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《蜂膠提取物對(duì)禽流感h9亞型shandongchicken98株的滅活作用效果研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、2004學(xué)術(shù)年會(huì)蜂膠提取物對(duì)禽流感H9亞型Shandong／chicken／98株的滅活作用效果研究沈志強(qiáng)，王艷，李峰，劉吉山，吳信明，趙蕾，苗立中山東省畜禽用蜂膠疫苗研究開(kāi)發(fā)推廣中o，山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究所濱州256600摘要：本文通過(guò)雞胚接種的方法就蜂膠乙醇浸出物對(duì)禽流感H9亞型Shandong／chicken／98株的滅活作用進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，常溫下3分鐘、30分鐘，37℃3分鐘、30分鐘，含蜂膠乙醇浸出物0．1mg／ml的95％乙醇稀釋液，含蜂膠乙醇浸出物2．5mg／ml的475％乙醇稀釋液，含蜂膠乙醇浸出物10mg／ml的生理鹽水稀釋液，接種雞胚后病毒HA測(cè)定為0
2、。這充分說(shuō)明以上濃度蜂膠乙醇浸出物對(duì)禽流感H9亞型Shandong／chicken／98株具有完全的滅活作用。37。C3分鐘、30分鐘，含蜂膠乙醇浸出物01．mg／ml的47．5％乙醇稀釋液，含蜂膠乙醇浸出物6．25mg／ml的生理鹽水稀釋液對(duì)禽流感H9株有部分滅活作用。關(guān)鍵詞：蜂膠；禽流感；H9亞型；滅活作用蜂膠(Propolis)是蜜蜂從植物的樹(shù)芽、樹(shù)皮等部位采集的樹(shù)脂，再混以蜜蜂舌腺，蠟腺等腺體的分泌物，經(jīng)蜜蜂加工轉(zhuǎn)化而成的一種膠狀物質(zhì)。蜂膠內(nèi)含有多種酸類、醇類、酚類、酮類、醚類、酯類、烯烴和萜類化合物以及20多種黃酮類化合物，還有多種氨基酸、酶和多糖、脂肪酸以及vA、vB
3、、v，等多種維生素。蜂膠中有效成分之復(fù)雜，使其成為一種具有廣譜生物學(xué)活性的天然物質(zhì)，可以提高機(jī)體的免疫功能，具有抗病菌、霉菌、病毒與原蟲(chóng)等作用。本文通過(guò)雞胚接種的方法就蜂膠乙醇浸出物對(duì)禽流感H9株的滅活作用進(jìn)行了試驗(yàn)觀察。1材料與方法1．1試驗(yàn)材料天然蜂膠由山東某蜜蜂養(yǎng)殖場(chǎng)提供，試驗(yàn)毒株禽流感H9皿型Shandong／chicken／98株(ELD50為10‘77／0．1m1)由本所傳代保存，10日齡雞胚由山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究所畜禽良種試驗(yàn)基地提供，95％乙醇購(gòu)自山東某酒廠，生理鹽水由本所按常規(guī)配制，l％紅細(xì)胞由本所按常規(guī)配置。1．2試驗(yàn)方法1．2．1蜂膠乙醇浸出物的提取按沈志
4、強(qiáng)方法進(jìn)行。1．2．2蜂膠乙醇浸出物對(duì)禽流感H9亞型Shandong／chicken／98株的滅活作用將蜂膠乙醇浸出物分別用95％乙醇、47．5％乙醇與生理鹽水稀釋，使蜂膠含量(mg／m1)分別為25、12．5、10、6．25、5、2．5、1、0．1。將禽流感H9亞型Shandong／chickerd98株(ELD50為10“7／0．tmt)用生理鹽水做1000倍稀釋，即病毒含量為10～ELD50分別與上述含蜂膠乙醇浸出物稀釋液等量混合，根據(jù)作用溫度不同分為兩個(gè)試驗(yàn)組，一組常溫下分別作用3分鐘、30分鐘，另一組37。C分別作用3分鐘、30分鐘。然后各接種10枚lO日齡健康雞胚，接
5、種量為0．2ml／枚。另分別取95％乙醇、47．5％乙醇、生理鹽水與10一ELD50的禽流感亞型Shandong／chicken／98H9株病毒液等量混勻，連同10～ELD50的禽流感H9亞型Shandong／chicken／98株病毒液作為對(duì)照組，各接種lo枚10日齡健康雞胚，接種量為0．21111／枚。將上述接種后的雞胚置孵化器中孵化。2004學(xué)術(shù)年會(huì)1．2．3HA測(cè)定將24小時(shí)內(nèi)死亡的雞胚棄去，48小時(shí)后死亡的雞胚連同孵化至96小時(shí)的活胚按試驗(yàn)組別，分別收取各稀釋度全部雞胚尿囊液，B微量法測(cè)定其HA。1．2．4切胚體觀察分別取生理鹽水、12．5％蜂膠乙醇浸出物接種l0日齡健
6、康雞胚各l0枚，接種量為o2ml／枚。將接種后的雞胚置孵化器內(nèi)孵化96小時(shí)，觀察胚體變化。2結(jié)果2．1HA鋇0定B微量法測(cè)定試驗(yàn)各組別雞胚尿囊液HA，具體結(jié)果見(jiàn)表一，同時(shí)測(cè)定對(duì)照組各組別雞胚尿囊液HA，具體結(jié)果見(jiàn)表二。2．2胚體觀察分別取接種生理鹽水、12．5％蜂膠乙醇浸出物雞胚胚體觀察，兩者均生長(zhǎng)良好，無(wú)任何差異性變化。表1試驗(yàn)各組別HA測(cè)定結(jié)果(xL092)蜂膠乙醇浸出物濃度(m∥m1)組別2512．510625525l0l3A0O分BO0O010常溫鐘C01011ll1l30AO0O分B0O0O010鐘CO1011ll3AO0O分BO0O046鐘CO081037℃30A0O
7、0O分B046鐘C0810表2對(duì)照各組別HA測(cè)定結(jié)果(xL092)組別95％乙醇+種毒47．5％乙醇+種毒生理鹽水+種毒種毒稀釋液常溫3分鐘111l30分鐘101137℃3分鐘61030分鐘610說(shuō)明：“A”組以95％乙醇為稀釋劑，?B組以47．5％L醇為稀釋劑，?C’組以生理鹽水為稀釋劑3小結(jié)與討論3．1試驗(yàn)結(jié)果表明，常溫下3分鐘、30分鐘，37℃3分鐘、30分鐘，含蜂膠乙醇浸出物olmg／ml的95％乙醇稀釋液，含蜂膠乙醇浸出物2．5m∥ml的475乙醇稀釋液，含蜂膠乙醇浸出
