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《RP-HPLC法測定逍遙婦樂顆粒中梔子苷、芍藥苷的含量》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、RP-HPLC法測定逍遙婦樂顆粒中梔子苷、芍藥苷的含量【關(guān)鍵詞】RP-HPLC【摘要】目的用RP-HPLC法測定逍遙婦樂顆粒中梔子苷、芍藥苷的含量。方法用UV確定梔子苷、芍藥苷的檢測波長為236nm，采用MetachemC-18柱（4.6mm×250mm、5μm），乙腈-0.02%磷酸（W/V）（15:85）為流動相，流速為1.0ml/min，λ=236nm，柱溫為30℃。結(jié)果梔子苷在0.097～1.552μg范圍內(nèi)具有良好的線性（r2=0.9998），平均回收率為96.80%（RSD=1.9%），芍藥苷在0.13～2.0μg范圍內(nèi)具有良好線性（r2=0.9998），其平均回收
2、率為100.28%（RSD=1.4%），n=9。結(jié)論此方法簡便、準(zhǔn)確，專屬性強，為逍遙婦樂顆粒的質(zhì)量控制提供了科學(xué)有效的方法?！娟P(guān)鍵詞】RP-HPLC法梔子苷芍藥苷逍遙婦樂顆粒是老中醫(yī)治療胸痹的臨床經(jīng)驗方，具有疏肝解郁、健脾利濕的功效，用于治療肝郁化熱、脾虛濕盛所致的婦女經(jīng)前期緊張綜合征。本方由白芍、牡丹皮、梔子等數(shù)10味中藥經(jīng)提取加工制成，組方較為復(fù)雜。為保證藥品的內(nèi)在質(zhì)量，制定了芍藥苷、梔子苷的含量測定方法，并進(jìn)行相關(guān)方法學(xué)研究，認(rèn)為線性、重復(fù)性、回收率、精密度等均較理想。1儀器與試藥Agilent1100系列高效液相色譜儀G1312A（Biupump）二元泵、G1313（
3、ALS）自動進(jìn)樣器G1316A（COLOM）柱溫箱G1314A（VWD）及Agilent工作站;UV-可見紫外分光光度計（SHIMADZU）;乙腈為色譜純，其余均為分析純;對照品芍藥苷（paeoniflorin）、梔子苷（geniposide）購于中國藥品生物制品檢定所;樣品逍遙婦樂顆粒（批號:010208）由本廠提供。2方法的研究2.1測定波長的確定經(jīng)紫外測定，梔子苷的最大吸收為238nm;芍藥苷的最大吸收為230nm，二條吸收曲線相交吸收約為236nm，在此波長處，二種對照品的吸收都比較大，滿足含量測定要求，故確定以236nm作為梔子苷和芍藥苷的共同吸收波長。2.2流動相的
4、選擇根椐文獻(xiàn)報導(dǎo)及中國藥典采用的流動相，比較了（1）［甲醇―異丙醇（67:4）］―［0.05mol/L磷酸二氫鉀―醋酯（177:4）］（28:72）;（2）乙腈―0.1%磷酸（13:87）;（3）乙腈―0.02%磷酸（W/V）（15:85），并設(shè)定柱溫為30℃。根據(jù)上述三種流動相的試驗結(jié)果，認(rèn)為流動相（3）較理想。為此將“色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗”調(diào)整為用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱;乙腈―0.02%磷酸（W/V）（15:85）為流動相;流速為1.0ml;檢測波長:236nm;柱溫30℃。理論板數(shù)按梔子苷峰、芍藥苷峰計算應(yīng)不低于6000。色譜圖見圖1、2。圖1芍藥苷、梔
5、子苷對照品色譜圖2逍遙婦樂顆粒樣品圖2.3提取方法選擇經(jīng)查閱相關(guān)資料，用本品批號為010208的樣品，對提取方法、提取溶劑、溶劑用量、提取時間進(jìn)行考察，采用正交表L9（34）進(jìn)行試驗，由試驗結(jié)果知，因素D提取時間影響小，作為誤差項進(jìn)行方差分析。見表1～4。表1逍遙婦樂顆粒含量測定法正交試驗的因素（略）表2逍遙婦樂顆粒含量測定法正交試驗的計算（略）表3逍遙顆粒中梔子苷正交試驗的方差分析（略）表4逍遙顆粒中芍藥苷正交試驗的方差分析（略）從對梔子苷、芍藥苷進(jìn)行正交試驗的方差分析得知，提取溶劑與提取方法對梔子苷和芍藥苷的提取率都有顯著的影響，提取時間的長短對二者均無影響，溶劑的用量對梔
6、子苷、芍藥苷幾乎沒有什么影響，即采用樣品的10倍量溶劑與20倍量溶劑提取，差別不大，為此最佳的提取方案為:采用50%的甲醇，加入樣品10倍量的溶劑，回流20min。按此條件，又對同一批樣品進(jìn)行復(fù)核試驗，根據(jù)復(fù)核試驗的結(jié)果，梔子苷的平均含量為0.441%，比正交試驗中的最大值0.407%提高8.3%，芍藥苷的平均含量為0.533%，比正交試驗中的最大值0.529%提高0.8%。由此證明所選最佳方案是正確的。2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線、定量限及檢測限測定將對照品梔子苷、芍藥苷配制成不同濃度的溶液，以峰面積對濃度作圖，梔子苷回歸曲線為y=14307x+8.622，R2=0.9998，在0.097
7、～1.552μg范圍內(nèi)具有良好的線性;芍藥苷回歸曲線為y=12483x+8.7132，R2=0.9998，在0.13～2.0μg范圍內(nèi)具有良好的線性。芍藥苷定量限為0.2μg/ml、檢測限為0.06μg/ml;梔子苷定量限為0.17μg/ml、檢測限為0.05μg/ml。2.5對照品溶液及供試品溶液的制備2.5.1對照品溶液的配制取經(jīng)真空干燥24h的對照品梔子苷10mg、芍藥苷12.5mg，精密稱定，分別置50ml量瓶中，加50%甲醇使溶解，并稀釋至刻度，搖勻備用。分別精密吸取上述對照品溶液
