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《馬齒莧提取物對肝癌細(xì)胞hepg》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、馬齒莧提取物對肝癌細(xì)胞HepG作者：崔香淑，金元哲，張學(xué)武【摘要】目的觀察馬齒莧提取物對肝癌HepG-2的抑制作用。方法采用MTT比色法觀察馬齒莧提取物抑制肝癌HepG-2細(xì)胞增殖；采用流式細(xì)胞儀檢測馬齒莧對HepG-2細(xì)胞周期分布的影響。結(jié)果馬齒莧提取物可抑制肝癌HepG-2細(xì)胞增殖，其作用具有時間和濃度依賴性；可改變細(xì)胞周期分布，多數(shù)細(xì)胞阻滯于S期，與對照組比較，細(xì)胞凋亡率差異有顯著性(P<0.01)。結(jié)論馬齒莧提取物可誘導(dǎo)肝癌HepG-2細(xì)胞凋亡，改變細(xì)胞周期分布，從而抑制細(xì)胞增殖。【關(guān)鍵詞】馬齒莧；細(xì)胞周期；細(xì)胞凋亡 Inhibit
2、oryEffectsofPortulacaoleraceaL.onHepatocellularCarcinomaHepG-2Cells Abstract：ObjectiveToinvestigatetheinhibitionofPortulacaoleraceaL.onproliferationhepatomaHepG-2cells.MethodsMTTassayinetheeffectofPortulacaoleraceaL.ontheproliferationofHepG-2cellandfloetrye-concentrationdepen
3、dentmanner.PortulacaoleraceaL.alsoinducedapoptosis,theSphasecontrolgroup.ConclusionPortulacaoleraceaL.inhibitsproliferationofHepG-2cellsviainductionofapoptosisandcellcyclearrest. Keya公司；RPMI1640培養(yǎng)基購自美國GIBCO公司；小牛血清購自北京華美生物工程公司；胰蛋白酶購自美國DIFCO公司?！ ?.1.3儀器OLYMPUS倒置顯微鏡購自日本；RT-2100型
4、酶標(biāo)儀購自美國；FACSCalibur流式細(xì)胞儀購自美國；JEM-1200EX透射電子顯微鏡購自日本；PD-2000真彩色病理細(xì)胞圖像分析儀購自北京天地百年科技公司?！ ?.2方法 1.2.1HepG-2細(xì)胞培養(yǎng)肝癌HepG-2細(xì)胞貼壁生長，培養(yǎng)于含10%滅活小牛血清，含100U/ml青霉素及100U/ml鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)液中，置37℃，相對濕度為90%、5%的CO2孵箱內(nèi)培養(yǎng)。 1.2.2MTT比色實(shí)驗(yàn)取對數(shù)生長期的HepG-2細(xì)胞按每孔1×105個細(xì)胞接種于96孔板中，每孔體積200μl。24h后換液，馬齒莧組加入馬齒莧提取物使
5、其終濃度分別為50，100和200μg/ml，另設(shè)終濃度為25μg/ml的5-Fu陽性對照組和不加藥物的陰性對照組以及不接種細(xì)胞的空白對照組。分別培養(yǎng)24，48h，每個濃度每個時點(diǎn)均設(shè)4個復(fù)孔。于終止前4h，每孔加入5mg/mlMTT溶液20μl，繼續(xù)孵育4h后棄去上清液，加入150μlDMSO，輕輕振蕩10min，使結(jié)晶物完全溶解，于490nm波長處在熒光酶聯(lián)分析儀上測光吸收值(A值)，計(jì)算抑制率(IR)。IR(%)=(對照孔A值一實(shí)驗(yàn)孔A值)/對照孔A值×100% 1.2.3流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期分布對照組和100μg/ml馬齒莧組
6、細(xì)胞培養(yǎng)48h后，收集各組細(xì)胞懸液1ml，濃度約為106個/ml，離心（1000r/min,5min），棄掉培養(yǎng)液，70%冷乙醇固定，4℃PI暗染30min，流式細(xì)胞儀檢測，采用ModfitLT3.0軟件對各組樣本進(jìn)行DNA含量及細(xì)胞周期分析?！ ?.3統(tǒng)計(jì)方法應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行相關(guān)性分析和方差分析，數(shù)據(jù)采用±s表示?！ ?結(jié)果 2.1對HepG-2細(xì)胞生長的影響 2.1.1細(xì)胞生長形態(tài)變化對照組HepG-2細(xì)胞呈上皮型貼壁生長，細(xì)胞呈延展、扁平，細(xì)胞均質(zhì)而透明，細(xì)胞一般有2～4個核仁，核膜、核仁輪廓明顯，細(xì)胞間結(jié)構(gòu)緊密，細(xì)胞生長
7、旺盛。馬齒莧組、陽性對照組細(xì)胞輪廓增強(qiáng)、反差增大，變圓浮起，細(xì)胞間接觸變松，增殖減慢，胞質(zhì)中顆粒增多；HE染色染色質(zhì)濃縮，呈深染的新月體形，可見凋亡小體?！ ?.1.2MTT比色實(shí)驗(yàn)不同濃度處理組分別培養(yǎng)24，48h，馬齒莧提取物對HepG-2細(xì)胞生長有抑制作用，且其抑制作用具有時間和濃度依賴性。隨著時間的延長和藥物濃度的增加，細(xì)胞抑制效果越明顯，藥物對腫瘤細(xì)胞生長有量效、時效關(guān)系。當(dāng)馬齒莧濃度為100μg/ml作用時間為48h時，對HepG-2細(xì)胞的抑制率為47.58%，接近半數(shù)抑制濃度(IC50)。結(jié)果見表1。表1馬齒莧提取物體外對HepG
8、-2細(xì)胞的抑制作用（略） 2.2對細(xì)胞周期分布的影響 100μg/ml馬齒莧提取物處理HepG-2細(xì)胞48h后，在G0
