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《高效液相色譜法測定甘草苷和甘草酸含量的研究論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、高效液相色譜法測定甘草苷和甘草酸含量的研究論文【摘要】目的建立甘草苷和甘草酸的HPLC含量測定方法。方法使用KromasiL-C18（4.6mm×200mm，5μm）柱，甘草苷采用乙腈-0.5%醋酸(20:80)為流動相，檢測波長276nm，柱溫為室溫；甘草酸流動相為甲醇-0.2mol·L-1乙酸銨溶液-冰乙酸(67∶32∶1)，檢測波長252nm，柱溫為室溫。二者流速均為1.0ml·min-1，采用外標(biāo)法定量測定。結(jié)果甘草苷在2.7～27μg·ml-1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（r=0.9997）；甘草酸在6～36μg·ml-1范圍內(nèi)呈良好線性
2、關(guān)系（r=0.9998）；甘草苷和甘草酸的平均回收率分別為101.4%和101.3%.freelethodfordeterminationofliquiritinandglycyrrhizicacidbyHPLC.MethodsKromasil-C18column(4.6mm×200mm,5μm)edtemperatureandthemobilephaseconsistedofacetonitrile-0.5%glacialaceticacid(20∶80),.freel;HPLCanalysisglycyrrhizicacidedtemp
3、eratureandthemobilephaseconsistedofmethanol-0.2mol·L-1ammoniumacetate-glacialaceticacid(67∶32∶1),thedetection.Theflol·min-1.ResultsThelinearrangeofliquiritinl-1(r=0.9997);thelinearrangeofglycyrrhizicacidl-1(r=0.9998);theaveragerecoveryofliquiritinandglycyrrhizicacidethodis
4、simple,convenientstable,repeatableandaccurateinationofliquiritinandglycyrrhizicacidinextractionandpurificationoflicoriceflavonoid.KeyasiL-C18（4.6mm×200mm，5μm）；流動相為乙腈-0.5%醋酸(20∶80)；紫外檢測波長：276nm；流速1.0ml·min-1；柱溫為室溫；進(jìn)樣量20μl。理論塔板數(shù)按甘草酸銨峰計算應(yīng)不低于4000。對照品和甘草黃酮粗提物的色譜圖見圖1～2。2.1.2甘草酸檢
5、測條件色譜柱為KromasiL-C18（4.6mm×200mm，5μm）；流動相為甲醇-0.2mol·L-1乙酸銨溶液-冰醋酸(67∶32∶1)；紫外檢測波長252nm；流速1.0ml·min-1；柱溫為室溫；進(jìn)樣量20μl。理論塔板數(shù)按甘草酸銨峰計算應(yīng)不低于2000。對照品和甘草黃酮粗提物分離的色譜圖見圖3～4。2.2對照品及供試品溶液的配制2.2.1對照品溶液的配制取甘草苷和甘草酸單銨鹽對照品適量，精密稱定，用流動相配制成濃度為54μg·ml-1的甘草苷對照品溶液和120μg·ml-1的甘草酸單銨鹽對照品溶液。2.2.2供試品溶液的制備
6、精密稱取甘草黃酮提取物適量，用相應(yīng)的流動相溶解，定溶于10ml量瓶中,作為甘草苷供試品溶液。精密稱取甘草黃酮提取物適量，用相應(yīng)的流動相溶解，定溶于10ml量瓶中，作為甘草酸供試品溶液。2.3檢測波長的選擇以流動相為參比溶液，在200～400nm波長范圍內(nèi)分別對甘草苷和甘草酸對照品溶液進(jìn)行掃描，結(jié)果表明，甘草苷在276nm處有一最大吸收峰，甘草酸在252nm處有一最大吸收峰，所以選定276nm為甘草苷的檢測波長，252nm為甘草酸的檢測波長。2.4線性關(guān)系的考察精密吸取甘草苷對照品儲備液0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.0
7、0ml于10ml量瓶中，用20%乙腈定容至刻度，搖勻；再精密吸取甘草酸單銨鹽對照品儲備液0.50，1.00，1.50，2.00，2.50，3.00ml于10ml量瓶中，用流動相定容至刻度，搖勻；分別按“2.1”項色譜條件進(jìn)行測定，以峰面積A（μV·s）對進(jìn)樣濃度C（μg·ml-1）作回歸統(tǒng)計，結(jié)果：甘草苷在2.7～27μg·ml-1范圍內(nèi)線性良好，回歸方程：A=24962C+7161.1，r=0.9997。甘草酸在6～36μg·ml-1范圍內(nèi)線性良好，回歸方程為：A=23653C+23125，r=0.9998。2.5精密度實驗取同一供試品溶
8、液，重復(fù)進(jìn)樣6次，求得甘草苷的RSD為0.74%，甘草酸的RSD為0.92%，說明本方法精密度良好。2.6重復(fù)性實驗按“2.2.2”項制備同一批號供試品溶液6份，按擬定的色譜條件
