sod活性測定pod活性測定cat活性測定質膜透性測定mda含量測定色素含量測定實驗方案及數(shù)據(jù)記錄表格

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1、SOD活性測定POD活性測定CAT活性測定質膜透性測定MDA含量測定色素含量測定實驗方案SOD活性測定POD活性測定CAT活性測定質膜透性測定MDA含量測定色素含量測定實驗方案一、細胞質膜透性的測定(電導法)材料、儀器設備1.材料:植物葉片,每個樣本1cm2的小葉片1g。2.儀器藥品:洗潔精;電導儀;電子天平;冰箱;真空泵;真空干燥器;恒溫培養(yǎng)箱;電爐;50ml燒杯;50ml量筒;小鑷子;紗布;表皿;濾紙條;鏡頭紙;剪刀;玻棒;膠頭滴管;瓷盤。實驗步驟1.清洗用具所用玻璃用具均需先用洗潔精清洗,然后用自來水洗3次,再用蒸餾水洗3次,然后放入或倒置在洗凈的且墊有潔凈濾紙的器皿中干燥后備用。2.實

2、驗材料的準備及處理選取葉齡葉位長勢均相似的植物葉片,剪下后用濕布包住放在已經(jīng)編號的保鮮袋中,最后用保鮮盒封存帶回。實驗前用自來水沖洗葉片,除去表面沾污物,再用蒸餾水沖洗2次,用潔凈濾紙輕輕吸干葉片表面水分放于已編號的潔凈器皿中,然后分別剪成約1cm2的小葉片(或用直徑為1cm2的打孔器鉆取小圓片),注意除掉大葉脈。將剪下的小葉片分別混合均勻,每個樣本再快速稱取鮮樣2份,每份0.5g,分別放入編號為X-n-a、X-n-b的50ml燒杯中,另取編號C的燒杯,不加鮮樣留作空白本底對照。每個樣本的三個燒杯中均加入蒸餾水30ml浸泡,將盛有鮮樣的a、b燒杯放入真空干燥器中,用真空泵抽氣25min(以抽出

3、細胞間隙中的空氣),然后緩緩放入空氣,從真空干燥器中取出a、b燒杯,a、C杯繼續(xù)常溫浸泡,b杯稱重,蓋上表皿,置于電爐上煮沸15min,冷卻后再稱重并加蒸餾水至原重量,繼續(xù)室溫自然浸泡45min即可測定。各樣本處理時浸泡時間和處理溫度要保持一致,均保持在室溫下。(注:自然浸泡需要4~5h以上,為防止樣品表面氣泡的影響故用真空干燥管去除氣泡,也可以在振蕩器上浸泡1~2h。)3.測定電導值在測定前先將各杯浸泡液搖勻,測出各杯樣本浸出液電導率值,記錄到原始數(shù)據(jù)表上相應欄中。(注意:每測定完一個樣液后,用蒸餾水漂洗電極,再用濾紙將電極擦干,然后進行下一個樣液的測定)原始數(shù)據(jù)表樣表如下:電導率測定記錄表

4、:備注:時間:______年___月___日________________實驗地點:_____________________________實驗者:__________________記錄者:___________________核對者:________________10/10SOD活性測定POD活性測定CAT活性測定質膜透性測定MDA含量測定色素含量測定實驗方案樣本編號處理電導率值(μS·cm-1)相對外滲率(%)空白對照C管(常溫蒸餾水空白)___—___(第X組第n個重復)a管(常溫)b管(煮沸)___—___a管(常溫)b管(煮沸)___—___a管(常溫)b管(煮沸)4、結果計

5、算按下公式計算低溫及常溫處理電解質的相對外滲率:電解質的相對外滲率(%)=×100%二、葉綠素含量的測定(丙酮提取法)材料、儀器設備1.材料:植物葉片,每個樣本0.5g。2.儀器藥品:分光光度計、電子頂載天平(感量0.01g)、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、擦境紙、滴管;95%乙醇(或80%丙酮)、石英砂、碳酸鈣粉。實驗步驟1.實驗材料的準備及處理分別取新鮮潔凈葉片,去除中脈剪碎。各稱取剪碎的新鮮樣品0.5g,放入潔凈的研缽中(研完一個樣本需將研缽洗凈烘干才可研下一個樣本),加少量石英砂和碳酸鈣粉及2mL95%乙醇研成均漿,再加乙醇5mL,繼續(xù)研磨至組織變白,靜置3~5min。取

6、濾紙1張置于漏斗中,用乙醇濕潤,沿玻棒把各樣本提取液倒入漏斗(用漏斗過濾完一個樣本需將漏斗洗凈烘干才可過濾下一個樣本),濾液流至25mL已編號的棕色容量瓶中;用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數(shù)次,最后連同殘渣一起倒入漏斗中。用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中,直至濾紙和殘渣中無綠色為止。最后用乙醇定容至25mL,搖勻。2.測定樣本吸光度10/10SOD活性測定POD活性測定CAT活性測定質膜透性測定MDA含量測定色素含量測定實驗方案以95%乙醇為空白對照來調(diào)零,對各樣本葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm和652nm下測定吸光度,記入原始數(shù)據(jù)記錄表中。樣表如下:備注:時

7、間:______年___月___日________________實驗地點:_____________________________實驗者:__________________記錄者:___________________核對者:________________Cary:WaveLength(nm):645nm、652nm、665nmAveTime(sec):0.1Replicates:3樣本總

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