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《大孔吸附樹脂純化貫葉連翹總黃酮工藝研究.doc》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、ectiveToobtaintheorseparatingtheflavctofHypericumperfogappropriatemacropins..MethodsSeparaurtypesofmacroporoaluatedbymeasuringandelutingratiooffheAB8macroporousaetterseparatingeff,feasibleandsuitab大孔吸附樹脂純化貫葉連翹總黃酮工藝研究【摘要】目的研究大孔吸附樹脂分離和純化貫葉連翹總黃酮的工藝條件。方法以總黃酮的吸附量和解吸率為考察指標,對4種不同類型的樹脂進行評價
2、。結果AB8型大孔吸附樹脂對貫葉連翹中總黃酮具有較好的分離能力。結論采用本法分離純化貫葉連翹總黃酮簡單可行。【關鍵詞】貫葉連翹;總黃酮;大孔吸附樹脂;純化【Abstract】ObjptimalconditionsfoonoidsfromtheextraractumL.byselectinorousabsorptionrestingefficiencyoffousabsorptionwereevtheabsorptionratiolavonoids.ResultsTbsorptionresinhadbiciency.ConclusionThismethodis
3、simpleleforindustryproduction.[Keywords]HypericumperforactumL.;flavonoids;macroporousabsorptionresin;purification貫葉連翹屬金絲桃屬藤黃科多年生草本植物,全草可入藥。這種野生植物的全草或帶根全草有藥用價值。貫葉連翹具有清熱解毒、收斂止血、利濕等功效,主要用于止血、抗炎、治療婦科病等。目前,用貫葉連翹提取物制成的制劑已在歐美大量上市,用于治療抑郁癥、甲型和乙型肝炎及艾滋病等。此外,還有文獻報道其有抗腫瘤活性。貫葉連翹含有多種具有生物活性的化學成分,不
4、同成分具有不同的藥用價值,成分相互之間發(fā)揮協(xié)同作用從而用于不同疾病的治療。因此,分離純化貫葉連翹總黃酮具有重要意義。大孔樹脂物理化學穩(wěn)定性高、比表面積大、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、使用周期長,現(xiàn)已廣泛應用于天然產物的分離和富集。但大孔吸附樹脂型號很多,性能用途各異,因此本文特選了四種不同型號的大孔樹脂,從中篩選出分離純化效果最好的樹脂種類。1試藥貫葉連翹;AB8、D101、NKA、D4020大孔吸附樹脂,其余試劑均為分析純。2方法與結果總黃酮含量的測定最大吸收波長的選擇精密量取標準品溶液各lml分別置25ml容量瓶中,其余
5、操作均同標準曲線制備,在紫外可見光分光光度計下400?700nm處掃描,標準品最大吸收波長nm,樣品液最大吸收波長為nm,綜合上述實驗擬定510nm為檢測波長。標準曲線的繪制精密量取在120°C干燥至恒重的蘆丁標準品mg置25ml量瓶中,加一定濃度的甲醇適量,超聲30min使溶解,放冷,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,準確吸取20m1置于25ml容量瓶中,加水至刻度,即得mg/ml的標準品溶液。精密量取上述蘆丁標準品溶液0ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml分別于7支50ml容量瓶中,編號,各加水至6ml,加入lml5%亞硝酸鈉溶液,搖勻,靜置6mi
6、n,加入lml10%Al(N03)3溶液,搖勻,放置6min,后加入%的似011溶液10ml,再加水至刻度,搖勻,放置15min,以0號容量瓶為空白試劑,照紫外可見分光光度法,在波長510nm處測定吸光度。表1各樣品液吸光度表以吸光度A和濃度C進行回歸,得線性回歸方程為:C=0A+2,r=83,線性范圍mg/ml?mg/ml.樣品溶液的制備藥材的取樣:因為貫葉連翹是全草入藥,且在各個部位的總黃酮1的含量不一致,為使取樣均一性且保證其全草入藥,故將其分為枝和葉兩部分分別粉碎干燥,混勻后稱取,以消除取樣帶來的誤差。貫葉連翹中黃酮的提取:選用4種方法提取貫葉連翹中
7、的黃酮,分別是:乙醇回流提取法、堿液提取法、超聲提取法、滲漉法。由實驗結果得堿提效果最佳,后進行堿提提取條件的考察,包括堿水量、提取次數(shù)、堿水濃度、提取時間,從而確定最佳提取工藝,得到黃酮的提取液。靜態(tài)吸附實驗樹脂預處理樹脂先用乙醇充分溶脹,然后用乙醇洗至流出液加適量水無白色渾濁現(xiàn)象,再用去離子水洗盡乙醇至無味即可。樹脂的篩選吸附率的測定:精密稱取處理好的樹脂2g,分別置120ml磨口三角瓶中,將樣品液過濾,分別精密加樣品液50ml,靜置24h,充分吸附后,取上層液,過濾,先吸取濾液,測得吸光度為,因吸光度在?之間穩(wěn)定性較好,故初選設定各吸取lml,測得吸光
8、度。表2各樹脂吸光度表吸附率s=/Po.式中:Po為