鵝gnih及其受體基因的克隆、組織表達(dá)以及在顆粒細(xì)胞中的研究

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)SichuanAgriculturalUniversityMasterDegreeDissertationCloningofgooseGnIHanditsreceptor,thegeneexpressionandresearchingranulosacellsByGanChaoDirectedbyProf.LiLiang&Prof.WangJiwenAnimalGenetics,BreedingandReproductionMolecularGeneticsandWaterfowlBreedingCollegeofAnimalSciencea

2、ndTechnology,SichuanAgriculturalUniversityYa’an,SichuanProvince,ChinaJune,2014萬(wàn)方數(shù)據(jù)論文指導(dǎo)小組成員韓春春副研究員劉賀賀副研究員f刪趔刪舢舢舢舢刪棚舢JO120861”本論文由國(guó)家水禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(課題編號(hào):CARS一43—6)、I四)il省畜禽育種攻關(guān)項(xiàng)目(課題編號(hào):2011NZ0099—8)和I四)il教育廳創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):13TD0034)資助本試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)“畜禽遺傳資源發(fā)掘與創(chuàng)新利用四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室"完成萬(wàn)方數(shù)據(jù)論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)

3、位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,學(xué)位論文中不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果,也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名:者Z互砂刀驢年石月『/日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。

4、同意四川農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容??诒菊撐牟槐C???诒菊撐谋C埽谀杲饷芎筮m用本授權(quán)。(請(qǐng)?jiān)谝陨峡趦?nèi)劃“√”)研究生簽名:魄鋤簽名:孝歷沙,,蘆年‘月f7日洳7V年廠月f7日萬(wàn)方數(shù)據(jù)摘要促性腺激素抑制激素(GnlH)能以劑量依賴的模式作用于垂體前葉減少促性腺激素的釋放,是目前發(fā)現(xiàn)的唯一能抑制生殖系統(tǒng)發(fā)育和功能的神經(jīng)肽。GnlH能從下丘腦、垂體和性腺三個(gè)方面同時(shí)對(duì)繁殖進(jìn)行調(diào)節(jié)。除了繁殖方面,它還在壓力反射、攝食調(diào)節(jié)和季節(jié)性繁殖等多個(gè)方面起著重要的調(diào)節(jié)作用。為了研究GnIH對(duì)鵝繁殖的影響,本試驗(yàn)檢測(cè)了GnlH及

5、其兩個(gè)受體RFRPR和NPFFR在產(chǎn)蛋高峰期母鵝不同組織中的表達(dá),并以鵝卵巢顆粒細(xì)胞為研究模型,通過(guò)添加不同濃度的外源GnlH處理,分析了GnlH對(duì)鵝卵巢顆粒細(xì)胞功能的影響。主要研究結(jié)果如下:(1)獲得了GnlH前體mRNA、RFRPR、NPFFR的編碼區(qū)部分CDS區(qū)序列。通過(guò)序列分析和氨基酸比對(duì),發(fā)現(xiàn)RFRPR與MD職尺之間堿基序列的同源性為65.35%,并且都具有7個(gè)相似的氨基酸跨膜結(jié)構(gòu)域。(2)分析了GnIH前體mRNA在產(chǎn)蛋高峰期母鵝不同組織的表達(dá)模式。發(fā)現(xiàn)GnlH在下丘腦中的表達(dá)最高,除了腦部外,在腎上腺、輸卵管和卵巢中也有表達(dá),說(shuō)明GnI

6、H主要的合成場(chǎng)所是下丘腦。(3)RFRPR和NPFFR主要在腦部表達(dá)。RFRPR更符合GnIH免疫神經(jīng)纖維的分布,推測(cè)RF即R是鵝GnlH的主要受體。R職PR在腎上腺和眼球中的表達(dá),表明GnlH參與了壓力反射和季節(jié)性繁殖調(diào)控。R職瞅在卵巢中也有表達(dá),表明GnIH能直接調(diào)控卵巢的功能。(4)以體外培養(yǎng)的鵝卵泡顆粒細(xì)胞為研究模型,通過(guò)在培養(yǎng)基中人為地添加外源GnlH(0、0.1、10、1000ng/m1)處理細(xì)胞,結(jié)果表明GnlH能影響顆粒細(xì)胞類固醇激素的合成與分泌。外源的GnlH能降低顆粒細(xì)胞中StAR、3口一HSD和CYPl9基因的表達(dá),也能減少雌二

7、醇和孕酮的分泌。(5)外源GnlH能夠降低顆粒細(xì)胞的活性,促進(jìn)細(xì)胞的凋亡而減少細(xì)胞的增殖,降低細(xì)胞中C例D,、CCND2和Bcl一2基因的表達(dá)。(6)在GnlH處理的細(xì)胞中,GnIH能下調(diào)LH-R和FSH-R的表達(dá),但對(duì)GnRH和顯瞅尸R的表達(dá)影響卻并不顯著,表明GnlH對(duì)顆粒細(xì)胞的調(diào)控可能是通過(guò)LH-R和FSH-R來(lái)實(shí)現(xiàn)的。關(guān)鍵詞:鵝;GnIH;顆粒細(xì)胞;繁殖調(diào)控萬(wàn)方數(shù)據(jù)CloningofgooseGnIHanditsreceptor,thegeneexpressionandresearchingranulosacellsByGanChao(Ani

8、malGenetics,Breeding&Reproduction)DirectedbyProf.LiLia

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