分離以尿素為氮源的微生物

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1、1．B2．B3．C4．C５．D6．B7．B10.D11.B12.C13.C13.“培養(yǎng)基的稀釋率（培養(yǎng)基的更新速率）”的含義就是“添加新的培養(yǎng)基以及放出老的培養(yǎng)基的速度”。橫坐標(biāo)為“培養(yǎng)基的稀釋率（培養(yǎng)基的更新速率）”，也就是“添加新的培養(yǎng)基以及放出老的培養(yǎng)基的速度”。14．（1）目的菌選擇（2）化合物A異養(yǎng)需氧型（3）減少增加（4）劃線（5）定期取樣細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)（6）滅菌實(shí)驗(yàn)2分離以尿素為氮源的微生物細(xì)菌尿素NH3中性堿性酚紅顏色：黃色紅色(變色范圍pH6.4-8.2)任務(wù)1：怎么從土壤中分離出它們呢？利用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。配制培養(yǎng)基尿素培養(yǎng)基葡萄糖

2、0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g瓊脂糖0.5g酚紅0.25g尿素10ml選擇培養(yǎng)基瓊脂是未被純化的混合物,內(nèi)含一定量的含氮化合物（1）將土壤中的固氮菌分離出來(lái)（2）將土壤中自養(yǎng)微生物分離出來(lái)舉一反三（3）篩選出抗青霉素的微生物（4）篩選出耐高濃度食鹽的微生物……2、要驗(yàn)證以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基對(duì)土壤中的細(xì)菌確實(shí)具有選擇作用，你該如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。思考：配制培養(yǎng)基尿素培養(yǎng)基葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g瓊脂糖0.5g酚紅0.25g尿素10mlLB培養(yǎng)基蛋白胨：0.25g酵母粉：0.12gNaCl：0.25g瓊脂糖：0.5g對(duì)照

3、組選擇培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)組3、請(qǐng)你提供一種方法，判斷分解尿素的細(xì)菌確實(shí)能將尿素分解成氨。思考：方法：在以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,接種培養(yǎng)該細(xì)菌，若指示劑變紅，說(shuō)明該種菌分解了尿素。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?使用專(zhuān)一培養(yǎng)基(含有尿素)分離專(zhuān)一的細(xì)菌通過(guò)指示劑（酚紅）顏色的變化檢知脲酶催化的化學(xué)反應(yīng)三、實(shí)驗(yàn)中涉及到的一些問(wèn)題：（一）哪些土壤中含有這種以尿素為氮源的微生物多？（選材的問(wèn)題）（二）此實(shí)驗(yàn)用到的選擇培養(yǎng)基必需含有哪些物質(zhì)？（三）可用什么指標(biāo)認(rèn)定不同土壤中選擇出的微生物對(duì)尿素分解能力的高低？沒(méi)硬化，腐殖質(zhì)豐富的土壤碳源、尿素、無(wú)機(jī)鹽、水、酚紅培養(yǎng)基紅色的深淺三、實(shí)驗(yàn)中

4、涉及到的一些問(wèn)題：重復(fù)性原則對(duì)照原則（排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)的可信度）（四）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要遵循的原則：過(guò)濾滅菌后的尿素（二）制備細(xì)菌懸液制備成10-2、10-3、10-4、10-5土壤稀釋液配制菌懸液1個(gè)99ml無(wú)菌水2個(gè)4.5ml無(wú)菌水得10-2,10-3,10-4的菌懸液1g土壤倒平板需要倒3個(gè)LB平板，9個(gè)尿素平板LB(對(duì)照)尿素10-310-410-5每個(gè)稀釋度1個(gè)LB對(duì)照平板3個(gè)尿素平板(平行重復(fù)組)接種取0.1ml菌懸液涂布分離高濃度→低濃度，換槍頭低濃度→高濃度，可不用換槍頭涂布分離37℃倒置培養(yǎng)按濃度捆成一摞恒溫37℃培養(yǎng)10-4、

5、10-3,、10-2本實(shí)驗(yàn)?zāi)蛩毓腆w培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落都是以尿素為氮源的微生物嗎？思考與練習(xí)2、有脲酶的細(xì)菌在生態(tài)穩(wěn)態(tài)上起什么作用？如果土壤中有許多尿素，在自然界較高溫度下就會(huì)被水解，水解后的NH3會(huì)使土壤變成堿性，NH3與其他陰離子物質(zhì)如SO42－、CO32－、NO3－等形成化合物，則會(huì)使土壤板結(jié)。有脲酶的細(xì)菌使植物廢棄物和動(dòng)物尸體降解，并利用了所形成的氨，有利于自然界中氮的循環(huán)。4．與全營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基早的菌落比較，為什么尿素培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌落？因?yàn)槿珷I(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中的氮源是蛋白胨，很多細(xì)菌都能利用它，而尿素培養(yǎng)基中的氮源只有尿素，只有含脲酶的細(xì)菌才能利用尿素，能存活。這一現(xiàn)

6、象表明能利用尿素的細(xì)菌在土壤菌群中只占有極少數(shù)量。1土壤中有些微生物能利用尿素是因?yàn)?　　)A．其體內(nèi)含有脲酶B．其體內(nèi)含有氨(NH3)酶C．它能將CO2合成為有機(jī)物D．它們不需要氮源A【例題2】分離以尿素為氮源的細(xì)菌和分離大腸桿菌都使用了LB培養(yǎng)基，其成分(　　)A．前者含瓊脂，后者不含瓊脂和瓊脂糖B．兩者都含有瓊脂C．前者含有瓊脂糖，后者含瓊脂D．兩者都不含瓊脂和瓊脂糖C3用10－4稀釋度的細(xì)菌懸液分別涂布于LB、尿素培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后的結(jié)果，以下敘述正確的是(　　)A．LB培養(yǎng)基上未出現(xiàn)任何菌落B．尿素培養(yǎng)基上出現(xiàn)的菌落數(shù)量和種類(lèi)都多于LB培養(yǎng)基上的C．尿素培養(yǎng)基上

7、出現(xiàn)的菌落數(shù)量和種類(lèi)都少于LB培養(yǎng)基上的D．尿素培養(yǎng)基上是不可能出現(xiàn)菌落的C5.在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從對(duì)應(yīng)10-6培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。A同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生原因可能有()①由于土樣不同②由于培養(yǎng)基污染③由于操作失誤④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④A2．為什么本實(shí)驗(yàn)中要用瓊脂糖來(lái)代替瓊脂配制固體培養(yǎng)基呢？瓊脂糖與瓊脂有何區(qū)別？瓊脂在制作固體培養(yǎng)基時(shí)起凝固劑的作用。但它卻是一種未被純化的混合物，里面有一定量的含氮化合物。在本實(shí)驗(yàn)中所使用的尿素培養(yǎng)基卻要求提供氮元素的