大孔吸附樹脂純化貫葉連翹總黃酮工藝研究論文

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1、大孔吸附樹脂純化貫葉連翹總黃酮工藝研究論文【摘要】目的研究大孔吸附樹脂分離和純化貫葉連翹總黃酮的工藝條件。方法以總黃酮的吸附量和解吸率為考察指標(biāo)，對4種不同類型的樹脂進(jìn)行評價(jià)。結(jié)果AB8型大孔吸附樹脂對貫葉連翹中總黃酮具有較好的分離能力。結(jié)論采用本法分離純化貫葉連翹總黃酮簡單可行?！娟P(guān)鍵詞】貫葉連翹；總黃酮；大孔吸附樹脂；純化【Abstract】ObjectiveToobtaintheoptimalconditionsforseparatingtheflavonoidsfromtheextractofHypericumperforactumL.byselectingappropriatem

2、acroporousabsorptionresins..MethodsSeparatingefficiencyoffourtypesofmacroporousabsorptioneasuringtheabsorptionratioandelutingratioofflavonoids.ResultsTheAB8macroporousabsorptionresinhadbetterseparatingefficiency.ConclusionThismethodissimple,feasibleandsuitableforindustryproduction.【KeyperforactumL

3、.；flavonoids；macroporousabsorptionresin;purification貫葉連翹（Hypericumperforatum）屬金絲桃屬藤黃科多年生草本植物，全草可入藥。這種野生植物的全草或帶根全草有藥用價(jià)值。貫葉連翹具有清熱解毒、收斂止血、利濕等功效，主要用于止血、抗炎、治療婦科病等。目前，用貫葉連翹提取物制成的制劑已在歐美大量上市，用于治療抑郁癥、甲型和乙型肝炎及艾滋病等。此外，還有文獻(xiàn)報(bào)道其有抗腫瘤活性。貫葉連翹含有多種具有生物活性的化學(xué)成分，不同成分具有不同的藥用價(jià)值.freell分別置25ml容量瓶中,其余操作均同標(biāo)準(zhǔn)曲線制備，在紫外可見光分光光度計(jì)下

4、400～700nm處掃描，標(biāo)準(zhǔn)品最大吸收波長511.3nm，樣品液最大吸收波長為510.5nm，綜合上述實(shí)驗(yàn)擬定510nm為檢測波長。2.1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密量取在120℃干燥至恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品12.5mg置25ml量瓶中，加一定濃度的甲醇適量，超聲30min使溶解，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，準(zhǔn)確吸取20ml置于25ml容量瓶中，加水至刻度，即得0.4mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。精密量取上述蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液0ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml分別于7支50ml容量瓶中，編號，各加水至6ml，加入1ml5%亞硝酸鈉溶液，搖勻，靜置6min，加入1ml10%Al(NO3)3溶

5、液，搖勻，放置6min，后加入4.3%的NaOH溶液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15min，以0號容量瓶為空白試劑，照紫外可見分光光度法（《中國藥典》2005年版一部附錄VA），在波長510nm處測定吸光度（結(jié)果見表1）。表1各樣品液吸光度表以吸光度A和濃度C進(jìn)行回歸，得線性回歸方程為：C=0.0930A+0.0002，r=0.99983，線性范圍0.008mg/ml～0.048mg/ml.2.2樣品溶液的制備藥材的取樣：因?yàn)樨炄~連翹是全草入藥，且在各個(gè)部位的總黃酮的含量不一致，為使取樣均一性且保證其全草入藥，故將其分為枝和葉兩部分分別粉碎干燥，混勻后稱取，以消除取樣帶來的誤差。貫葉

6、連翹中黃酮的提取：選用4種方法提取貫葉連翹中的黃酮，分別是：乙醇回流提取法、堿液提取法、超聲提取法、滲漉法。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果得堿提效果最佳，后進(jìn)行堿提提取條件的考察，包括堿水量、提取次數(shù)、堿水濃度、提取時(shí)間，從而確定最佳提取工藝，得到黃酮的提取液。2.3靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)2.3.1樹脂預(yù)處理樹脂先用乙醇充分溶脹，然后用乙醇洗至流出液加適量水無白色渾濁現(xiàn)象，再用去離子水洗盡乙醇至無味即可。2.3.2樹脂的篩選吸附率的測定：精密稱取處理好的樹脂2g，分別置120ml磨口三角瓶中，將樣品液（樣品原液濃度0.07646mg/ml，吸光度0.820）過濾，分別精密加樣品液50ml，靜置24h，充分吸附后，取上層液

7、，過濾，先吸取濾液0.1ml，測得吸光度為0.013，因吸光度在0.3～0.7之間穩(wěn)定性較好，故初選設(shè)定各吸取1ml，測得吸光度（結(jié)果見表2）。表2各樹脂吸光度表吸附率s=（PoPa）/Po.式中：Po為樣品溶液中總黃酮的初始濃度（mg/ml），Pa為吸附平衡后溶液中總黃酮濃度（mg/ml），由此得到各樹脂的吸附率（結(jié)果見表3）。表3各型號樹脂吸附率由吸附率可得，相同條件下AB8吸附最高。洗脫率的測定：濾