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《赤芍與白芍藥材高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜方法學(xué)研究 》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、赤芍與白芍藥材高效毛細(xì)管電泳指紋圖譜方法學(xué)研究王磊磊,陳軍輝,王虹,殷月芬,王小如,楊東方【摘要】目的確定赤芍和白芍的高效毛細(xì)管電泳分析方法,建立赤芍和白芍的高效毛細(xì)管電泳法(HPCE)指紋圖譜。方法HPCE工作條件:采用未涂層熔融石英毛細(xì)管(內(nèi)徑75μm,有效長度50cm),分離電壓為25kV,柱溫25℃,二極管陣列檢測器(DAD)檢測波長為220nm,緩沖液為30mmol/L硼砂(pH=9.0)溶液。按此條件對來自不同產(chǎn)地的7種赤芍樣品和8種白芍樣品進(jìn)行了分析。結(jié)果建立了赤芍和白芍HPCE指紋圖譜,采用中藥指紋圖譜
2、相似度計算軟件,以系統(tǒng)生成的對照指紋圖譜為對照模板對不同樣品的圖譜進(jìn)行相似度計算。結(jié)論該方法簡捷、有效,可以用于赤芍和白芍藥材的質(zhì)量控制?!娟P(guān)鍵詞】赤芍;白芍;高效毛細(xì)管電泳法;指紋圖譜Abstract:ObjectiveTosetupamodernHighPerformanceCapillaryElectrophoresisanalysismethodforseparatinganddetectingRadixpaeoniaeAlbaandRadixpaeoniaeRubraandestablishtheirfing
3、erprints.MethodsSevensamplesofRadixpaeoniaeAlbaandeightsamplesofRadixpaeoniaeRubra×75μmi.d.),30mmol/Lborate(pH=9.0)asbuffer,therunvoltageis+25kV,detection,andcolumntemperatureof25℃.ResultsThefingerprintsedandparedbythesoftilarityevaluationsystemforchromatographi
4、cfingerprint.ConclusionTheresultsshoethodofHPCEfingerprintisreliableandaccuratetocontrolthequalityoftedicines.KeyanceCapillaryElectrophoresis;Fingerprint赤芍為毛茛科芍藥PaeonialactifloraPall.或川赤芍PaeoniaveitchiiLynch.直接使用的干燥根,其味苦,微寒,歸肝經(jīng),具有清熱涼血、散瘀止痛之功能。白芍為毛莨科芍藥Paeonialact
5、tifloraPal1.水煮去皮后使用的干燥根,其味苦、酸,微寒,歸肝、脾經(jīng),具有平肝止痛、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗之功能〔1〕。兩種藥材中均含有芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷等單萜苷類和苯甲酸、沒食子酸等酸類成分〔2,3〕,其中總苷類物質(zhì)為藥材的主要活性成分〔4〕,因此2005版《中國藥典》規(guī)定芍藥苷的含量作為赤芍和白芍的質(zhì)控指標(biāo)。但是赤芍和白芍的療效和在臨床使用上有很大不同,僅使用單一成分作為指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量控制,不能全面反映藥材的有效成分,難以真正全面地控制藥材的內(nèi)在質(zhì)量。中藥指紋圖譜是指中藥材經(jīng)適當(dāng)處理后,采用一定的分
6、析手段,得到的能夠標(biāo)示該中藥材及其制劑的各組分群體特性的共有峰的圖譜〔5〕。色譜指紋圖譜是通過把復(fù)雜的化學(xué)成分進(jìn)行分離,形成高低不同的峰,組成一張色譜圖,整個色譜圖表達(dá)了該樣品所含化學(xué)成分的多少和量的大小,不僅可用于已知成分的分析,還可以用于未知成分的分析〔6〕。因此指紋圖譜目前被國際上公認(rèn)為是植物藥和中草藥質(zhì)量控制最有效的工具之一〔7〕,如《美國草藥典》(AHP)為五味子、甘草等熱點植物藥確定了比較穩(wěn)定可靠的TLC、HPLC分析結(jié)果和指紋圖譜,為該類藥材的生產(chǎn)和應(yīng)用提供依據(jù)〔8〕。近年來,將色譜指紋圖譜的方法用于赤芍
7、和白芍研究的相關(guān)文獻(xiàn)也不斷出現(xiàn),但這些文獻(xiàn)多利用高效液相色譜法(HPLC)進(jìn)行研究〔9~12〕,如王巧等〔10〕利用HPLC分析了三十多種赤芍和白芍藥材的醇提物,建立了白芍與赤芍的HPLC指紋圖譜分析方法。但用HPLC進(jìn)行中藥成分分析,運行成本較高、分析時間長,而且常遇到一些問題,例如色譜柱易受污染,并且對于含極性成分較多的中藥,其“指紋”的特征性不強(qiáng)。相比而言,高效毛細(xì)管電泳法(HPCE)分析中藥則有獨特的優(yōu)勢,具有柱效高、快速、進(jìn)樣體積小,水溶性樣品的“指紋”特征性強(qiáng),前處理簡單,而且分析運行成本低〔13,14〕的
8、優(yōu)點。關(guān)于赤芍或白芍HPCE指紋圖譜的研究未見報道,所以本文對赤芍和白芍藥材的HPCE指紋圖譜進(jìn)行了探索性研究,以期為有效控制赤芍和白芍藥材質(zhì)量提供新的方法。1儀器與試劑G1062A型HPCE儀(美國Agilent公司),配有二極管陣列檢測器(DAD);未涂層熔融石英毛細(xì)管(美國Agilent公司),內(nèi)徑75μm,有效長度50cm