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《高效液相色譜法測定安痛藤中羽扇豆醇的含量 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、高效液相色譜法測定安痛藤中羽扇豆醇的含量鄧鵬謝一輝張葉青余無雙【摘要】 目的建立安痛藤中羽扇豆醇含量的測定方法。方法采用高效液相色譜（HPLC）法，色譜柱為diamonsilC18(5μm，250mm×4.6mm)，流動相為甲醇∶水=98∶2,流速1.0ml·min-1，檢測波長206nm，柱溫為30℃。結(jié)果羽扇豆醇在0.316～3.16μg范圍內(nèi)與峰面積有良好線性關(guān)系,r=0.9995，平均回收率為97.82%，RSD為2.49%。結(jié)論該方法測定安痛藤中羽扇豆醇含量快速、簡便、準確、可靠?！娟P(guān)鍵詞】
2、高效液相色譜安痛藤羽扇豆醇 安痛藤為葡萄科白粉藤屬植物苦朗藤Cissusassamica(LaonsilC18(5μm，250mm×4.6mm;DIKMA公司)；KQ3200型超聲儀；羽扇豆醇對照品(自制,歸一化含量99.80%)；甲醇為色譜純，其它試劑均為分析純，水為超純水；安痛藤藥材采于江西贛南地區(qū)，由江西中醫(yī)學(xué)院劉慶華老師鑒定為葡萄科白粉藤屬植物苦朗藤Cissusassamica(LaonsilC18(5μm,250mm×4.5mm)色譜柱,甲醇∶水(98∶2)為流動相,柱溫30℃,流速1ml·
3、min-1,檢測波長206nm；羽扇豆醇對照品進樣量和安痛藤供試液進樣量20μl。在上述色譜條件下,羽扇豆醇與其它成分分離良好,理論塔板數(shù)以羽扇豆醇峰計算不低于5000；分離度接近于1.5,基本實現(xiàn)基線分離。結(jié)果見圖1～2?！ ?.2對照品溶液的制備精密稱取羽扇豆醇對照品適量，置于25ml量瓶中,加甲醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（0.158mg/ml）?！ ?.3供試品溶液的制備取安痛藤粉末(過60目)約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇40ml，稱定重量，超聲30min，放冷，稱定重量
4、，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液20ml，水浴蒸干，用氯仿溶解(2，2，1ml)，合并氯仿液上1.5g硅膠柱，用氯仿洗脫，收集洗脫液8ml，蒸干，用甲醇溶解并定容至2ml，0.45μm濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得?！ D1羽扇豆醇對照品色譜圖（略） 圖2安痛藤供試液色譜圖（略） 2.4線性關(guān)系的考察精密吸取對照品溶液1，2，4，6，8，10ml置于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，制成濃度為15.8，31.6，63.2，94.8，126.4，158μg·ml-1羽扇豆醇對照品溶液，分別進樣
5、20μl。以羽扇豆醇的質(zhì)量（μg）為橫坐標，峰面積為縱坐標進行線性回歸，回歸方程為：Y=383.54X+26.066，r=0.9995。結(jié)果表明，羽扇豆醇在0.316～3.16μg范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。 2.5穩(wěn)定性實驗取安痛藤約2g，精密稱定，按供試液制備項制備供試液，進樣20μl/次，共6次，分別在0，4，8，12，16，24h進樣并記錄峰面積值。計算結(jié)果顯示：6次羽扇豆醇含量測定結(jié)果基本不變，平均值為0.0162%，RSD=1.20%，表明供試液至少在24h內(nèi)穩(wěn)定?！ ?.6精密度實驗精
6、密吸取安痛藤供試液，連續(xù)進樣6次，20μl/次，6次進樣測得羽扇豆醇含量平均結(jié)果為0.0163%,RSD=1.33%，表明本實驗方法精密度良好?！ ?.7重復(fù)性實驗取安痛藤粉末6份，每份約2g，精密稱定，按供試液制備項制備供試液，進樣20μl，記錄峰面積值。6份樣品羽扇豆醇含量平均值為0.0160%，RSD=2.41%，結(jié)果表明本實驗方法重復(fù)性良好?！ ?.8加樣回收實驗取安痛藤粉末(過60目)6份，每份約2g，精密稱定，按供試液制備項制備，在“精密吸取續(xù)濾液20ml”后分別精密加入羽扇豆醇對照品溶
7、液1ml（含羽扇豆醇為0.1223mg），繼續(xù)制得供試液。進樣20μl/次，每份供試品溶液進樣3次。結(jié)果見表1。 結(jié)果顯示，用HPLC法測定安痛藤中羽扇豆醇的含量，回收率結(jié)果令人滿意?！ ?.9系統(tǒng)適應(yīng)性實驗選擇了3種色譜柱：DiamonsilC18(5μm，250mm×4.6mm)，HypersilODS2(5μm，250mm×4.6mm,大連依利特)色譜柱和EclipseXDB-C18(5μm，250mm×4.6mm，安捷倫公司)色譜柱，按本法測定安痛藤藥材中羽扇豆醇的含量，測定結(jié)果基本一致，均值
8、為0.0162%,RSD為2.49%。表明本法適應(yīng)性較好?！ ”?加樣回收率實驗結(jié)果（略） 2.10樣品的含量測定取不同采收期的安痛藤樣品按“2.3”項下制備供試品溶液，進樣量20μl，測定供試品中羽扇豆醇的含量。結(jié)果見表2?！ ”?安痛藤不同采收期羽扇豆醇的含量測定（略） 結(jié)果顯示，不同采收期安痛藤樣品中的羽扇豆醇含量存在較大的差異。由于樣品來源于山區(qū)，受到人為因素的影響較小，主要影響因素可能在于日曬與水分等自然條件。2004,200
