赤芍與白芍藥材高效毛細管電泳指紋圖譜方法學研究

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1、赤芍與白芍藥材高效毛細管電泳指紋圖譜方法學研究王磊磊,陳軍輝,王虹,殷月芬,王小如,楊東方【摘要】目的確定赤芍和白芍的高效毛細管電泳分析方法,建立赤芍和白芍的高效毛細管電泳法(HPCE)指紋圖譜。方法HPCE工作條件:采用未涂層熔融石英毛細管(內(nèi)徑75μm,有效長度50cm),分離電壓為25kV,柱溫25℃,二極管陣列檢測器(DAD)檢測波長為220nm,緩沖液為30mmol/L硼砂(pH=9.0)溶液。按此條件對來自不同產(chǎn)地的7種赤芍樣品和8種白芍樣品進行了分析。結果建立了赤芍和白芍HPCE指紋圖譜,采用中藥指紋圖譜

2、相似度計算軟件,以系統(tǒng)生成的對照指紋圖譜為對照模板對不同樣品的圖譜進行相似度計算。結論該方法簡捷、有效,可以用于赤芍和白芍藥材的質(zhì)量控制?!娟P鍵詞】赤芍;白芍;高效毛細管電泳法;指紋圖譜Abstract:ObjectiveTosetupamodernHighPerformanceCapillaryElectrophoresisanalysismethodforseparatinganddetectingRadixpaeoniaeAlbaandRadixpaeoniaeRubraandestablishtheirfing

3、erprints.MethodsSevensamplesofRadixpaeoniaeAlbaandeightsamplesofRadixpaeoniaeRubra×75μmi.d.),30mmol/Lborate(pH=9.0)asbuffer,therunvoltageis+25kV,detection,andcolumntemperatureof25℃.ResultsThefingerprintsedandparedbythesoftilarityevaluationsystemforchromatographi

4、cfingerprint.ConclusionTheresultsshoethodofHPCEfingerprintisreliableandaccuratetocontrolthequalityoftedicines.KeyanceCapillaryElectrophoresis;Fingerprint赤芍為毛茛科芍藥PaeonialactifloraPall.或川赤芍PaeoniaveitchiiLynch.直接使用的干燥根,其味苦,微寒,歸肝經(jīng),具有清熱涼血、散瘀止痛之功能。白芍為毛莨科芍藥Paeonialact

5、tifloraPal1.水煮去皮后使用的干燥根,其味苦、酸,微寒,歸肝、脾經(jīng),具有平肝止痛、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)、斂陰止汗之功能〔1〕。兩種藥材中均含有芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷等單萜苷類和苯甲酸、沒食子酸等酸類成分〔2,3〕,其中總苷類物質(zhì)為藥材的主要活性成分〔4〕,因此2005版《中國藥典》規(guī)定芍藥苷的含量作為赤芍和白芍的質(zhì)控指標。但是赤芍和白芍的療效和在臨床使用上有很大不同,僅使用單一成分作為指標進行質(zhì)量控制,不能全面反映藥材的有效成分,難以真正全面地控制藥材的內(nèi)在質(zhì)量。中藥指紋圖譜是指中藥材經(jīng)適當處理后,采用一定的分

6、析手段,得到的能夠標示該中藥材及其制劑的各組分群體特性的共有峰的圖譜〔5〕。色譜指紋圖譜是通過把復雜的化學成分進行分離,形成高低不同的峰,組成一張色譜圖,整個色譜圖表達了該樣品所含化學成分的多少和量的大小,不僅可用于已知成分的分析,還可以用于未知成分的分析〔6〕。因此指紋圖譜目前被國際上公認為是植物藥和中草藥質(zhì)量控制最有效的工具之一〔7〕,如《美國草藥典》(AHP)為五味子、甘草等熱點植物藥確定了比較穩(wěn)定可靠的TLC、HPLC分析結果和指紋圖譜,為該類藥材的生產(chǎn)和應用提供依據(jù)〔8〕。近年來,將色譜指紋圖譜的方法用于赤芍

7、和白芍研究的相關文獻也不斷出現(xiàn),但這些文獻多利用高效液相色譜法(HPLC)進行研究〔9~12〕,如王巧等〔10〕利用HPLC分析了三十多種赤芍和白芍藥材的醇提物,建立了白芍與赤芍的HPLC指紋圖譜分析方法。但用HPLC進行中藥成分分析,運行成本較高、分析時間長,而且常遇到一些問題,例如色譜柱易受污染,并且對于含極性成分較多的中藥,其“指紋”的特征性不強。相比而言,高效毛細管電泳法(HPCE)分析中藥則有獨特的優(yōu)勢,具有柱效高、快速、進樣體積小,水溶性樣品的“指紋”特征性強,前處理簡單,而且分析運行成本低〔13,14〕的

8、優(yōu)點。關于赤芍或白芍HPCE指紋圖譜的研究未見報道,所以本文對赤芍和白芍藥材的HPCE指紋圖譜進行了探索性研究,以期為有效控制赤芍和白芍藥材質(zhì)量提供新的方法。1儀器與試劑G1062A型HPCE儀(美國Agilent公司),配有二極管陣列檢測器(DAD);未涂層熔融石英毛細管(美國Agilent公司),內(nèi)徑75μm,有效長度50cm

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