經(jīng)典酶法提取柑橘籽分離蛋白的工藝研究.pdf

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1、工上藝乙技儀術(shù)不經(jīng)典酶法提取柑橘籽分離蛋白的工藝研究董元平(上海麥愷晨貿(mào)易有限公司上海201707)摘要:本研究為柑橘的深加工奠定理論基礎(chǔ),也提高柑橘的的利用率。在單因素實驗的基礎(chǔ)上,應(yīng)用響應(yīng)面法優(yōu)化柑橘籽分離蛋白的提取條件,確定酶法提取蛋白的最佳工藝條件是:提取溫度55℃、pH/di5.0、料液比1:8、酶;~&3ooou/ml、提取時間2h.,在此條件下提取率達78.16%。關(guān)鍵詞:柑橘籽經(jīng)典酶法分離蛋白提取工藝研究中圖分類號:TS201.2文獻標識碼:A文章編號:1672.5336(2014)02—0025—031柑橘籽生產(chǎn)分離蛋白的優(yōu)勢籽8.9

2、6%都要高。由此可以看出柑橘籽的蛋白含量很(1)競爭性低,成本低。柑橘的價格低,雖然現(xiàn)在人們高,有較大的開發(fā)價值。(3)分離蛋白的發(fā)展前景廣。對把柑橘籽添加到飼料中或者用柑橘籽浸出液處理過的分離蛋白進行改性制備出可生物降解材料[4】_【5】?,F(xiàn)在白作物,防蟲害。但現(xiàn)在少有關(guān)注于柑橘籽生產(chǎn)分離蛋白色垃圾污染嚴重,環(huán)保產(chǎn)品市場廣闊。以及分離蛋白在從而獲得更大的市場利益,因此競爭性低。(2)蛋白含量食品加工方面也有涉及,在高蛋白含量的食品或產(chǎn)品大更具優(yōu)勢。據(jù)國外文獻[】]報道,柑橘籽中富含38.86%~中可以添加分離蛋白,提高蛋白的含量。42.59%油脂和2

3、8.56%~36.20%蛋白質(zhì)以及其他礦物元2材料與儀器素。同時,比國內(nèi)研究得比較多的甜瓜籽24.08%E、葡萄2.1實驗材料80芝60蛋自蕊提墩率簍4o蛋白質(zhì)提取率782。T6蜊74011.522.5時聞/h圖1時間一蛋白質(zhì)提取率的關(guān)系圖圖3pH值一蛋白質(zhì)提取率的關(guān)系圖8062差6o60簍40蛋白質(zhì)提取率墓58置自贗提取率囂2o怛皿56鵪04O455055溫度/'C圖2溫度一蛋白質(zhì)提取率的關(guān)系圖圖4料液化一蛋白質(zhì)提取率的關(guān)系圖表1正交實驗因素水平設(shè)計水平A:溫度,℃B:時間,hC:pH值D:料液比g/nilE:加酶量u/ml1551.541:620o

4、o26025l:830003652.27l:1050o0中外食品工業(yè)5Im—foreignFoodIndustry25工上藝乙技儀術(shù)小翡表2正交實驗結(jié)果分離蛋白的提?。翰捎孟扔美w維素酶對物料在一定的序號ABCDE蛋白質(zhì)提條件下進行反應(yīng),離心分離后,用NaOH母液進行pH調(diào)取率節(jié),調(diào)PH值至9.2進行堿沉的方法,進行蛋白質(zhì)的提11111172.02取。第五、柑橘籽分離蛋白的洗滌:蛋白沉淀物用蒸餾21l11273.653l11l372.76水洗滌3次至中性。第六、干燥:使用烘干箱進行干燥。41222175.2l(3)酶解液的配制:根據(jù)公式加入纖維素酶的劑量

5、51222277.1061222375.84溶于已知PH值的溶液中,制成酶解液,再根據(jù)條件進71333172.401.宰1,行酶解。m一纖維素酶的質(zhì)量,g;X一所需8l333275.3791333374.92的加酶量,u/ml;y一溶液的體積ml;I40*IO’一纖維素102l23172.13酶的酶活力,u/g。112123273.52122123372.90第一、粗蛋白含量的測定:凱式定氮法測定粗蛋白l3223ll70。O6含量。第二、蛋白質(zhì)提取率的測定:蛋白質(zhì)提取率是在142231272.74獲得使用試樣的蛋白質(zhì)含量的基礎(chǔ)上,進行運算。即l5223

6、l372.05162312171.18浸提分離后殘渣中的蛋白含量():柑橘籽中蛋白含172312273.O2182312372.62量【6]0j提取莉%:l00一193132168.88203I32270.293實驗結(jié)果213l32369.67223213270.443.1單因子實驗結(jié)果233213272.013.1.1時間對蛋白質(zhì)提取率的影響243213371.35時間是影響反應(yīng)的一個因素。時間過短,酶反應(yīng)不253321170.2626332l271.54完全,樣品沒有充分反應(yīng)。因此,采用凱式定氮法測定27332l371.02蛋白質(zhì)的含量低,物料的蛋

7、白質(zhì)提取率也低。而時間k174.3671.7672.1271.7971.40過長,樣品的蛋白質(zhì)提取率相差很小,但實驗的效率k272.2572.9873.2872.6573.25k370.6172.4871.8272.7872.57偏低。圖l顯示了時間對蛋白質(zhì)提取率的影響。R3.761.221.46O.991.85在溫度:45℃;料液比:l:10;酶活力:3000u/m1;ph:排秩143525的條件下,考察時間對蛋白質(zhì)提取率的影響。水浴1h柑橘籽,來自匯源集團。后隨著時間的增加,物料的蛋白質(zhì)提取率也逐漸提高,2.2試劑水浴2h后,測得的樣品蛋白質(zhì)提取率

8、最大;水浴2.5h纖維素酶,五水硫酸銅,硫酸鉀,硫酸,硼酸,鹽酸,后,測得的蛋白質(zhì)提取率與2h

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