資源描述：
《總糖和還原糖的測定(費林試劑熱滴定法)》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在應用文檔-天天文庫。
1、總糖和還原糖的測定──費林試劑熱滴定法目的要求：掌握還原糖和總糖的測定原理，學習用直接滴定法測定還原糖的方法。實驗原理：?還原糖是指含有自由醛基（如葡萄糖）或酮基（如果糖）的單糖和某些二糖（如乳糖和麥芽糖）。在堿性溶液中，還原糖能將Cu2+、Hg2+、Fe3+、Ag+等金屬離子還原，而糖本身被氧化成糖酸及其他產物。糖類的這種性質常被用于糖的定性和定量測定。本實驗采用費林試劑熱滴定法。費林試劑由甲、乙兩種溶液組成。甲液含硫酸銅和亞甲基藍（氧化還原指示劑）；乙液含氫氧化鈉，酒石酸鉀鈉和亞鐵氰化鉀。將
2、一定量的甲液和乙液等體積混合時，硫酸銅與氫氧化鈉反應，生成氫氧化銅沉淀：2NaOH+CuSO4=Cu(OH)2+Na2SO4在堿性溶液中，所生成的氫氧化銅沉淀與酒石酸鈉反應，生成可溶性的絡合物酒石酸鉀鈉銅：?反應生成的氧化亞銅沉淀與費林試劑中的亞鐵氰化鉀（黃血鹽）反應生成可溶性復鹽，便于觀察滴定終點。Cu2O+K4Fe(CN)6+H2OCu2O+K4Fe(CN)6+H2OK2Cu2Fe(CN)6+2KOH滴定時以亞甲基藍為氧化－還原指示劑。因為亞甲基藍氧化能力比二價銅弱，待二價銅離子全部被還原后
3、，稍過量的還原糖可使藍色的氧化型亞甲基藍還原為無色的還原型的亞甲基藍，即達滴定終點。根據(jù)樣液量可計算出還原糖含量。試劑和器材：?一、試劑費林試劑：甲液：稱取15g硫酸銅（CuSO4·5H2O）及0.05g亞甲基藍，溶于蒸餾水中并稀釋到1000mL。乙液：稱取50g酒石酸鉀鈉及75gNaOH，溶于蒸餾水中，再加入4g亞鐵氰化鉀［K4Fe（CN）6］，完全溶解后，用蒸餾水稀釋到1000mL，貯存于具橡皮塞玻璃瓶中。0.1％葡萄糖標準溶液：準確稱取1.000g經98～100℃干燥至恒重的無水葡萄糖，加
4、蒸餾水溶解后移入1000mL容量瓶中，加入5mL濃HCl（防止微生物生長），用蒸餾水稀釋到1000mL。6mol/LHCl：取250mL濃HCl（35%～38%）用蒸餾水稀釋到500mL。碘－碘化鉀溶液：稱取5g碘，10g碘化鉀溶于100mL蒸餾水中。6mol/LNaOH：稱取120gNaOH溶于500mL蒸餾水中。0.1%酚酞指示劑。二、材料藕粉，淀粉。三、器材試管3.0×20cm（×1）；移液管5mL（×2）；燒杯100mL(×1);250mL錐形瓶;調溫電爐;滴定管25mL(×1)。操作方
5、法：一、樣品中還原糖的提取準確稱取1g藕粉，放在100mL燒杯中，先以少量蒸餾水調成糊狀，然后加入約40mL蒸餾水，混勻，于50℃恒溫水浴中保溫20min，不時攪拌，使還原糖浸出混。過濾，將濾液全部收集在50mL的容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，即為還原糖提取液。二、樣品中總糖的水解及提取準確稱取1g淀粉，放在大試管中，加入6mol/LHCl10mL，蒸餾水15mL，在沸水浴中加熱0.5h，取出1～2滴置于白瓷板上，加1滴I-KI溶液檢查水解是否完全。如已水解完全，則不呈現(xiàn)藍色。水解畢。冷卻至室溫
6、后加入1滴酚酞指示劑，以6mol/LNaOH溶液中和至溶液呈微紅色，并定容到100mL，過濾取濾液10mL于100mL容量瓶中，定容至刻度，混勻，即為稀釋1000倍的總糖水解液，用于總糖測定。三、空白滴定準確吸取費林試劑甲液和乙液各5.00mL，置于250mL錐形瓶中，加蒸餾水10mL。從滴定管滴加約9mL葡萄糖標準溶液，加熱使其在2min內沸騰，準確沸騰30s，趁熱以每2s1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標準溶液，直至溶液藍色剛好褪去為終點。記錄消耗葡萄糖標準溶液的總體積。平行操作3次，取其平均值，按
7、下式計算：式中：F──10mL費林試劑（甲液和乙液各5.00mL）相當于葡萄糖的量，mg；C──葡萄糖標準溶液的濃度，mg/mL；V──標定時消耗葡萄糖標準溶液的總體積，mL。四、樣品糖的定量測定(1)樣品溶液預測定：吸取費林試劑甲液及乙液各5.00mL，置于250mL錐形瓶中，加蒸餾水10mL，加熱使其在2min內沸騰，準確沸騰30s，趁熱以先快后慢的速度從滴定管中滴加樣品溶液，滴定時要保持溶液呈沸騰狀態(tài)。待溶液由藍色變淺時，以每2s1滴的速度滴定，直至溶液的藍色剛好褪去為終點。記錄樣品溶液消
8、耗的體積。(2)樣品溶液測定：吸取費林試劑甲液及乙液各5.00mL，置于錐形瓶中，加蒸餾水10mL，加玻璃珠3粒，從滴定管中加入比與測試樣品溶液消耗的總體積少1mL的樣品溶液，加熱使其在2min內沸騰，準確沸騰30s，趁熱以每2s1滴的速度繼續(xù)滴加樣液，直至藍色剛好褪去為終點。記錄消耗樣品溶液的總體積。平行操作3次，取其平均值。五、結果處理其中：m──樣品重量，g；式中：F──10mL費林試劑（甲液和乙液各5.00mL）相當于葡萄糖的量，mg；V──標定時平均消耗還原糖或總糖樣品溶液的總體積，m
