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《乳白香青中綠原酸含量的HPLC法測(cè)定.doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、乳白香青中綠原酸含量的HPLC法測(cè)定 摘要：建立高效液相色譜法測(cè)定乳白香青中綠原酸含量的方法。采用ＺＯＲＢＡＸＳＢ－Ｃ１８色譜柱；以甲醇∶０．０４％磷酸為流動(dòng)相，流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ；檢測(cè)波長３３０ｎｍ；柱溫３０℃；進(jìn)樣量１０μＬ。綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品的進(jìn)樣濃度在０．０１２～０．２４０ｍｇ／ｍＬ的范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系， ｒ＝０．９９９９，加標(biāo)回收率平均值為１０１．２０％，ＲＳＤ＝１．３０％。高效液相色譜法精密度高，重現(xiàn)性好，是測(cè)定乳白香青中綠原酸含量準(zhǔn)確、簡便、有效的方法。 關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；乳白香
2、青；綠原酸 中圖分類號(hào)：Ｏ６５７．７＋２文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：0439－８11405－1030-02 ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＣｏｎｔｅｎｔｓｏｆＣｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃAｃｉｄｉｎＡｎａｐｈａｌｉｓｌａｃｔｅａｂｙＨＰＬＣ ?。祝粒危牵龋酰幔睿剩桑樱瑁铮酰椋幔睿?，ＨＵＭｉｎｇ－ｓｈａｎ，ＬＵＹｏｎｇ－ｃｈａｎｇ ?。粒猓螅簦颍幔悖簦海裕铮澹螅簦幔猓欤椋螅瑁幔睿龋校蹋茫恚澹簦瑁铮洌簦铮洌澹簦澹颍恚椋睿錭ｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｏｆＡｎａｐｈａｌｉｓｌａｃｔｅａｌＭａｘ
3、ｉmｂｙＨＰＬＣ．ＩｔｗａｓａｓｓａｙｅｄｗｉｔｈｚｏｒｂａｘＳＢ－Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ．ＴｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆＭｅｔｈａｎｏｌ－０．０４％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄａｑｕｅｏｕｓｓｏｌｕｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１．０ｍＬ／ｍｉｎ，ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｎｇｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓａｔ３００ｎｍ，ａｎｄｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆ３０℃．Ｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗａｓ１０μＬ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｗａｓａｇ
4、ｏｏｄｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｏｆ０．０１２～０．２４０ｍｇ／ｍＬ，ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ１０１．２０％，ＲＳＤｗａｓ１．３０％．Ｉｎｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ＨＰＬＣｗａｓａｎａｃｔｕａｌｌｙ，ｓｉｍｐｌｅ，ａｎｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｃｔcｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｉｎＡｎａｐｈａｌｉｓｌａｃｔｅａＭａｘｉｍ． ?。耍澹鳎铮颍洌螅海龋校蹋?；ＡｎａｐｈａｌｉｓｌａｃｔｅａｌＭａｘｉm.；ｃｈlｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ 乳白香青屬菊科香青屬多年生草本植物，主要分布于
5、青海東部、甘肅南部及四川西北部。為常用藏藥，全草用藥，具有活血散瘀、祛風(fēng)濕、消痞瘤、平肝潛陽、祛痰、平喘及外用止血、治風(fēng)寒感冒、胃潰瘍等功效［１－３］。綠原酸具有抗菌、抗病毒［４］、止血、抗氧化、消除自由基、抑制突變和抗腫瘤等作用［５］?！ ?duì)于乳白香青中的綠原酸的研究較少，尤其使用高效液相色譜法測(cè)定乳白香青中的綠原酸含量的研究在國內(nèi)尚未見報(bào)道。試驗(yàn)以乳白香青為試驗(yàn)材料，甲醇為溶劑，采用超聲的方法進(jìn)行提取，使用高效液相色譜法對(duì)乳白香青提取液中的綠原酸的含量進(jìn)行了測(cè)定，旨在為乳白香青的進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。
6、?。辈牧吓c方法 １．１材料 ?。保保痹囼?yàn)藥材乳白香青于２００９年７月采自青?；ブ鄙搅謭?chǎng)，由中國科學(xué)院西北高原生物研究所孫洪發(fā)研究員鑒定，樣品陰干后粉碎過８０目篩，冷藏保存。 ?。保保苍噭┚G原酸對(duì)照品；甲醇為色譜純，水為去離子水；其他提取試劑均為分析純?！ 。保保硟x器高效液相色譜儀，ＫＱ３２００Ｂ型超聲波清洗器，ＭＥ２１５Ｓ型電子天平。 ?。保卜椒ā 。保玻碧崛》椒?zhǔn)確稱取乳白香青樣品粉末２．０ｇ，用１５ｍＬ９５％甲醇超聲提?。矗担恚椋睿瑮l件提?。炒危^濾，合并濾液，用甲醇定容于５０ｍＬ
7、容量瓶中?；旌暇鶆蚝蠼?jīng)０．４５μｍ微孔濾膜過濾，濾液備用。 ?。保玻?綠原酸定量根據(jù)ＤＡＤ檢測(cè)器對(duì)綠原酸在２００～４００ｎｍ范圍掃描，用高效液相色譜儀測(cè)定保留時(shí)間與對(duì)照品對(duì)比，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，采用外標(biāo)法定量?！ ?biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密稱取綠原酸對(duì)照品１．２ｍｇ，用甲醇溶于５ｍＬ容量瓶中，定容至刻度，配制成０．２４ｍｇ／ｍＬ的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液０．１、０．４、１．０、１．２、１．６、２．０ｍＬ定容至２ｍＬ的流動(dòng)相溶液中，配制成濃度分別為０．０１２、０．０４８、０．１２０、０．１４４、0.192、０．２４０ｍ
8、ｇ／ｍＬ的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，將標(biāo)準(zhǔn)溶液用０．４５μｍ微孔濾膜過濾，在下述色譜條件下進(jìn)樣１０μＬ。以峰積分面積為縱坐標(biāo)，綠原酸的濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸分析，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：＝２３０．６ｘ－９３．９５， ｒ＝０．９９９９，說明綠原酸的濃度與吸光度在０．０１２～０．２４０ｍｇ／ｍＬ的范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。 ?。保玻?色譜條件ＺＯＲＢＡＸＳＢ－Ｃ１８色譜柱；流動(dòng)相為甲醇∶０．０４％磷酸＝２３∶７７，流速
