經(jīng)典酶法提取柑橘籽分離蛋白的工藝研究.pdf

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1、工上藝乙技儀術(shù)不經(jīng)典酶法提取柑橘籽分離蛋白的工藝研究董元平(上海麥愷晨貿(mào)易有限公司上海201707)摘要：本研究為柑橘的深加工奠定理論基礎(chǔ)，也提高柑橘的的利用率。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，應(yīng)用響應(yīng)面法優(yōu)化柑橘籽分離蛋白的提取條件，確定酶法提取蛋白的最佳工藝條件是：提取溫度55℃、pH／di5．0、料液比1：8、酶；~&3ooou／ml、提取時(shí)間2h．，在此條件下提取率達(dá)78．16％。關(guān)鍵詞：柑橘籽經(jīng)典酶法分離蛋白提取工藝研究中圖分類號(hào)：TS201．2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1672．5336(2014)02—0025—031柑橘籽生產(chǎn)分離蛋白的優(yōu)勢(shì)籽8．9

2、6％都要高。由此可以看出柑橘籽的蛋白含量很(1)競(jìng)爭(zhēng)性低，成本低。柑橘的價(jià)格低，雖然現(xiàn)在人們高，有較大的開發(fā)價(jià)值。(3)分離蛋白的發(fā)展前景廣。對(duì)把柑橘籽添加到飼料中或者用柑橘籽浸出液處理過的分離蛋白進(jìn)行改性制備出可生物降解材料[4】_【5】?，F(xiàn)在白作物，防蟲害。但現(xiàn)在少有關(guān)注于柑橘籽生產(chǎn)分離蛋白色垃圾污染嚴(yán)重，環(huán)保產(chǎn)品市場(chǎng)廣闊。以及分離蛋白在從而獲得更大的市場(chǎng)利益，因此競(jìng)爭(zhēng)性低。(2)蛋白含量食品加工方面也有涉及，在高蛋白含量的食品或產(chǎn)品大更具優(yōu)勢(shì)。據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)[】]報(bào)道，柑橘籽中富含38．86％～中可以添加分離蛋白，提高蛋白的含量。42．59％油脂和2

3、8．56％～36．20％蛋白質(zhì)以及其他礦物元2材料與儀器素。同時(shí)，比國(guó)內(nèi)研究得比較多的甜瓜籽24．08％E、葡萄2．1實(shí)驗(yàn)材料80芝60蛋自蕊提墩率簍4o蛋白質(zhì)提取率782。T6蜊74011．522．5時(shí)聞／h圖1時(shí)間一蛋白質(zhì)提取率的關(guān)系圖圖3pH值一蛋白質(zhì)提取率的關(guān)系圖8062差6o60簍40蛋白質(zhì)提取率墓58置自贗提取率囂2o怛皿56鵪04O455055溫度／'C圖2溫度一蛋白質(zhì)提取率的關(guān)系圖圖4料液化一蛋白質(zhì)提取率的關(guān)系圖表1正交實(shí)驗(yàn)因素水平設(shè)計(jì)水平A：溫度，℃B：時(shí)間，hC：pH值D：料液比g／nilE：加酶量u／ml1551．541：620o

4、o26025l：830003652．27l：1050o0中外食品工業(yè)5Im—foreignFoodIndustry25工上藝乙技儀術(shù)小翡表2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果分離蛋白的提?。翰捎孟扔美w維素酶對(duì)物料在一定的序號(hào)ABCDE蛋白質(zhì)提條件下進(jìn)行反應(yīng)，離心分離后，用NaOH母液進(jìn)行pH調(diào)取率節(jié)，調(diào)PH值至9．2進(jìn)行堿沉的方法，進(jìn)行蛋白質(zhì)的提11111172．02取。第五、柑橘籽分離蛋白的洗滌：蛋白沉淀物用蒸餾21l11273．653l11l372．76水洗滌3次至中性。第六、干燥：使用烘干箱進(jìn)行干燥。41222175．2l(3)酶解液的配制：根據(jù)公式加入纖維素酶的劑量

5、51222277．1061222375．84溶于已知PH值的溶液中，制成酶解液，再根據(jù)條件進(jìn)71333172．401．宰1，行酶解。m一纖維素酶的質(zhì)量，g；X一所需8l333275．3791333374．92的加酶量，u／ml；y一溶液的體積ml；I40*IO’一纖維素102l23172．13酶的酶活力，u／g。112123273．52122123372．90第一、粗蛋白含量的測(cè)定：凱式定氮法測(cè)定粗蛋白l3223ll70。O6含量。第二、蛋白質(zhì)提取率的測(cè)定：蛋白質(zhì)提取率是在142231272．74獲得使用試樣的蛋白質(zhì)含量的基礎(chǔ)上，進(jìn)行運(yùn)算。即l5223

6、l372．05162312171．18浸提分離后殘?jiān)械牡鞍缀?)：柑橘籽中蛋白含172312273．O2182312372．62量【6]0j提取莉％：l00一193132168．88203I32270．293實(shí)驗(yàn)結(jié)果213l32369．67223213270．443．1單因子實(shí)驗(yàn)結(jié)果233213272．013．1．1時(shí)間對(duì)蛋白質(zhì)提取率的影響243213371．35時(shí)間是影響反應(yīng)的一個(gè)因素。時(shí)間過短，酶反應(yīng)不253321170．2626332l271．54完全，樣品沒有充分反應(yīng)。因此，采用凱式定氮法測(cè)定27332l371．02蛋白質(zhì)的含量低，物料的蛋

7、白質(zhì)提取率也低。而時(shí)間k174．3671．7672．1271．7971．40過長(zhǎng)，樣品的蛋白質(zhì)提取率相差很小，但實(shí)驗(yàn)的效率k272．2572．9873．2872．6573．25k370．6172．4871．8272．7872．57偏低。圖l顯示了時(shí)間對(duì)蛋白質(zhì)提取率的影響。R3．761．221．46O．991．85在溫度：45℃；料液比：l：10；酶活力：3000u／m1；ph：排秩143525的條件下，考察時(shí)間對(duì)蛋白質(zhì)提取率的影響。水浴1h柑橘籽，來自匯源集團(tuán)。后隨著時(shí)間的增加，物料的蛋白質(zhì)提取率也逐漸提高，2．2試劑水浴2h后，測(cè)得的樣品蛋白質(zhì)提取率

8、最大；水浴2．5h纖維素酶，五水硫酸銅，硫酸鉀，硫酸，硼酸，鹽酸，后，測(cè)得的蛋白質(zhì)提取率與2h