華南地區(qū)豬群中葡萄球菌的分離鑒定及豬葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表達(dá).pdf

華南地區(qū)豬群中葡萄球菌的分離鑒定及豬葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表達(dá).pdf

ID:57746806

大?。?.86 MB

頁(yè)數(shù):54頁(yè)

時(shí)間:2020-03-27

華南地區(qū)豬群中葡萄球菌的分離鑒定及豬葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表達(dá).pdf_第1頁(yè)
華南地區(qū)豬群中葡萄球菌的分離鑒定及豬葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表達(dá).pdf_第2頁(yè)
華南地區(qū)豬群中葡萄球菌的分離鑒定及豬葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表達(dá).pdf_第3頁(yè)
華南地區(qū)豬群中葡萄球菌的分離鑒定及豬葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表達(dá).pdf_第4頁(yè)
華南地區(qū)豬群中葡萄球菌的分離鑒定及豬葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表達(dá).pdf_第5頁(yè)
資源描述:

《華南地區(qū)豬群中葡萄球菌的分離鑒定及豬葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表達(dá).pdf》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線(xiàn)閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。

1、分類(lèi)號(hào)S859.7學(xué)校代碼10129UDC11.220學(xué)號(hào)08201078華南地區(qū)豬群中葡萄球菌的分離鑒定及豬葡萄球菌EXHC毒素基因的原核表達(dá)IsolationandIdentificationofStaphylococcusfromPigsinSouthofChinaandProkaryoticExpressionofEXHCToxinsGeneofStaphylococcushyicus申請(qǐng)人:張樂(lè)宜學(xué)科門(mén)類(lèi):農(nóng)學(xué)學(xué)科專(zhuān)業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向:獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)指導(dǎo)教師:郝永清教授宋長(zhǎng)緒研究

2、員論文提交日期:二〇一一年五月摘要豬滲出性皮炎是由葡萄球菌引起的一種以哺乳仔豬和剛斷奶仔豬的急性或超急性接觸性傳染病,患病仔豬主要以滲出性,發(fā)熱、脫水和死亡為主要臨床特征,具有傳播快、死亡率高等特點(diǎn)。該病嚴(yán)重影響仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育,給我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究針對(duì)華南周邊地區(qū)疑似患有滲出性皮炎的病豬進(jìn)行了葡萄球菌的分離鑒定及分類(lèi);通過(guò)對(duì)篩選出的7株豬葡萄球菌脫落毒素基因的檢測(cè)建立了脫落毒素基因的PCR檢測(cè)方法;對(duì)鑒定出的EXHC基因進(jìn)行了克隆和表達(dá)。1、通過(guò)鏡檢、生化鑒定初步分離到了16株

3、葡萄球菌;動(dòng)物致病性試驗(yàn)中,豬葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、松鼠源葡萄球菌、產(chǎn)色葡萄球菌的試驗(yàn)組小鼠的死亡率分別為:100%,83.3%,66.7%,100%,16.7%,而模仿葡萄球菌、科氏葡萄球菌的實(shí)驗(yàn)組有沒(méi)有死亡個(gè)體;藥敏試驗(yàn)中這些菌株對(duì)頭孢類(lèi)、新生霉素等抗生素高度敏感,對(duì)青霉素類(lèi)抗生素產(chǎn)生耐藥性。2、參照葡萄球菌Gap(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenases,甘油醛-三磷酸脫氫酶)和16SrRNA基因的通用引物對(duì)初步鑒定出的16株葡萄球菌進(jìn)

4、行了基因克隆和序列分析。Gap基因克隆測(cè)序結(jié)果在NCBI上進(jìn)行Blast分析,分離的16株菌株可以歸類(lèi)為Staphylococcushyicus、Staphylococcusepidermidis、Staphylococcuschromogenes、Staphylococcussimulans、Staphylococcussciuri、Staphylococcuscohnii、Staphylococcushaemolyticus,其同源性分別為100%、99%、93%、100%、98%、96%、9

5、9%,以上分離到的7類(lèi)菌種與不同亞種之間的同源性75.6~99%。16SrRNA基因克隆、序列比對(duì)分析顯示葡萄球菌屬的不同亞種之間核苷酸差異性不明顯,同源性為92%以上。3、利用建立的PCR檢測(cè)方法對(duì)分離的7株豬葡萄球菌進(jìn)行脫落毒素基因的檢測(cè)。結(jié)果顯示SHETA的檢出率為100%;EXHA的檢出率為28.7%;EXHC、EXHB的檢出率均為14.3%。4、對(duì)分離的GDZC株進(jìn)行了Gap基因的克隆及序列分析,并對(duì)EXHC基因進(jìn)行了克隆和表達(dá)。結(jié)果表明,該菌株Gap基因與Genbank已發(fā)表豬葡萄球菌

6、(AF495492)菌株的核苷酸同源性為99%;EXHC基因與Genbank上已發(fā)表的丹麥分離株(AF515455)核苷酸序列同源性為100%。將EXHC基因插入pET-28a(+)載體,經(jīng)酶切和測(cè)序鑒定正確后,成功構(gòu)建了pET-28a(+)-EXHC原核表達(dá)載體。關(guān)鍵詞:葡萄球菌;豬葡萄球菌;滲出性皮炎;脫落毒素IsolationandIdentificationofStaphylococcusfromPigsinSouthofChinaandProkaryoticExpressionofEXH

7、CToxinsGeneofStaphylococcushyicusAbstractExudativedermatitisiscausedbystaphylococcuswithalactationpigletandjustweanedpigletsacuteorsuperacutecontactsexuallytransmitteddiseases,sickwithexudative,mainpigletsnecrotizingdermatitis,fever,dehydrationanddeat

8、hforcharacteristics,whichisspreadingfast,mortality,highercharacteristic,5-6day-oldpeakincidencepiglets.Thediseaseseriouslyaffectthegrowthanddevelopmentofpiglets,giveourbreedingcausedagreateconomiclosses.Inthisstudy,isolatedandidentifiedStaphyl

當(dāng)前文檔最多預(yù)覽五頁(yè),下載文檔查看全文

此文檔下載收益歸作者所有

當(dāng)前文檔最多預(yù)覽五頁(yè),下載文檔查看全文
溫馨提示:
1. 部分包含數(shù)學(xué)公式或PPT動(dòng)畫(huà)的文件,查看預(yù)覽時(shí)可能會(huì)顯示錯(cuò)亂或異常,文件下載后無(wú)此問(wèn)題,請(qǐng)放心下載。
2. 本文檔由用戶(hù)上傳,版權(quán)歸屬用戶(hù),天天文庫(kù)負(fù)責(zé)整理代發(fā)布。如果您對(duì)本文檔版權(quán)有爭(zhēng)議請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系客服。
3. 下載前請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔內(nèi)容,確認(rèn)文檔內(nèi)容符合您的需求后進(jìn)行下載,若出現(xiàn)內(nèi)容與標(biāo)題不符可向本站投訴處理。
4. 下載文檔時(shí)可能由于網(wǎng)絡(luò)波動(dòng)等原因無(wú)法下載或下載錯(cuò)誤,付費(fèi)完成后未能成功下載的用戶(hù)請(qǐng)聯(lián)系客服處理。