乳白香青中綠原酸含量的HPLC法測定.doc

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1、乳白香青中綠原酸含量的HPLC法測定　　摘要：建立高效液相色譜法測定乳白香青中綠原酸含量的方法。采用ＺＯＲＢＡＸＳＢ－Ｃ１８色譜柱；以甲醇∶０．０４％磷酸為流動相，流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ；檢測波長３３０ｎｍ；柱溫３０℃；進樣量１０μＬ。綠原酸標準品的進樣濃度在０．０１２～０．２４０ｍｇ／ｍＬ的范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，　　ｒ＝０．９９９９，加標回收率平均值為１０１．２０％，ＲＳＤ＝１．３０％。高效液相色譜法精密度高，重現(xiàn)性好，是測定乳白香青中綠原酸含量準確、簡便、有效的方法?！　￡P(guān)鍵詞：高效液相色譜法；乳白香

2、青；綠原酸　　中圖分類號：Ｏ６５７．７＋２文獻標識碼：Ａ文章編號：0439－８11405－1030-02　　　?。模澹簦澹颍恚椋睿幔簦椋铮睿铮妫簦瑁澹茫铮睿簦澹睿簦螅铮妫茫瑁欤铮颍铮纾澹睿椋鉇ｃｉｄｉｎＡｎａｐｈａｌｉｓｌａｃｔｅａｂｙＨＰＬＣ　　　　ＷＡＮＧＨｕａｎ，ＪＩＳｈｏｕ－ｘｉａｎｇ，ＨＵＭｉｎｇ－ｓｈａｎ，ＬＵＹｏｎｇ－ｃｈａｎｇ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｎＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅcｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｏｆＡｎａｐｈａｌｉｓｌａｃｔｅａｌＭａｘ

3、ｉmｂｙＨＰＬＣ．ＩｔｗａｓａｓｓａｙｅｄｗｉｔｈｚｏｒｂａｘＳＢ－Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ．ＴｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｃｏｎｓｉｓｔｅｄｏｆＭｅｔｈａｎｏｌ－０．０４％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃａｃｉｄａｑｕｅｏｕｓｓｏｌｕｔｉｏｎｗｉｔｈｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１．０ｍＬ／ｍｉｎ，ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｎｇｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓａｔ３００ｎｍ，ａｎｄｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｆ３０℃．Ｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗａｓ１０μＬ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｗａｓａｇ

4、ｏｏｄｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｏｆ０．０１２～０．２４０ｍｇ／ｍＬ，ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ１０１．２０％，ＲＳＤｗａｓ１．３０％．Ｉｎｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ，ＨＰＬＣｗａｓａｎａｃｔｕａｌｌｙ，ｓｉｍｐｌｅ，ａｎｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｃｔcｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄｉｎＡｎａｐｈａｌｉｓｌａｃｔｅａＭａｘｉｍ．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＨＰＬＣ；ＡｎａｐｈａｌｉｓｌａｃｔｅａｌＭａｘｉm.；ｃｈlｏｒｏｇｅｎｉｃａｃｉｄ　　　　乳白香青屬菊科香青屬多年生草本植物，主要分布于

5、青海東部、甘肅南部及四川西北部。為常用藏藥，全草用藥，具有活血散瘀、祛風濕、消痞瘤、平肝潛陽、祛痰、平喘及外用止血、治風寒感冒、胃潰瘍等功效［１－３］。綠原酸具有抗菌、抗病毒［４］、止血、抗氧化、消除自由基、抑制突變和抗腫瘤等作用［５］。　　對于乳白香青中的綠原酸的研究較少，尤其使用高效液相色譜法測定乳白香青中的綠原酸含量的研究在國內(nèi)尚未見報道。試驗以乳白香青為試驗材料，甲醇為溶劑，采用超聲的方法進行提取，使用高效液相色譜法對乳白香青提取液中的綠原酸的含量進行了測定，旨在為乳白香青的進一步開發(fā)利用提供參考。　

6、?。辈牧吓c方法　?。保辈牧稀　。保保痹囼炈幉娜榘紫闱嘤冢玻埃埃鼓辏吩虏勺郧嗪；ブ鄙搅謭觯芍袊茖W院西北高原生物研究所孫洪發(fā)研究員鑒定，樣品陰干后粉碎過８０目篩，冷藏保存?！　。保保苍噭┚G原酸對照品；甲醇為色譜純，水為去離子水；其他提取試劑均為分析純。　?。保保硟x器高效液相色譜儀，ＫＱ３２００Ｂ型超聲波清洗器，ＭＥ２１５Ｓ型電子天平?！　。保卜椒ā　。保玻碧崛》椒蚀_稱取乳白香青樣品粉末２．０ｇ，用１５ｍＬ９５％甲醇超聲提?。矗担恚椋睿瑮l件提?。炒危^濾，合并濾液，用甲醇定容于５０ｍＬ

7、容量瓶中。混合均勻后經(jīng)０．４５μｍ微孔濾膜過濾，濾液備用?！　。保玻?綠原酸定量根據(jù)ＤＡＤ檢測器對綠原酸在２００～４００ｎｍ范圍掃描，用高效液相色譜儀測定保留時間與對照品對比，制作標準曲線，采用外標法定量。　　標準曲線的繪制：精密稱取綠原酸對照品１．２ｍｇ，用甲醇溶于５ｍＬ容量瓶中，定容至刻度，配制成０．２４ｍｇ／ｍＬ的標準儲備液。取標準儲備液０．１、０．４、１．０、１．２、１．６、２．０ｍＬ定容至２ｍＬ的流動相溶液中，配制成濃度分別為０．０１２、０．０４８、０．１２０、０．１４４、0.192、０．２４０ｍ

8、ｇ／ｍＬ的系列標準溶液，將標準溶液用０．４５μｍ微孔濾膜過濾，在下述色譜條件下進樣１０μＬ。以峰積分面積為縱坐標，綠原酸的濃度為橫坐標進行線性回歸分析，繪制標準曲線：＝２３０．６ｘ－９３．９５，　?。颍剑埃梗梗梗梗f明綠原酸的濃度與吸光度在０．０１２～０．２４０ｍｇ／ｍＬ的范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。　?。保玻?色譜條件ＺＯＲＢＡＸＳＢ－Ｃ１８色譜柱；流動相為甲醇∶０．０４％磷酸＝２３∶７７，流速