼠癡呆模型，采用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)觀察黃芩莖葉總黃酮（SSTF）對癡呆大鼠學(xué)習(xí)、記憶的影響。1材料1.1動物雄性
4、L±2mm，DV2.7mm定位海馬，用三棱針鉆開顱骨，暴露硬腦膜，微量注射器5min內(nèi)緩慢注入Aβ（Aβ溶于無菌生理鹽水2g/L,－20℃保存，臨用前置于37℃孵育7d成凝膠態(tài)），留針2min，緩慢撤針，肌注青霉素3d，1次/d，10萬u。2.3Morris水迷宮行為學(xué)實(shí)驗(yàn)迷宮裝置由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所提供，圓形不銹鋼水池，直徑120cm,高60cm，水池底和筒壁皆為黑色；將水池等分為4個(gè)象限；目標(biāo)象限的中央放置一直徑為10cm，高23.5cm的圓形隱藏平臺，整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間其位置保持不變；水池中水面高于平臺1.5cm，水溫（21±1）℃；水池周圍安裝環(huán)形布簾，實(shí)驗(yàn)期間迷宮周圍參照物不
5、變，迷宮上方安置攝像機(jī)，同步記錄大鼠運(yùn)動軌跡。實(shí)驗(yàn)前動物自由游泳2min，如果大鼠找不到平臺，將大鼠放在平臺20s,每天將大鼠從4個(gè)象限點(diǎn)面向池壁各測驗(yàn)兩次，記錄動物尋找并爬上平臺所需時(shí)間，如果動物在60s內(nèi)未找到平臺，由實(shí)驗(yàn)者將其引至平臺，潛伏期記為60s。第1～2天為訓(xùn)練，后3d數(shù)據(jù)作為學(xué)習(xí)、記憶成績。2.4取材、固定、切片、染色動物麻醉后，經(jīng)左心室快速灌注250ml的生理鹽水，然后灌注含4％多聚甲醛的PB液250ml(先快后慢)進(jìn)行固定，1h后取腦，后固定過夜，脫水，石蠟包埋，行冠狀切片，片厚5μm，切片取含海馬部位，用硫堇作Nissl染色。2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s，用SS
6、PS12.0軟件進(jìn)行單因素方差分析。3結(jié)果3.1Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M的逃避潛伏期較空白對照組明顯延長（P0.05）,藥物組與模型組相比明顯縮短（P0.05）。表1各組大鼠在隱藏平臺的平均逃避潛伏期與對照組比較，aP0.05；與模型組比較，bP0.05；n=103.2海馬的Nissl染色模型組海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞帶脫失，不完整，核邊聚，部分錐體細(xì)胞出現(xiàn)空泡樣變性，注射針道附近可見膠質(zhì)細(xì)胞明顯增生?？瞻讓φ战M細(xì)胞帶完整，排列有序，未見明顯的細(xì)胞增生，給藥組錐體細(xì)胞損傷較小，膠質(zhì)細(xì)胞增生不明顯。4討論阿爾茨海默病（Alzheimer'sdisease,.freelbranoA,Ott
7、hC,MujicaL,etal.Interleukin-3preventsneuronaldeathinducedbyamyloidpeptide［J］.BMCNeurosci，2007,8:82.［3］RodrigoMedeiros,RuiD.S.Prediger,GiselleF,etal.ConnectingTNF-αsignalingpathousemodelofAlzheimer'sdisease:Relevanceforthebeh
