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《骨髓間充質(zhì)干細胞對博萊霉素致小鼠肺纖維化的影響與作用機制研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、摘要摘要目的：通過觀察骨髓問充質(zhì)干細胞(BMSCs)對博來霉素致小鼠肺纖維化動物模型的影響，探討治療肺纖維化的新方法。方法：體外分離、培養(yǎng)雄性6—8周C57BL／6J小鼠間充質(zhì)干細胞。60只6-8周雌性C57BL／6J小鼠隨機分為3組：陰性對照組(P組)，陽性對照組(B組)，BMSCs治療組(B硼組)。P組于氣管內(nèi)注入PBS50#L，B組及B+M組按5肛g／g劑量氣管內(nèi)注入博萊霉素50肚制備肺纖維化模型，B+M組于造模后6h經(jīng)尾靜脈注射BMSCs1×107／mL，200弘L。實驗第3，7，14，28天分別處死5只小鼠，收集小鼠肺泡灌洗液檢測其細胞因子IFN—y、
2、IL-4的濃度；留取肺組織行病理HE染色，羥脯氨酸含量測定，提取肺組織RNA以檢測TGF-BlmRNA、IFN—YmRNA、IL-4mRNA基因表達情況；提取肺組織的DNA檢測雄鼠的性別決定基因(sry基因)。結(jié)果：1、肺組織病理：B+M組在第7、14天的肺泡炎較B組明顯減輕，第28天肺纖維化程度較B組明顯減輕。2、肺系數(shù)：B及B+M組各時間點肺系數(shù)均較P組稍高，但B+M組較B組明顯降低。3、HYP含量：在3、7天，三組的HYP含量無明顯差異；B+M組的HYP含量在第14天與P組相當，在28天稍高于P組，但均明顯低于B組。4、TGF-13lmRNA：B及B+M組
3、各時間點TGF-BlmRNA表達均較P組高，但在后三個時間點B+M組明顯低于B組。5、sry基因檢測：B+M組各時間點均有雄性小鼠的sry基因存在。6、肺組織IFN-YmRNA、IL一4mRNA表達情況：B及B+M組IFN—YmRNA、IL-4mRNA表達在四個時間點均明顯高于P組，在后三個時間點B+M組IFN-YmRNA較B組明顯偏低，在后兩個時間點B+M組IL一4mRNA較B組明顯偏低；比較IL-4mRNA／IFN—YmRNA，B+M組在后兩個時間點明顯低于B組。7、肺泡灌沈液中IFN-y、IL-4的濃度：B及B+M組IFN-Y、IL一4濃度在四個時間點均高
4、于P組，但在后三個時間點B+M組IFN-Y濃度較B組明顯偏低；且其IL一4濃度在四個時間點均較B組明顯偏低；比較IL一4／IFN-Y濃度，B+M組在3，14，28天高于P組，在7、14、28天明顯低B組(7、14天：P(0．05；28天P=O．05)。結(jié)論：1、外源性BMSCs經(jīng)尾靜脈注射可以到達肺損傷部位，且可以長期存在；2、外源性BMSCs可以減輕肺泡炎、肺纖維化的程度；3、外源性BMSCs發(fā)揮抗炎、抗纖維化的bj．能是通過逆轉(zhuǎn)Thl／Th2細胞因子的失衡實現(xiàn)的；4、外源性BMSCs摘要到達損傷肺后可能抑制TGF-13lmRNA的表達，從而抑$1JfF-維化
5、形成。關(guān)鍵詞：肺纖維化；骨髓fBJ充質(zhì)干細胞；羥脯氨酸；轉(zhuǎn)化生長因子一13l(T(；F一131)；干擾素一Y；白介素一4；sry性別決定區(qū)ABSTRACTobjective：Toexploretheeffectsofbonemarrow-derivedmesenchymalstemcellsonbleomycin—inducedpulmonaryfibrosisinmiceandtostudythemechanismofitseffects．Methods：BonemarrowderivedBMSCswereharvestedfrommaleC57BI／6Jmi
6、ceinvitro，culturedintocultureflaskswithmediumandexpandedtothefourthpassagefortheexperiments．60C57BL／6Jmicewererandomlydividedinto3groupswith20ofeachgroup：negativecontrolgroup(GroupP)、positivecontrolgroup(GroupB)、mesenchymalstemcellstransplantinggroup(groupB+M)．GroupPwereinstilledwith
7、50I／xLPBSviatracheadiscission．GroupBandgroupB+Mweremadeaspulmonaryfibrosismodelsbyintratrachealinstillationofbleomycin(5#g／g，50#L)．After6hours，thesuspensionofBMSCswereinjectedintomiceviathetailveinofB+MgroupwithaconcentrationoflxlO7／mL，200u1．Fivemiceweresacrificedatdays3,7，14，28after
8、modelinginba
